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Tectonic家族成员1对T47D细胞增殖和细胞周期的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 观察乳腺癌细胞Tectonic家族成员1(Tectonic family member 1,TCTN1)表达变化,探讨下调其表达对T47D细胞增殖及细胞周期的影响.方法 取对数生长期MCF-7、MDA-MB-231、T47D细胞及正常乳腺MCF-10A细胞,采用实时荧光定量PCR法检测TCTN1 mRNA相对表达量,筛选出TCTN1 mRNA相对表达量最高的T47D细胞进行后续试验.取对数生长期T47D细胞,分为转染组(转染siRNA-TCTN1)、阴性对照组(转染siRNA-NC)和空白对照组(不作处理).转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测3组TCTN1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测TCTN1蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测细胞周期;转染后培养0、24、48、72、96 h,采用CCK-8法检测细胞增殖率.结果 MCF-7、MDA-MB-231、T47D 细胞 TCTN1 mRNA 相对表达量(3.120±0.893、2.839±1.102、5.932±0.938)均高于 MCF-10A 细胞(1.023±0.182)(P＜0.05),T47D 细胞 TCTN1 mRNA 相对表达量高于 MCF-7、MDA-MB-231 细胞(P＜0.05).转染 48 h,转染组 TCTN1 mRNA 及蛋白相对表达量(0.539±0.021、0.050±0.003)、G0/G,期细胞比率[(46.06±1.30)％]均低于阴性对照组[0.932±0.102、0.379±0.052、(54.67±1.13)％]和空白对照组[1.021±0.091、0.457±0.017、(53.77±1.91)％](P＜0.05),G2/M 期细胞比率[(22.49±1.45)％]高于阴性对照组[(14.60±2.44)％]和空白对照组[(14.99±2.16)％](P＜0.05),阴性对照组与空白对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).转染后培养0、24 h,3组细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P＞0.05);转染后培养48、72、96 h,转染组细胞增殖率[(53.0±8.2)％、(78.0±10.2)％、(123.0±11.2)％]低于阴性对照组[(83.0±13.5)％、(129.0±13.9)％、(172.5±28.3)％]和空白对照组[(92.0±14.7)％、(139.2±19.3)％、(192.3±29.2)％](P＜0.05),阴性对照组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MCF-7、MDA-MB-231、T47D细胞TCTN1 mRNA表达上调;下调TCTN1表达可抑制T47D细胞增殖,使细胞G2/M期阻滞.
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编辑人员丨2023/8/5
