-
褐飞虱E3泛素连接酶基因NlHECTD2的克隆和功能分析
编辑人员丨2023/9/30
[目的]探明褐飞虱Nilaparvata lugensE3泛素连接酶基因NlHECTD2的分子特性、表达模式及生物学功能.[方法]基于褐飞虱转录组数据,PCR克隆NlHECTD2全长cDNA序列并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR检测NlHECTD2在卵、1-5龄若虫、初羽化24 h内雌成虫和1-5日 龄雌成虫中及3日龄雌成虫头、胸、腹、肠道和卵巢中的表达量;初羽化褐飞虱雌成虫单头注射0.05μL dsNlHECTD2(5 000 ng/μL),利用 qRT-PCR 检测 RNAi 后 24,48 和 72 h 时 NlHECTD2 的表达量,并检测褐飞虱血淋巴中类酵母共生菌(yeast-like symbiont,YLS)的数量、褐飞虱雌成虫存活率、单雌产卵量和卵孵化率.[结果]克隆获得了褐飞虱NlHECTD2基因全长cDNA序列(GenBank登录号:XM_039427060.1),其开放阅读框长2 850 bp;NlHECTD2编码950个氨基酸,无信号肽,包含1个具有泛素连接酶(E3)亚类的C端催化结构域.系统发育分析表明,N1HECTD2与半翅目其他昆虫HECTD2s聚为一支,与烟粉虱Bemisia tabaci HECTD2亲缘关系最为接近.qRT-PCR结果显示,NlHECTD2具有明显的时空表达特异性,在褐飞虱3日龄雌成虫腹中的表达量最高.RNAi结果显示,与注射dsGFP对照比较,注射dsNlHECTD2 能够显著抑制NlHECTD2的表达量,使褐飞虱血淋巴中的YLS数量极显著下降,导致褐飞虱雌成虫存活率、单雌产卵量及卵孵化率极显著下降.[结论]NlHECTD2与褐飞虱体内YLS释放到血淋巴这一过程紧密相关,并在褐飞虱的生长发育及繁殖过程中发挥重要作用,可作为褐飞虱防控的潜在靶标.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/9/30
