目的:探讨TAB182促进同源重组(HR)修复的相关调控分子及机制。方法:利用shRNA敲低人乳腺癌MCF-7细胞中的TAB182基因，TAB182敲低的MCF-7细胞为沉默组，使用shRNA阴性对照物的MCF-7细胞为TAB182阴性对照组。通过RNA测序分析，筛选与TAB182相关差异表达的HR修复基因。qRT-PCR验证相关基因的mRNA表达，Western blot验证相关蛋白的表达。RAD51和BrdU免疫荧光检测DNA断裂末端形成的3′单链DNA(ssDNA)；流式细胞术检测细胞周期阻滞和细胞凋亡；集落形成实验检测细胞的放射敏感性。结果:RNA测序分析和qRT-PCR验证结果一致，TAB182沉默组细胞中RPA2的mRNA表达降低( t＝17.97， P<0.05)。相比于TAB182阴性对照组细胞，TAB182沉默组细胞RPA2在蛋白水平也显著减少。相比于TAB182阴性对照组，TAB182沉默组细胞中RAD51焦点(foci)的表达显著降低；3′ ssDNA结合蛋白标志物BrdU在TAB182沉默组细胞的细胞核中foci形成显著减少。在放射菌素D作用后的第4、8、12 h，相比于TAB182阴性对照组，TAB182沉默组细胞RPA2 mRNA的衰减加快( t＝5.37、3.79、3.69， P<0.05)。相比于TAB182阴性对照组，TAB182沉默组细胞放射敏感性增加( t＝3.48， P<0.05)；且TAB182沉默组放射诱发的凋亡率显著增加( t＝11.05， P<0.05)、照射后24 h的周期阻滞时间延长( t＝8.40， P<0.01)。 结论:TAB182通过维持RPA2 mRNA的稳定性，促进RPA2的表达，在DSBs的同源重组修复通路中发挥作用。TAB182的缺失可增强肿瘤细胞的放射敏感性。

目的 探讨System Xc-/GPX4/Nrf2通路介导的铁死亡对脓毒症大鼠肠道机械屏障损伤程度及炎症状态的影响.方法 24只SPF级雄性大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、铁死亡组、治疗组各6只.脓毒症组、铁死亡组、治疗组采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症大鼠模型,假手术组开腹游离盲肠后还纳关腹.造模即刻,治疗组皮下注射去铁胺20 mg/kg,铁死亡组腹腔注射铁死亡激活剂Erastin 20 mg/kg,假手术组和脓毒症组腹腔注射等量生理盐水,注射后4组均皮下注射37 ℃生理盐水50 mg/kg液体复苏.造模24 h大鼠麻醉后开腹,取十二指肠(空肠),机械法组织匀浆后收集细胞悬液,应用荧光探针法检测小肠平滑肌细胞活性氧(ROS);透射电镜下观察小肠上皮组织中线粒体形态.然后腹主动脉采血离心取血清,采用比色法检测Fe3+、D-乳酸脱氢酶(D-LDH)水平,采用硫代巴比妥酸缩合法检测丙二醛(MDA)水平,采用ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平.采血后处死大鼠,取小肠组织,采用HE染色观察组织病理学改变,采用免疫组织化学ABC法检测GPX4、Nrf2、Claudin-1阳性面积百分比,采用Western blot法检测GPX4、Nrf2、Claudin-1蛋白相对表达量.结果 (1)治疗组[(56 528±182)× 105/mL]、脓毒症组[(67 964±844)×105/mL]、铁死亡组[(71 958±1 306)× 105/mL]小肠平滑肌细胞ROS荧光强度均高于假手术组[(52 551±438)×105/mL](P＜0.05),脓毒症组、铁死亡组高于治疗组(P＜0.05),铁死亡组高于脓毒症组(P＜0.05).(2)假手术组小肠上皮组织线粒体形态完整、嵴丰富整齐、双膜结构存在且体积较大;脓毒症组线粒体体积变小,膜信号变强,线粒体嵴松散并发生溶解现象;治疗组线粒体体积较脓毒症组略有恢复,双膜结构部分存在,线粒体嵴少量溶解;铁死亡组线粒体体积较脓毒症组进一步缩小,膜密度增高,线粒体嵴发生溶解及消失.(3)脓毒症组、治疗组、铁死亡组血清Fe3+含量低于假手术组(P＜0.05),MDA、D-LDH水平均高于假手术组(P＜0.05);脓毒症组、铁死亡组血清Fe3+含量低于治疗组,MDA、D-LDH水平高于治疗组(P＜0.05);铁死亡组血清Fe3+含量低于脓毒症组,MDA、D-LDH水平高于脓毒症组(P＜0.05).(4)脓毒症组、治疗组、铁死亡组血清IL-1β、TNF-α、IL-6水平均高于假手术组(P＜0.05),脓毒症组、铁死亡组高于治疗组(P＜0.05),铁死亡组高于脓毒症组(P＜0.05).(5)假手术组小肠绒毛丰富规整、未见基底层分离及毛细血管充血;脓毒症组绒毛顶端出现溶解、破碎,炎症细胞浸润明显,毛细血管充血;治疗组绒毛顶端部分破裂情况略有好转,但仍有毛细血管充血、炎症细胞浸润;铁死亡组小肠绒毛已出现崩解、脱落,炎症组织浸润明显,部分延伸到绒毛两侧,黏膜与黏膜下层出现分离.(6)脓毒症组、治疗组、铁死亡组Nrf2阳性面积百分比大于假手术组(P＜0.05),GPX4、Claudin-1阳性面积百分比小于假手术组(P＜0.05);脓毒症组、铁死亡组Nrf2阳性面积百分比大于治疗组,GPX4、Claudin-1阳性面积百分比小于治疗组(P＜0.05);铁死亡组Nrf2阳性面积百分比大于脓毒症组,GPX4、Claudin-1阳性面积百分比小于脓毒症组(P＜0.05).(7)脓毒症组、铁死亡组Nrf2蛋白相对表达量高于治疗组,GPX4、Claudin-1蛋白相对表达量均低于治疗组(P＜0.05);铁死亡组Nrf2蛋白相对表达量高于脓毒症组,GPX4、Claudin-1蛋白相对表达量均低于脓毒症组(P＜0.05).结论 脓毒症大鼠模型肠道损伤中存在铁死亡现象;抑制System Xc-/GPX4/Nrf2通路介导的铁死亡,可改善脓毒症大鼠肠道机械屏障的损伤程度及炎症状态.