目的 探讨微小RNA-378a-3p(miR-378a-3p)影响乳腺癌细胞发展的机制.方法 基于TCGA数据库分析miR-378a-3p在乳腺癌细胞中的表达情况;利用starBase、miRDB、miRWalk数据库对miR-378a-3p进行靶基因预测,双荧光素酶报告实验验证miR-378a-3p对NUAK家族激酶2(NUAK2)的靶向调控;qRT-PCR和Western blot检测miR-378a-3p和NUAK2在乳腺癌细胞中mRNA和蛋白的表达情况;细胞增殖实验检测乳腺癌细胞的增殖能力;细胞划痕实验和侵袭实验分别检测乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力.凋亡和周期实验检测乳腺癌细胞的凋亡率和细胞周期分布.结果 miR-378a-3p在乳腺癌细胞中显著下调,过表达miR-378a-3p抑制了乳腺癌细胞的增殖,迁移和侵袭.miR-378a-3p靶向下调NUAK2的表达.结论 miR-378a-3p通过靶向抑制NUAK2的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

目的:研究曲妥珠单抗联合紫杉醇新辅助化疗对人表皮生长因子受体-2(HER-2)阳性乳腺癌病灶内细胞增殖、侵袭的影响.方法:选择2015年4月-2017年1月期间在湖北省恩施州中心医院诊断为HER-2阳性乳腺癌的患者,随机分为两组,联合组接受曲妥珠单抗联合紫杉醇化疗、对照组接受紫杉醇化疗.取手术切除的乳腺癌病灶并测定细胞增殖基因、细胞侵袭基因及血管新生分子的表达量.结果:联合组患者肿瘤病灶内 USP39、EphA2、NUAK1、Gab2、Raptor、ICAM-1、HIF-1α、VEGF、ANGPLT-2、ANGPLT-4的mRNA表达量显著低于对照组,CCN5、ALEX1、ATG2B、ATG4D、E-cadherin、EBP50的mRNA表达量显著高于对照组.结论:曲妥珠单抗联合紫杉醇新辅助化疗能够抑制HER-2阳性乳腺癌病灶内细胞的增殖、侵袭并减少血管新生.

目的:探讨超声造影参数对乳腺肿瘤性质的评估价值及其与肿瘤恶性生物学行为的相关关系.方法:2015年1月~2017年1月间在本院进行手术治疗的乳腺肿瘤患者176例,根据病理检查结果分为乳腺腺瘤组110例、乳腺癌组66例.对比两组患者的乳腺超声造影参数水平,肿瘤组织中增殖、侵袭、自噬基因表达量的差异.采用Pearson检验评估乳腺癌患者超声造影参数与病灶组织恶性分子表达量的相关关系.结果:乳腺癌组的PI、AUC水平显著高于乳腺腺瘤组;肿瘤组织中增殖基因CXCL1、Notch1 mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组,HPK1 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组;肿瘤组织中侵袭基因Gab2、NUAK1、FOXF1 mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组,NDRG1 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组;肿瘤组织中自噬基因 ATG2B、ATG4D、ATG9B mRNA 的表达量低于乳腺腺瘤组.经Pearson检验发现,乳腺癌患者超声造影参数PI、A UC水平与病灶组织中增殖、侵袭、自噬等分子表达量直接相关.结论:乳腺癌患者超声造影参数水平异于良性肿瘤者,且具体参数水平与肿瘤恶性程度直接相关,可作为早期筛查疾病、评估恶性程度的可靠手段.

目的:探讨乳腺超声BI-RADS分级与癌细胞增殖、侵袭的相关性.方法:收集2015年8月～2017年10月间在本院确诊乳腺癌的患者138例,回顾其BI-RADS分期,并分为Ⅲ期2例、Ⅳ期51例、Ⅴ期85例,对比3组患者病灶组织中增殖相关基因、侵袭相关基因表达量的差异.结果:Ⅴ期、Ⅳ期患者病灶组织中促增殖基因MTA2、mTOR、PKM2、Notch1、FSCN1 mRNA的表达量高于Ⅲ期患者(P＜0.05),抗增殖基因BRCA1、PTEN mRNA的表达量低于Ⅲ期患者(P＜0.05);促侵袭基因Gab2、NUAK1mRNA的表达量高于Ⅲ期患者(P＜0.05),抗侵袭基因EBP50、EDN3、FBXW7、NDRG1 mRNA的表达量低于Ⅲ期患者(P＜0.05).随BI-RADS分级增加,病灶组织中促增殖、促侵袭基因表达量进一步增加,抗增殖、抗侵袭基因表达量进一步减少.结论:乳腺癌患者超声BI-RADS分级与癌细胞增殖、活性呈正相关.

目的:探讨超声肿瘤体积倍增时间(TVDT)与乳腺癌病灶内恶性分子表达的相关性.方法:2016年8月～2017年8月间在本院接受手术治疗的乳腺癌患者118例作为乳腺癌组,同期在本院进行腺瘤切除术的乳腺腺瘤患者100例作为乳腺腺瘤组.对比两组患者的病灶组织TVDT水平,增殖相关基因、侵袭相关基因mRNA表达量的差异.采用Pearson检验评估乳腺癌患者超声TVDT水平与肿瘤恶性分子表达量的内在联系.结果:乳腺癌组患者肿瘤TVDT水平低于乳腺腺瘤组患者;乳腺癌组患者肿瘤组织中促增殖基因PKM2、Notch1、FSCN1 mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组,抗增殖基因FBXW7、HSG、EBP50 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组;乳腺癌组患者肿瘤组织中促侵袭基因Gab2、VEGF mRNA的表达量高于乳腺腺瘤组,抗侵袭基因NDRG1、DKK-1、NUAK1 mRNA的表达量低于乳腺腺瘤组.Pearson检验发现,乳腺癌病灶TVDT水平与增殖相关基因、侵袭相关基因表达量均直接相关.结论:乳腺癌病灶超声TVDT水平异常降低,具体TVDT水平与肿瘤细胞增殖、侵袭活性直接相关.

目的 研究miR-145调节人肝内胆管细胞癌(ICC)细胞增殖的机制.方法 收集标本ICC癌组织和癌旁胆管组织,共38对;2种ICC细胞系:HuCCT-1和RBE;对其进行miR-145及NUAK1的表达调控.通过RT-qPCR检测miR-145和新式激酶家族1(NUAK1)的表达及两者相关性;检测细胞周期观察细胞增殖变化;荧光素酶报告基因实验确认miR-145的靶基因;Western blot观察AKT通路蛋白水平变化.结果 miR-145在癌组织的表达明显低于癌旁组织(P<0.05),NUAK1在癌组织的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),两者具有相关性(P<0.05).miR-145过表达组和NUAK1干扰组细胞计数均明显少于对照组(P<0.05);HuCCT-1细胞系转染miR-145 mimics后,G1期的细胞数明显增加(P<0.05);野生型的荧光信号明显被抑制(P<0.05);过表达miR-145或抑制NUAK1后,pAKT和pFOXO1表达明显下降(P<0.05).结论 miR-145可能通过抑制NUAK1及其下游通路抑制ICC细胞增殖,它有可能为ICC临床诊治提供新的靶点和思路.

目的 检测NUAK1在鼻咽癌及鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达,进一步探讨沉默NUAK1对鼻咽癌CNE2、HK1细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测16例鼻咽癌和16例鼻咽黏膜慢性炎组织中NUAK1 mRNA的表达,免疫组织化学方法检测88例鼻咽癌及30例鼻咽黏膜慢性炎组织标本中NUAK1蛋白的表达,并分析NUAK1蛋白的表达与临床病理参数的相关性.应用siRNA技术转染CNE2、HK1细胞,随后进行Transwell迁移实验和侵袭实验,观察沉默NUAK1组相对空载组鼻咽癌细胞体外迁移和侵袭能力的改变.结果 NUAK1 mRNA和蛋白在鼻咽癌中的表达均高于鼻咽黏膜慢性炎组织(P<0.05),且鼻咽癌中NUAK1蛋白的表达与淋巴结转移相关(P<0.05).转染siRNA后,Transwell迁移实验和侵袭实验结果显示,实验组细胞的体外迁移和侵袭能力明显低于空载组(P<0.05).结论 NUAK1在鼻咽癌组织中高表达,在鼻咽癌CNE2、HK1细胞沉默NUAK1表达可抑制其迁移和侵袭,提示NUAK1的表达可能与鼻咽癌的侵袭转移有关.

目的 研究miR-30a-5p和靶基因NUAK1在非小细胞肺癌中的表达及对A549细胞增殖、迁移侵袭的影响.方法 收集2016-09至2019-03在保定市第一医院行手术切除治疗的非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织标本64例,QPCR和Western blot分别检测非小细胞肺癌组织样本和细胞中miR-30a-5p和NUAK1的表达;TargetScan网站预测miR-30a-5p与NUAK1间的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验和Western blot进行验证;MTT和Transwell实验检测miR-30a-5p及联合过表达NUAK1对A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结果 非小细胞肺癌组织中miR-30a-5p的相对表达量(0.33±0.14)低于癌旁组织(1.00±0.21),差异有统计学意义(t=21.237,P<0.05);非小细胞肺癌组织中NUAK1 mRNA表达(4.13±1.87)和蛋白表达(3.41±1.62)均高于癌旁组织(1.00±0.17、1.00±0.16),差异有统计学意义(t=13.335、11.844,P<0.05).非小细胞肺癌细胞系H460、H1299、A549中miR-30a-5p表达量(0.35±0.03、0.51±0.05、0.28±0.03)低于人正常肺上皮细胞BE-AS-2B(1.00±0.11),差异有统计学意义(F=77.100,P<0.05);H460、H1299、A549细胞中NUAK1 mRNA相对表达量(2.98±0.30、2.39±0.24、3.42±0.36)和蛋白相对表达量(3.06±0.31、2.27±0.23、4.12±0.41)均显著高于BEAS-2B细胞(1.00±0.09、1.00±0.11),差异有统计学意义(F=46.660、63.070,P<0.05).结论 miR-30a-5p可通过靶向NUAK1抑制非小细胞肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭,提示miR-30a-5p和NUAK1可能成为一种新的临床诊断和治疗非小细胞肺癌的靶点.

目的 评估NUAK2蛋白在Luminal型乳腺癌组织中的表达水平和临床意义.方法 使用免疫组织化学方法,检测Luminal型乳腺癌患者组织标本中NUAK2蛋白的表达水平,与癌旁组织进行比较,并分析其与患者的临床特征、病理特征及预后的关系.结果 NUAK2蛋白在Luminal型乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁乳腺组织(P=0.032);术后因肿瘤复发而死亡的患者,其肿瘤组织中的NUAK2蛋白表达水平也较高(P=0.037);NUAK2蛋白高表达组患者更容易出现淋巴结转移(P=0.038),且无复发生存率(P=0.035)和总体生存率(P=0.024)也明显下降;NUAK2蛋白表达水平升高与患者乳腺癌复发明显相关(P=0.011).结论 NUAK2蛋白在Luminal型乳腺癌组织中高表达,其表达水平与淋巴结的转移、肿瘤的复发和患者的预后存在相关性,推测NUAK2可能是乳腺癌的一个癌基因.

本文探讨吉祥草活性单体RCE-4对宫颈癌Ca Ski细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制.采用MTT法和克隆形成实验检测RCE-4对Ca Ski细胞增殖的影响,划痕实验及Transwell小室实验研究RCE-4对Ca Ski细胞的迁移和侵袭的影响,间接免疫荧光实验和Western blot法检测RCE-4对β-catenin和YAP/TAZ蛋白入核转运的影响,采用Western blot法检测RCE-4对Wnt/β-catenin、Hippo/YAP信号路通及下游靶蛋白表达的影响.结果 显示,RCE-4可以显著抑制Ca Ski细胞的增殖、迁移和侵袭;RCE-4处理后,β-catenin和YAP/TAZ蛋白入核减弱,GSK3β、p-β-eatenin、p-YAP、p-LATS1的蛋白表达量增加,PAK4、p-GSK3β、β-catenin、MST1、LATS1、NUAK2、YAP/TAZ、YAP的蛋白表达量减少,下游靶蛋白MMPs、c-Myc、SOX2、CYR61、VCAM-1、ICAM-1的表达被抑制,提示RCE-4体外可能通过对Wnt/β-catenin和Hippo/YAP信号通路的调控发挥其抗Ca Ski细胞侵袭和迁移的作用.