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急性髓细胞白血病患者白血病干细胞代谢调控的研究现状
编辑人员丨6天前
急性髓细胞白血病(AML)是一种髓系造血干/祖细胞来源的肿瘤,由未成熟髓系前体细胞的克隆增殖和分化停滞引起。目前接受常规化疗及靶向疗法的AML患者复发率高,并且易发生耐药。白血病干细胞(LSC)具有自我更新能力,可以分化产生白血病细胞。多项研究结果表明,AML患者的复发由LSC引起,LSC可以逃避化疗药物的杀伤,存在LSC的AML患者复发率更高、预后更差。因此,为了实现AML患者的长期生存,必须清除LSC。LSC具有独特的代谢特征,如高度依赖氨基酸代谢氧化磷酸化(OXPHOS),上调脂肪酸代谢,相关代谢酶改变引起表观遗传学改变等,靶向LSC代谢调控的治疗或能为治愈AML患者带来希望。笔者拟就LSC在线粒体功能、氨基酸与脂肪酸等方面的代谢调控特征的最新研究现状进行阐述,为从代谢途径靶向清除LSC,进而为临床治疗AML患者提供新的思路。
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编辑人员丨6天前
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线粒体调控免疫系统激活及代谢调节的分子机制
编辑人员丨6天前
作为真核细胞至关重要的细胞器,线粒体不仅参与细胞能量代谢和细胞分化、信息传递、凋亡、调控细胞生长和周期等多种生物学过程,还参与到机体的免疫系统激活和免疫调节。免疫代谢被认为是控制免疫细胞增殖和分化的关键因素。静息淋巴细胞通过氧化磷酸化(OXPHOS)和脂肪酸氧化产生能量,而活化淋巴细胞则迅速转入糖酵解。OXPHOS及通过电子传递链产生的线粒体活性氧参与到免疫细胞的许多功能。此外,线粒体是一种动态细胞器,可提供线粒体DNA等免疫原性分子,导致免疫系统激活。本文主要从免疫原性和免疫代谢和两个方面综述线粒体在激活和调节免疫系统方面的分子机制。
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编辑人员丨6天前
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BHLHE40靶向HMGA2激活氧化磷酸化通路降低甲状腺癌细胞对顺铂敏感性的研究
编辑人员丨6天前
目的:探究BHLHE40能否通过靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)激活氧化磷酸化(OXPHOS)通路进而影响甲状腺癌细胞对顺铂的敏感性。方法:通过在线数据库TCGA-甲状腺癌和hTFtarget分析HMGA2及上游转录因子BHLHE40在甲状腺癌组织中的mRNA表达情况。采用脂质体转染法将si-HMGA2、oe-HMGA2、oe-BHLHE40以及阴性对照si-NC、oe-NC转染至甲状腺癌细胞K1和SW579中,通过实时荧光定量PCR检测BHLHE40和HMGA2在甲状腺癌细胞SW579、FTC-133、K1和正常甲状腺细胞Nthy ori3-1中的mRNA表达水平,采用MTT法检测细胞活力,CCK-8法计算顺铂半抑制浓度(IC 50)值,流式细胞术检测细胞凋亡水平,蛋白质印迹法检测OXPHOS复合体的表达,Seahorse XFe 96分析细胞的耗氧率。双荧光素酶报告实验和染色质免疫沉淀实验分析BHLHE40与HMGA2的结合关系。 结果:TCGA数据库结果表明,HMGA2和BHLHE40 mRNA在甲状腺癌组织中的表达(10.57±2.58、13.89±1.13)均较甲状腺正常组织高(4.82±1.69、12.28±1.01),差异均具有统计学意义( t=16.69, P<0.001; t=10.43, P<0.001)。实时荧光定量PCR结果发现,正常甲状腺细胞Nthy ori3-1、甲状腺癌细胞SW579、FTC-133和K1中HMGA2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.13、2.94±0.23、4.71±0.41和6.29±0.49,BHLHE40 mRNA相对表达量分别为1.00±0.12、2.60±0.23、3.39±0.35和6.18±0.51,差异均具有统计学意义( F=130.50, P<0.001; F=125.20, P<0.001)。进一步两两比较发现,与正常甲状腺细胞相比,甲状腺癌细胞中HMGA2和BHLHE40 mRNA的表达水平均显著升高(均 P<0.001)。MTT法检测显示,与si-NC组相比,si-HMGA2处理显著降低了K1细胞的细胞活力(均 P<0.05),oe-HMGA2处理相对于oe-NC组显著增加了SW579细胞的细胞活力(均 P<0.05);与oe-NC+DMSO组相比,oe-HMGA2+DMSO组SW579细胞的细胞活力增强,而OXPHOS通路抑制剂Gboxin能够逆转过表达HMGA2对细胞活力的影响(均 P<0.05)。流式细胞术和CCK-8实验结果显示,与si-NC组(凋亡水平:6.19%±0.28%;顺铂IC 50值:17.47 μmol/L)相比,敲低HMGA2能增加K1细胞的凋亡水平(11.96%±0.32%; t=19.17, P<0.001)和顺铂敏感性(IC 50值:1.49 μmol/L);与oe-NC组(凋亡水平:9.98%±0.32%;顺铂IC 50值:8.17 μmol/L)相比,过表达HMGA2显著降低了SW579细胞凋亡水平(4.32%±0.25%; t=19.65, P<0.001)和顺铂敏感性(IC 50值:34.95 μmol/L)。双荧光素酶报告实验结果发现,与si-NC组相比,在人肾上皮细胞293T细胞中敲低BHLHE40的表达显著降低野生型HMGA2的荧光素酶活性(0.31±0.02比1.00±0.11; t=10.69, P=0.004),但对于突变型HMGA2的荧光素酶活性没有显著性影响(1.06±0.11比1.00±0.07; t=0.80, P=0.470)。染色质免疫沉淀实验结果显示,与IgG组(1.00±0.10)相比,anti-BHLHE40组K1细胞的HMGA2 mRNA表达水平显著增加(6.57±0.62; t=15.36, P<0.001)。与oe-NC+DMSO组相比,oe-HMGA2+DMSO组SW579细胞凋亡水平( P<0.05)和顺铂敏感性均降低,OXPHOS复合体Ⅰ~Ⅴ表达显著增强,细胞耗氧率升高(均 P<0.05),oe-HMGA2+Gboxin处理可逆转过表达HMGA2的影响(均 P<0.05)。回复实验表明,与oe-NC+si-NC组相比,过表达BHLHE40后SW579细胞的细胞活力和OXPHOS复合体Ⅰ~Ⅴ的表达增强,细胞耗氧率和顺铂IC 50值显著增加,细胞凋亡水平下降(均 P<0.05);而同时敲低HMGA2可逆转过表达BHLHE40的影响(均 P<0.05)。 结论:BHLHE40可通过靶向调控HMGA2的表达激活氧化磷酸化通路,进而影响甲状腺癌细胞对顺铂的敏感性。
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编辑人员丨6天前
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线粒体复合体在肾脏疾病中的研究进展
编辑人员丨6天前
肾脏是富含线粒体的器官之一,其正常运行依赖于线粒体氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)为细胞供能。线粒体复合体(mitochondrial complex,MC)构成了线粒体呼吸链(mitochondrial respiratory chain,MRC),具有电子传递和质子转移的功能,参与OXPHOS的过程。近年的研究表明,MC参与了肾脏疾病的发生发展,MC在不同的肾脏疾病中作用不尽相同。本文旨在系统综述MC的功能,总结其在急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)、以糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)为主的慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)、肾脏肿瘤、线粒体DNA(mtDNA)疾病等不同肾脏病领域中的作用,分析探讨MC作为新的靶点在肾脏疾病诊治中的潜在价值。
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编辑人员丨6天前
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电子烟呼吸系统毒性作用及空气净化器的干预效果研究
编辑人员丨6天前
评价电子烟暴露对呼吸系统毒性作用以及空气净化器的干预效果。于2022年1至12月东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室开展经呼吸道染毒电子烟的随机对照实验研究。采用随机数字表法,利用8周龄雄性C57BL/6JGpt小鼠建立不同周期(0 d、3 d、7 d或14 d)的电子烟暴露模型以及清洁空气对照组。采用普通加热电子烟(200 ℃)和高温加热电子烟(280 ℃)对小鼠进行暴露。提取对照组和电子烟暴露组小鼠的肺总RNA进行转录组测序分析。利用流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)。酶标仪检测总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、超氧化物(superoxide,O 2-)水平。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测基因表达。利用过滤型净化器和负离子净化器干预电子烟暴露。数据以( xˉ±s)表示,采用单因素方差分析或双因素方差分析对多组之间的差异进行比较。结果显示,RNA测序分析表明电子烟暴露诱导的差异表达基因显著富集在氧化应激(Fold enrichment=3.18)和线粒体氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)(Fold enrichment=5.74)通路。两种加热电子烟暴露均导致小鼠肺部肺泡炎评分显著升高( F=10.8, P<0.001),内源性ROS水平显著增加( F=16.8, P<0.001),MMP水平明显下降( F=13.6, P<0.01)以及线粒体复合物I的编码基因的表达紊乱。与普通加热电子烟相比,高温加热电子烟的毒性作用更强( F=2.9, P<0.05)。在缓解电子烟急性暴露导致的肺泡炎症方面,过滤型净化器的干预效果优于负离子净化器( F=7.4, P<0.01)。空气净化器可部分缓解肺部氧化应激和线粒体功能障碍。综上,本研究提示电子烟的使用存在潜在的健康风险。空气净化器可部分逆转线粒体功能紊乱,但不能完全阻断电子烟的毒性作用,有效的干预措施仍有待研究。
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编辑人员丨6天前
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线粒体疾病治疗研究进展
编辑人员丨6天前
线粒体 DNA独立于细胞核自主复制,其遗传遵循非孟德尔模式,完全由母亲传给子女。大量研究发现了与线粒体 DNA 变异有关的遗传性疾病。儿童期出现的线粒体疾病呈现临床、生化和遗传复杂多变的特点,可累及多个器官,这些差异性表现为该类疾病的治疗带来了巨大困难。目前该病的治疗进展远远落后于基因研究。对于少数基因缺陷,存在明确的治疗策略,如补充辅酶Q10治疗辅酶Q10合成障碍,补充核黄素治疗核黄素转运和代谢缺陷等。大多数线粒体疾病都会表现出危及生命的症状,因此目前正在进行各种方法的治疗研究,如刺激有缺陷的氧化磷酸化系统、线粒体置换和缺陷酶的异构表达。该综述介绍了线粒体疾病目前可用的疗法和新兴疗法。
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编辑人员丨6天前
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转录组测序分析非酒精性脂肪性肝炎早期YAP阳性表达肝细胞的功能学特征
编辑人员丨6天前
目的:基于转录组测序(RNA-Seq),分析比较非酒精性脂肪性肝炎(NASH)早期小鼠模型中Yes相关蛋白(YAP)阳性肝细胞和YAP阴性肝细胞的差异表达基因(DEGs),初步了解此类YAP阳性肝细胞的功能学特征。方法:蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饲喂C57BL/6小鼠2周构建NASH早期模型,对照组为正常饮食。肝组织行苏木精-伊红(HE)、天狼星红染色和病理学评分;免疫组织化学(IHC)观察YAP、p-YAP在肝组织的表达。胶原酶灌注联合Percoll密度梯度离心获取活率大于90%的原代肝细胞。进行YAP抗体标记、流式分选获得YAP阳性和YAP阴性肝细胞并进行RNA-Seq。测序结果用GO、KEGG和相互作用网路的分析方法筛选DEGs。RT-PCR验证模型组肝组织中YAP以及部分DEGs的表达水平。两样本均数比较采用独立样本 t检验。 结果:与对照组相比,MCD诱导小鼠2周的HE染色肝组织可见脂肪变(病理评分1.07±0.21),伴有小叶炎症(病理评分1.13±0.32)和肝细胞气球样变(病理评分0.80±0.20),天狼星红染色未见明显肝纤维化(病理学评分0.40±0.40)。IHC显示NASH早期的部分肝细胞YAP表达为阳性。RNA-Seq分析,YAP阳性和YAP阴性的肝细胞分别得到Clean reads为49 310 604条、54 820 036条。与YAP阴性肝细胞相比,YAP阳性肝细胞导致5 565个基因差异表达,包括上调基因1 662个,下调基因3 903个。上调基因的GO分析显示,嘌呤三磷酸核苷和三磷酸核苷等线粒体功能相关的代谢过程为显著富集的生物学过程(BP);下调基因分析到显著富集的BP为嗅觉受体相关过程。KEGG分析显示,DEGs富集到292条通路,氧化磷酸化(OXPHOS)通路为显著富集信号通路。RT-PCR确认炎症因子(白细胞介素-1β、白细胞介素-6)、YAP及其靶基因(Cyr61、Ankrd1)以及OXPHOS通路的Cox5b、Sdhc基因水平显著上调,与测序结果一致。相互作用网络分析预测到8个关键基因。结论:NASH早期肝细胞代谢水平的变化可能与YAP活性增加有关。
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编辑人员丨6天前
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小鼠骨髓间充质干细胞通过糖代谢途径减轻肾缺血再灌注损伤
编辑人员丨6天前
目的:探究小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对肾缺血再灌注损伤(IRI)的作用。方法:雄性C57BL/6小鼠30只,根据随机数字法分为6组(每组5只):空白组、常氧BMSC外泌体组、低氧BMSC外泌体组、IRI组、常氧BMSC外泌体+IRI组、低氧BMSC外泌体+IRI组。缺血25 min,再灌注24 h后行肾脏功能和组织病理检查。另取小鼠30只,分为三组(IRI组、常氧+IRI组、低氧+IRI组,每组10只),观察各组存活率。同时,检测肾内炎性因子,巨噬细胞的极化,糖酵解和氧化磷酸化水平。结果:常氧+IRI组小鼠的血肌酐及尿素氮低于IRI组( P<0.05),且病理损伤轻。IRI组,常氧+IRI和低氧+IRI组的7 d存活率分别为20%,50%和80%( P<0.05)。RT-PCR结果示IRI造成肾组织内肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和IL-10的表达水平增加,而低氧可降低TNF-α、IL-1β、MCP-1( P<0.05),但升高IL-10( P<0.05)。低氧可促进巨噬细胞向M2型极化,降低巨噬细胞糖酵解,提高氧化磷酸化水平。 结论:低氧BMSC可通过外泌体诱导巨噬细胞M2极化,减轻肾IRI损伤;其机制是增强巨噬细胞氧化磷酸化而抑制糖酵解。
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编辑人员丨6天前
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氧化磷酸化功能障碍对调节性T细胞及免疫性疾病影响的研究进展
编辑人员丨6天前
作为真核细胞的"能量工厂",线粒体主要通过氧化磷酸化(OXPHOS)途径产生能量以满足机体需求。调节性T细胞是一类抑制免疫反应的细胞,线粒体OXPHOS在维持调节性T细胞的稳态和免疫抑制功能中起重要作用。新近研究发现线粒体OXPHOS异常可通过影响调节性T细胞增殖、分化、凋亡等生命活动引起多种疾病发生,如糖尿病、过敏性哮喘、系统性红斑狼疮、肿瘤等。本文就调节性T细胞线粒体OXPHOS功能障碍在免疫性疾病中的最新研究进展予以综述。
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编辑人员丨6天前
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抑制糖代谢可缓解获得性大疱性类天疱疮样表皮松解症
编辑人员丨6天前
获得性大疱性类天疱疮样表皮松解症(EBA)是一种自身抗体驱动的、粒细胞介导的皮肤病。既往研究证据表明,免疫细胞的分化、功能、代谢相互影响,这是免疫反应的先决条件。例如,Th1和M1型巨噬细胞即使在有氧条件下也要依赖于糖酵解,而M2型巨噬细胞、调节性T细胞(Treg)和静止记忆T细胞则主要依赖于氧化磷酸化(OxPhos)。但细胞代谢的作用及其作为EBA治疗靶点的潜力尚不清楚。为此作者研究了2-脱氧-D-葡萄糖和二甲双胍在EBA抗体转移C57BL/6J野生型小鼠中的作用。研究结果显示二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖均能够在该模型中减轻EBA症状。而后,该项研究证明了免疫复合物对中性粒细胞的刺激增加了有氧糖酵解的速率,并且这种增加是诱导对EBA至关重要的白三烯B4和活性氧的释放所必需的。因此,2-脱氧-D-葡萄糖作为糖酵解酶己糖激酶和磷酸葡萄糖异构酶的抑制剂,庚酸作为GAPDH的抑制剂,减弱了这种中性粒细胞的反应。在超药理学剂量时,二甲双胍能够降低氧化磷酸化水平,也能抑制这种中性粒细胞反应,而在体内二甲双胍却不大可能对中性粒细胞产生直接影响。氧化磷酸化抑制剂寡霉素同样能够抑制这种中性粒细胞反应,且免疫复合物刺激不会改变氧化磷酸化的速率,这意味着中性粒细胞完整线粒体反应是抑制糖代谢反应的基础。总的来说,该研究强调2-脱氧-D-葡萄糖和二甲双胍是治疗EBA的潜在药物,而中性粒细胞的糖酵解和氧化磷酸化都是EBA颇具前景的治疗靶点。
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编辑人员丨6天前
