目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌多药耐药(MDR)中的作用及机制。方法:采用24孔板体外培养胃癌MGC-803细胞株，设空白对照组、MDR组、空载质粒组、lncRNA ZNRD1-AS1过表达组、微小核糖核酸-375模拟物(miR-375 mimic)组及联合干预组。除空白对照组以外，均采用阿霉素梯度浓度法建立MDR株。建立成功以后，lncRNA ZNRD1-AS1过表达组和miR-375 mimic组分别采用慢病毒转染法转染lncRNA ZNRD1-AS1过表达质粒和miR-375 mimic，空载质粒组转染空载质粒与模拟物对照(mimic NC)。共培养48 h，采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA ZNRD1-AS1和miR-375表达，采用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测Yes相关蛋白1(YAP1)、哺乳动物不育系20样激酶1(Mst1)、大肿瘤抑制基因-1(Lats1)的蛋白表达，采用噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞实验检测细胞的增殖活力与凋亡率，Transwell实验检测MGC-803细胞侵袭能力。结果:各组之间的lncRNA ZNRD1-AS1、miR-375、YAP1表达水平差异均有统计学意义( F＝60.465、75.695、63.441，均 P<0.05)；细胞增殖活力、凋亡率与侵袭数目差异也有统计学意义( F＝ 26.818、63.854、16.323，均 P<0.05)。MDR组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为1.736±0.084和0.825±0.135，高于对照组(1.025±0.036和0.155±0.02)，miR-375表达为0.054±0.018，低于对照组(0.128±0.028)；细胞增殖活力和迁移数目分别为0.855±0.026和152.5±20.5，高于对照组(0.652±0.015和85.0±15.5)，凋亡率为(3.85±1.02)%，低于对照组[(6.55±1.05)%， P<0.05]。lncRNA ZNRD1-AS1过表达组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为6.582±1.035和1.256±0.185，均高于MDR组，miR-375表达水平为0.015±0.011，低于MDR组；细胞增殖活力和迁移数目分别为0.987±0.030和(202.5±32.5)个，高于MDR组，凋亡率为(2.03±0.62)%，低于MDRMDR组( P<0.05)。miR-375 mimic组lncRNA ZNRD1-AS1和YAP1表达水平分别为0.225±0.086和0.056±0.035，均低于MDR组，miR-375表达水平为32.524±5.254，高于MDR组；细胞增殖活力和迁移能力为0.562±0.085和(80.5±14.6)个，低于MDR组，凋亡率为(18.25±2.10)%，高于MDR组( P<0.05)。共干预组各个指标的变化水平介于lncRNA ZNRD1-AS1过表达组与miR-375 mimic组之间，与两组比较差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:lncRNA ZNRD1-AS1能够通过miR-375调节胃癌细胞的行为学特征，从而促进MDR，其机制可能与YAP1介导的Hippo信号通路有关。

目的:探讨长链非编码核糖核酸ZNRD1-AS1(lncRNA ZNRD1-AS1)在胃癌组织中的表达特点及其诊断学价值。方法:选取嘉兴学院附属第二医院胃肠外科收治的96例经手术治疗、且留有手术样本的胃癌患者作为研究对象，根据是否发生转移分为转移癌41例和原位癌55例。详细统计患者的临床病理和预后资料，并采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测癌组织及癌旁健康组织的lncRNA ZNRD1-AS1和微小核糖核酸-375模拟物(miR-375 mimic)表达水平。两组之间的比较行配对设计或独立样本 t检验，多组间的比较行单因素方差分析。 结果:癌组织的lncRNA ZNRD1-AS1表达水平高于癌旁健康组织(1.051±0.205比0.645±0.145， t＝15.845， P<0.001)；癌组织的miR-375表达水平低于癌旁健康组织(1.014±0.197比1.365±0.245， t＝10.965， P<0.001)。转移癌组织的lncRNA ZNRD1-AS1表达水平高于原位癌组织(1.201±0.165比0.953±0.148， t＝3.604， P<0.01)；转移癌组织的miR-375表达水平低于原位癌组织(0.995±0.164比1.193±0.176， t＝5.612， P<0.001)。不同TNM分期癌组织的lncRNA ZNRD1-AS1表达水平也不同( F＝14.437， P<0.001)，Ⅰ期低于Ⅱ期(0.937±0.157比1.095±0.187， P<0.001)；Ⅱ期低于Ⅲ期(1.095±0.187比1.185±0.154， P<0.001)。根据lncRNA ZNRD1-AS1表达水平的中位数把患者分为高表达组48例和低表达组48例，高表达组的总生存率低于低表达组[52.1%(25/48)比72.9%(35/48)， χ2＝4.444， P<0.05]，无进展生存率也低于低表达组[41.7%(20/48)比64.5%(31/48)， χ2＝5.061， P<0.05]。 结论:lncRNA ZNRD1-AS1与胃癌的发生与发展密切相关。

目的 探讨慢性牙周炎患者龈沟液微小核糖核酸(miR)-143、miR-375表达及与疾病严重程度的关系.方法 选取2022年1月至2023年7月在呼和浩特市第一医院确诊的135例慢性牙周炎患者作为研究组,根据疾病严重程度分为轻度组(n=58)、中度组(n=37)和重度组(n=40).另选同期在该院体检的健康志愿者127例作为对照组.实时荧光定量PCR检测miR-143、miR-375相对表达水平,酶联免疫吸附试验试剂盒测定龈沟液炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)]水平.Pearson相关性分析龈沟液miR-143、miR-375表达与临床指标及炎症因子水平的相关性.结果 对照组与研究组年龄、性别、刷牙次数、吸烟占比比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,研究组龈沟液miR-143相对表达水平显著升高,miR-375相对表达水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与中度组比较,重度组出血指数(BI)、牙龈指数(GI)、牙周袋探针深度(PD)、附着丧失(AL)显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与中度组比较,重度组IL-6、TNF-α、CRP水平显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).慢性牙周炎患者龈沟液miR-143相对表达水平与BI、GI、PD、AL及龈沟液CRP、TNF-α、IL-6水平均呈正相关(P＜0.05);龈沟液miR-375相对表达水平与BI、GI、PD、AL及龈沟液CRP、TNF-α、IL-6水平均呈负相关(P＜0.05).结论 慢性牙周炎患者龈沟液miR-143、miR-375表达可评估患者疾病严重程度,对慢性牙周炎病情判断具有参考价值.

目的 探讨食管癌组织中微小核糖核酸-375(miR-375)、矮小同源盒基因2(SHOX2)的表达及临床意义.方法 选取食管癌患者90例,均接受根治术治疗.术中收集部分癌组织及对应癌旁组织,用实时荧光定量PCR法检测miR-375、SHOX2 mRNA,通过Targetscan网站、miRTargetLink网站、miRanda网站、PicTar网站预测miR-375与SHOX2结合位点,用Pearson相关分析法分析食管癌组织中miR-375、SHOX2 mRNA表达的相关性,分析二者表达与临床病理参数的关系.对患者进行随访,统计3年生存率,分析miR-375、SHOX2 mRNA表达与3年生存率的关系.用多因素Cox回归模型分析miR-375、SHOX2 mRNA表达对食管癌患者根治术后预后的影响.结果 食管癌组织miR-375表达低于癌旁组织,SHOX2 mRNA表达高于癌旁组织(P均<0.05).经在线网站预测,miR-375与SHOX2的3'非翻译端1 489～1 496处存在结合位点;Pearson相关分析显示,食管癌组织中miR-375、SHOX2 mRNA表达呈负相关(r=-0.825,P<0.05).不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移的食管癌组织中miR-375、SHOX2 mRNA比较差异有统计性意义(P均<0.05).随访3年,90例食管癌患者死亡29例,总生存率为67.78%(61/90).高miR-375表达者总生存率高于低miR-375表达者,高SHOX2 mRNA表达者总生存率低于低SHOX2 mRNA表达者(P均<0.05).多因素Cox回归模型分析结果显示,肿瘤低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移、SHOX2 mRNA≥1.38为食管癌患者根治术后预后的独立危险因素(P均<0.05),miR-375≥0.66为独立保护因素(P<0.05).结论 食管癌组织中miR-375低表达、SHOX2 mRNA高表达,二者表达变化与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移及预后有关.

目的 探讨miR-375与胃肠间质瘤细胞对伊马替尼敏感性的关系以及可能的作用机制.方法 收集2017年1月至2018年2月在河南省肿瘤医院病理科存档的石蜡包埋45例胃肠间质瘤(GIST)组织标本和对应的癌旁正常胃黏膜组织标本.向GIST-T1细胞中分别转染miR-375 mimics(转染组)或空质粒(阴性对照组),采用MTY法和流式细胞术检测两组细胞增殖和凋亡活性.采用荧光定量PCR法(QPCR)分别检测GIST组织中miR-375水平和GIST-T1细胞中miR-375、p-VEGFR2、p-Akt、PTEN表达水平.结果 GIST组织和癌旁正常黏膜组织中miR-375水平分别为0.673±0.078和1.000±0.101,差异有统计学意义(P＜0.05).13例GIST组织中miR-375表达呈阳性,阳性表达率为28.9％.经不同浓度伊马替尼(2、5、10 μmol/L)处理后,转染组细胞增殖抑制率和凋亡率分别为(24.51±2.10)％、(52.39±4.23)％、(84.57±4.64)％和(17.95±3.66)％、(35.42±3.57)％、(63.47±3.24)％,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).经6.13 μmol/L伊马替尼作用后,GIST-T1细胞miR-375表达量为2.439±0.056,显著高于未经伊马替尼处理的1.000±0.037,差异有统计学意义(P＜0.05).经miR-375 mimics转染后,GIST-T1细胞中p-VEGFR2和p-Akt表达水平分别为2.12±0.07、1.82±0.09,明显高于阴性对照组,而PTEN mRNA表达水平为0.45±0.12,显著低于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-375与p-VEG-FR2、p-Akt mRNA表达水平呈正相关性(r=0.689,0.465,P＜0.05),与PTEN mRNA呈负相关性(r=-0.523,P＜0.05).结论 上调miR-375可增加VEGFR-2和Akt磷酸化水平,从而提高GIST细胞对伊马替尼的敏感性.

肝细胞肝癌(HCC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,其早期症状隐匿,预后差,临床上对其早期诊断有一定的局限性.大量研究表明微小核糖核酸-375(miR-375)与HCC的发生发展有十分密切的关系,miR-375可通过靶向调节致癌基因信号通路影响HCC的发生或发展过程,是HCC早期诊断或预后的标志物.本文就近年miR-375与HCC研究的最新进展作一概述,为HCC的早期诊断、治疗及预后提供理论依据.

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA) LINC00324和微小核糖核酸(microRNA,miR)-375对胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及机制.方法 Real-time PCR检测2017年6月至2018年12月20例行手术切除患者的胶质瘤组织和脑外伤20例行颅内减压手术患者的正常脑组织中lncRNA LINC00324和miR-375的水平,双荧光素酶报告系统验证lncRNA LINC00324与miR-375的关系.在外购的胶质瘤U251细胞中转染si-LINC00324、miR-375以抑制LINC00324和过表达miR-375;CCK8法、流式细胞术和Transwell实验分别检测胶质瘤U251细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力.结果 与正常脑组织相比,胶质瘤组织中lncRNA LINC00324表达水平显著升高,miR-375表达水平显著降低(P均＜0.01).过表达lncRNA LINC00324可下调胶质瘤U251细胞中miR-375含量(P＜0.05),抑制lncRNA LINC00324可上调miR-375含量(P＜0.05),即lncRNA LINC00324靶向负调控miR-375的表达.抑制lncRNA LINC0032后,U251细胞中LINC00324含量、反映细胞增殖情况的OD值、侵袭和迁移细胞数降低,凋亡率升高(P＜0.05,P＜0.01);过表达miR-375后,U251细胞中miR-375含量升高,OD值、侵袭和迁移细胞数降低,凋亡率升高(p均＜0.01);即抑制lncRNA LINC00324和过表达miR-375均可抑制U251细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡.在抑制LINC00324的同时干扰miR-375,U251细胞中miR-375含量降低,OD值、侵袭和迁移细胞数升高,凋亡率降低(P均＜0.01),即干扰miR-375可逆转抑制lncRNA LINC00324对U251细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响.结论 LncRNA LINC00324通过靶向miR-375调控U251细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡,其可能作为胶质瘤的潜在分子靶点.

目的 观察联合检测尿液微小核糖核酸375(miRNA-375)和微小核糖核酸145-5p(miR-145-5p)水平在膀胱癌诊断和预后的临床价值.方法 选择2012年1月至2016年1月在复旦大学附属中山医院青浦分院就诊确诊为膀胱癌的病人112例,为膀胱癌组,选择同期在复旦大学附属中山医院青浦分院行健康体检者45例,为健康对照组.选取两组的尿液标本采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)的方法检测miRNA-375和miR-145-5p的表达水平.观察两组尿液miRNA-375和miR-145-5p水平的差异,膀胱癌病人尿液miRNA-375和miR-145-5p表达水平术前术后变化,与临床指标和预后的关系,及其在诊断膀胱癌和判断其预后的灵敏度和特异度.结果 膀胱癌组尿液miRNA-375表达明显高于健康对照组[(3.95±1.26)比(2.30±0.54)P<0.01],术后较术前明显降低[(2.43±1.08)比(3.95±1.26),P<0.01],而miR-145-5p的表达明显低于健康对照组[(1.48±0.75)比(2.68±0.61),P<0.01],术后较术前明显升高[(2.56±0.67)比(1.48±0.75),P<0.01].尿液miRNA-375和miR-145-5p表达在诊断膀胱癌具有较高的灵敏度和特异度,联合检测的灵敏度87.5％,特异度93.3％,其曲线下面积明显高于miRNA-375(z=2.316,P=0.021)和miR-145-5p(z=2.727,P=0.006)单独检测,而miRNA-375和miR-145-5p之间无明显差别(z=0.921,P>0.05)尿液miRNA-375和miR-145-5p表达水平与性别、年龄、肿瘤部位和肿瘤分级无明显相关性(P>0.05),而与肿瘤分期、淋巴结转移和肿瘤数目具有明显相关性(P<0.01).膀胱癌病人随访3年,出现23例死亡,89例存活,死亡组的miRNA-375表达水平明显高于存活组(P<0.01),而miR-145-5p表达水平明显低于存活组(P<0.01).尿液miRNA-375表达水平在预测膀胱癌3年内出现死亡的灵敏度为78.3％,特异度95.5％,其曲线下面积为0.891;而尿液miR-145-5p表达水平在预测膀胱癌3年内出现死亡的灵敏度为95.7％,特异度为70.8％,曲线下面积为0.856.两者联合检测并不能提高预测3年内出现死亡的诊断效能.结论 miRNA-375和miR-145-5p参与了膀胱癌的发生发展,尿液中的miRNA-375和miR-145-5p检测对于膀胱癌的诊断和预后判断具有重要临床价值.

目的 探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆微小核糖核酸(miR)-375水平与预后的关系.方法 选取2016年3月至2017年4月在昆明医科大学第一附属医院接受经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的206例ACS患者作为研究对象.采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测ACS患者血浆miR-375水平,分析其与患者预后的关系.结果 PCI术后预后不良组血浆miR-375水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05).低miR-375组平均生存时间高于高miR-375组,差异有显著统计学意义(P<0.001).Cox多因素分析结果显示,ACS家族史和miR-375是ACS预后的独立危险因素(P<0.05).限制性立方样条分析结果显示,血浆miR-375水平与ACS预后明显相关(P<0.001),且呈线性关系(非线性检验,P=0.127).与miR-375=2.62比较,患者miR-375>2.62时,预后不良风险增加.结论 ACS患者PCI术后血浆miR-375水平降低.PCI术后血浆miR-375水平升高与ACS预后不良有关,是ACS预后不良的独立危险因素.

目的:探讨益气养阴活血方改善2型糖尿病(T2 DM)大鼠胰岛分泌功能的作用机制.方法:选取无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠66只,随机分为对照组11只及造模组55只.造模组用高糖高脂饲料喂养联合链脲佐菌素建立T2DM模型,对照组给予标准颗粒饲料喂养及等体积0.1 mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.造模成功的大鼠分为模型组、益气养阴活血方低、中、高剂量组及西药组,每组11只.模型组及对照组给予蒸馏水,益气养阴活血方低、中、高剂量组给予0.43 g/mL、0.86 g/mL、1.72 g/mL益气养阴活血方;西药组予以20 mg/mL二甲双胍悬液;各组灌胃剂量10 mL/kg,1次/d,连续12周.检测比较空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、胰岛细胞凋亡指数、胰岛微小核糖核酸-375(miR-375)及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平.结果:与模型组比较,各组FBG水平、胰岛细胞凋亡指数、胰岛组织miR-375及Caspase-3表达水平较低,FINS、HOMA-β水平及胰岛组织Bcl-2表达水平较高,差异均有统计学意义(P<0.05),且益气养阴活血方组呈一定量效关系.结论:益气养阴活血方能剂量依赖性的降低T2DM大鼠血糖,改善胰岛分泌功能,抑制胰岛细胞凋亡,其作用机制可能与抑制胰岛组织miR-375表达,调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase-3表达有关.