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沉默长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1对人脐静脉内皮细胞的影响
编辑人员丨1周前
目的:观察长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1(LEF1-AS1)基因沉默后对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移和血管生成能力的影响。方法:采用RNA干扰技术,在HUVEC(美国模式培养物集存库)中沉默LEF1-AS1基因的表达,细胞分为对照组与实验组,即NC组和si-LEF1-AS1组,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测转染效果;细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell分别检测细胞增殖和迁移力的变化;体外血管生成实验检测LEF1-AS1对血管生成能力的影响。两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:RT-qPCR结果显示,si-LEF1-AS1组LEF1-AS1 mRNA的相对表达量(0.059±0.010)低于NC组(1.000±0.018),差异有统计学意义( t=40.824, P<0.01);CCK-8实验结果显示,HUVECs在处理24 h后si-LEF1-AS1组细胞的吸光度( A)值(0.103±0.004)少于NC组(0.129±0.006),在处理48 h后si-LEF1-AS1组细胞的 A值(0.235±0.016)也少于NC组(0.431±0.018),在处理72 h后si-LEF1-AS1组细胞的 A值(0.454±0.029)也少于NC组(0.846±0.034);Transwell迁移实验结果显示si-LEF1-AS1组迁移到小室下侧的相对细胞数(0.446±0.025)少于NC组(1.000±0.046),差异有统计学意义( t=17.120, P<0.01);血管形成实验结果显示si-LEF1-AS1组的总成管长度(3 152.333±200.959)少于NC组(13 263.667±247.823),差异有统计学意义( t=54.891, P<0.01)。 结论:沉默长链非编码RNA LEF1-AS1抑制HUVEC细胞的增殖、迁移及血管生成能力。
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编辑人员丨1周前
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长链非编码RNA LEF1-AS1对宫颈癌细胞增殖与细胞周期和转移的影响及作用机制
编辑人员丨2023/8/5
目的 研究长链非编码RNA淋巴增强因子结合因子1反义RNA1(lymphoid enhancer-binding factor 1 antisense RNA 1,lncRNA LEF1-AS1)对宫颈癌细胞增殖、细胞周期和转移的影响,并探讨其发挥作用的机制.方法 采用qRT-PCR检测lncRNA LEF 1-AS1宫颈癌和正常宫颈组织中的表达水平;分析lncRNA LEF1-AS1的表达水平与宫颈癌患者临床病理参数的关系;常规培养宫颈癌细胞系HeLa,转染lncRNA LEF 1-AS1小干扰RNA(siRNA),分为对照组si-NC和实验组si-LEF1-AS1-1组、si-LEF 1-AS 1-2组.qRT-PCR检测各组细胞中lncRNA LEF 1-AS1的表达水平;MTS实验检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞周期;Transwell检测各组细胞转移能力;Western blotting检测lncRNA LEF 1-ASl对Hippo信号通路的影响.结果 qRT-PCR结果显示lncRNA LEF 1-AS1在宫颈癌中的表达高于正常宫颈组织,且1ncRNA LEF1-AS1表达水平与宫颈癌患者浸润深度及淋巴结转移相关.与对照组si-NC相比,实验组si-LEF1-AS1-1组、si-LEF1-AS1-2组细胞中lncRNA LEF 1-AS1的表达降低(P<0.05),细胞增殖能力降低,细胞周期阻滞在G0/G1期及细胞转移能力降低;与对照组si-NC相比,实验组si-LEF1-AS1-1组、si-LEF 1-AS 1-2组细胞中Mst1、Mst2和pYAP蛋白表达升高,YAP1蛋白表达降低.结论 lncRNA LEF 1-AS1在宫颈癌组织中表达增加,可能通过抑制Hippo信号通路调控宫颈癌细胞的增殖、细胞周期和转移.lncRNA LEF 1-AS1可能是治疗宫颈癌的潜在靶点.
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编辑人员丨2023/8/5
