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双须骨舌鱼卵黄蛋白原基因vtg的克隆、组织表达和原核表达分析
编辑人员丨2023/8/6
为探究双须骨舌鱼(Osteoglossum bicirrhosum)卵黄蛋白原vtg基因的结构和表达特征,本研究运用RACE技术克隆双须骨舌鱼vtg全长cDNA序列.序列分析发现,双须骨舌鱼vtg的cDNA全长为5 325 bp,开放阅读框(ORF)为5 121 bp,其5 ′和3′非编码区(UTR)分别为46 bp和159 bp,共编码1 706个氨基酸,预测蛋白质分子量约为186.79 ku.同源性分析发现,双须骨舌鱼与同科的美丽仆骨舌鱼(Scleropages formosus)相似度达到84.78％,与鲤形目、鲈形目、鲱形目、鲽形目鱼类的相似度均高于50％.系统进化树分析结果显示,本文获得的双须骨舌鱼vtg基因与骨舌鱼目聚为一类,与鳗鲡目硬骨鱼类亲缘关系较近,与双须骨舌鱼进化地位相符.荧光定量PCR检测结果表明,在雌雄鱼性腺和肝中vtg均有表达,且在雌鱼肝中的相对表达量显著高雄鱼(P＜0.05),卵巢和精巢表达量无显著差异(P＞0.05);在雌雄鱼鳃、脾、肾、肌肉、心、头肾、脑等7个组织中均极微量表达,且无显著差异(P＞ 0.05).在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期卵巢中vtg相对表达量依次增加,Ⅳ期显著高于Ⅱ和Ⅲ期(P＜0.05),也显著高于精巢Ⅳ期(P＜0.05);在雌鱼肝组织中呈先增后减趋势,且Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期之间无显著差异(P＞0.05),但每个时期都显著高于雄性(P＜ 0.05).成功构建了原核表达载体pEASY-BluntE2-vtg,并转入Transetta(DE3)表达感受态细胞中成功诱导出融合蛋白.Western-blotting检测显示,融合蛋白可被抗His标签特异性识别.综上表明,vtg表达水平高低与性别相关,并与性腺发育程度有关.此外,本研究结果也为后续深入研究卵黄蛋白原的生理功能打下基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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广东始新世金龙鱼(Scleropages,Osteoglossomorpha)属一新种
编辑人员丨2023/8/5
记述了产于广东三水盆地华涌组的金龙鱼化石新材料,定为骨舌鱼科金龙鱼属一新种:三水金龙鱼(Scleropages sanshuiensis sp.nov.).新种在头部骨骼、尾骨骼、各鳍形状和位置以及具有网状鳞片等方面与中华金龙鱼(S.sinensis)和现生金龙鱼(Scleropages)极为相似,因而归入该属.在金龙鱼属的4个现生种和中华金龙鱼之中,三水金龙鱼和中华金龙鱼更为接近.但是,三水金龙鱼在下列特征上明显不同于中华金龙鱼:鼻骨上有纹饰,第三眶下骨略小于第四眶下骨,鳃盖骨后腹缘的内凹浅,胸鳍往后延伸到腹鳍起点,躯椎上的神经棘不愈合,椎体横突长.三水金龙鱼与现生的金龙鱼也有相似之处,如鼻骨有纹饰、椎体横突长.同样,中华金龙鱼也有与现生金龙鱼相似的地方,如第三眶下骨略大于第四眶下骨、大多数躯椎上的神经棘愈合.尚不清楚三水金龙鱼和中华金龙鱼中哪一个与现生种更接近,这两个化石种可能处于相同的进化水平.中生代骨舌鱼类主要发现于中国,始新世骨舌鱼类化石在中国的发现也在逐渐增多,金龙鱼属(Scleropages)和骨舌鱼属(Osteoglossum)的共同祖先在始新世以前可能生存于东亚,并随后扩散到澳洲和世界其他地方.华涌组的骨舌鱼类和湖北松滋洋溪组的可以直接比较,因此,本项研究支持华涌组的时代为早始新世的观点.
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编辑人员丨2023/8/5
