随着基因治疗技术的不断发展，越来越多的新技术被逐步应用于疾病的实验室研究和临床治疗中。在艾滋病的治疗中，基因治疗技术相较于传统的抗病毒逆转录治疗有明显优势。近年来，短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)技术、成簇规律间隔短回文重复序列(clustered regulatory interspaced short palindromic repeat, CRISPR)技术、类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases, TALEN)技术、锌指核酶(zinc finger nucleases, ZFN)技术等基因治疗技术在艾滋病治疗中的应用已经取得较多成果。本文综述了自基因治疗技术出现以来在艾滋病治疗领域的重大突破，以及近年来所取得的最新研究进展，旨在为该技术在艾滋病治疗中的更广泛应用提供参考。

基因编辑技术是以改变靶基因序列为目的，实现定点突变、插入或敲除的技术。作为生命科学的新兴研究领域，基因编辑技术的不断发展与完善为基因的功能研究、基因检测和治疗提供了强有力的工具，极大地推动了生命科学的发展。本文首先介绍了基因编辑技术发展过程中的三种主要技术—锌指核酸酶(zinc-finger nucleases，ZFNs)，类转录激活因子效应核酸酶(transcription activator-like effector nucleases，TALENs)和CRISPR-Cas9。通过改造现有Cas9核酸酶以及寻找新的具有特异性识别和切割目的序列的蛋白，适用范围更广泛的基因编辑系统被开发出来，推动了基因编辑技术的发展。本文同时对基因编辑技术的应用和存在的机遇及挑战进行了探讨，以增进对该技术及其未来研究的整体认识。

抗逆转录病毒治疗（ART）能有效控制HIV感染，但仍无法完全清除人体内的HIV。鉴于CC趋化因子受体5（CCR5）在HIV感染靶细胞中的作用，可将基因编辑技术运用于修饰CCR5基因，包括锌指核酸酶（ZFN）、转录激活因子样效应物核酸酶（TALEN）、成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/Cas9系统等，从而实现艾滋病的"功能性治愈"。此外，修饰CCR5基因的基因编辑技术与干细胞移植的结合为艾滋病的治愈提供了新的思路。

基因编辑技术是对目标基因进行"编辑"，实现对特定DNA片段的定点突变、敲除、加入等。基因组编辑技术的真正发展距今不到五十年的时间，但这一领域已经衍生出了至少3种基因组编辑技术，包括锌指核酸酶(zinc-finger nuclease，ZFN)技术、转录激活因子样效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease，TALEN)技术和CRISPR/Cas9等技术。这些技术都利用了DNA修复机制，特别是CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeat)系统，不仅是基因功能研究的强大工具，其在疾病治疗靶点的发现、病原体的核酸诊断与肿瘤等疾病的临床治疗方面也展现出巨大的潜力。当然，CRISPR/Cas9技术在实际应用中仍然存在许多潜在的问题尚待解决，例如，CRISPR/Cas9技术对基因转录的调控效果缺乏持久性和可遗传性以及存在脱靶效应等问题。为了解决这些问题，科学家以CRISPR系统为基础，开发出一套新的表观遗传基因组编辑工具CRISPRoff。本文详细介绍了CRISPRoff系统的原理，阐述了其在医学和其他领域的应用概况和技术发展。

一、填空题1、24％ 15％～19％ 葡萄糖 半乳糖 N-乙酰氨基葡萄糖 L-岩藻糖 唾液酸 协同菌群发展 维持肠道屏障完整性 促进免疫系统发育 大脑发育2、抗生素 潜在致病菌 厌氧菌 肠道菌群移位3、细胞清除异常 Ⅰ型干扰素(IFN-1)的过度产生 自身免疫耐受受损 其他单基因变异异常4、家庭成员微生物 分娩方式 喂养方式 其他因素如生活环境、机械通气5、人鼻病毒(HRV) 呼吸道合胞病毒(RSV) 流感病毒 副流感病毒 偏肺病毒 博卡病毒 腺病毒 冠状病毒 HRV 流感病毒6、奥马珠单抗 抗病毒免疫应答7、正常外源基因 异常基因 锌指核酸酶(ZFN) CRISPR/Cas 9技术8、对症治疗 酶替代治疗(ERT) 造血干细胞移植(HSCT) 9、中枢神经系统疾病 皮肤症状 皮肤冻疮样皮损 基因测序10、代谢功能 免疫功能 厚壁菌门 变形菌门二、简答题1、脓毒症患儿菌群失调主要表现为四种状态:①维持机体健康的重要菌群(如厚壁菌门和拟杆菌门)的缺失;②肠道菌群多样性的丧失;③菌群生态功能的转变;④病原体(如变形菌门)的大量繁殖.

缬酪氨肽蛋白 valosin-containing protein(VCP)心因性运动障碍评价量表Psychogenic Movement Disorders Rating Scale(PMDRS)锌指核酸酶 zinc finger nuclease(ZFN)信号识别颗粒 signal recognition particle(SRP)信号转导与转录激活因子3 signal transducer and activator of transcription 3(STAT3)Becker 型肌营养不良 Becker muscular dystrophy(BMD)Duchenne型肌营养不良Duchenne muscular dystrophy(DM D)胸苷激酶2 thymidine kinase 2(TK2)雄激素受体 androgen receptor(AR)血管紧张素 Ⅱ angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ)血管紧张素转换酶 angiotensin converting enzyme(ACE)血管细胞黏附分子-1 vascular cell adhesion molecule-1(VCAM-1)

恶性肿瘤是1种进化过程的衍生物,达尔文的选择进化理论揭示了恶性肿瘤是物种在进化过程中遗传突变逐步累积的结果.每种恶性肿瘤都是由许多复杂的克隆细胞亚群组成的,这些亚群决定了特定人群在特定阶段存在特定的肿瘤基因型和表型,这种肿瘤内的异质性对于恶性肿瘤的进展、转移以及化疗耐药有着显著影响[1].目前,妇科恶性肿瘤的主要治疗方式仍然是以手术为主辅以放化疗的综合治疗,化疗耐药是影响患者预后的重要因素,耐药的主要原因是耐药相关基因的异常表达,因此,靶向妇科恶性肿瘤显著突变的致病基因和耐药基因是未来临床治疗的关键.目前,靶向基因编辑技术已经成为研究肿瘤基因功能和通过校正缺陷基因或引入修饰基因治疗肿瘤的强有力的工具.基因编辑技术主要包括锌指核酸内切酶(zinc finger endonuclease,ZFN)、类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)、规律成簇间隔短回文重复(clustered regularly interspaced short palindromic repeat ,CRISPR )/CRISPR 相 关 蛋 白 核 酸酶( CRISPR-associated nuclease,Cas)9、TargeTron基因敲除系统(the targetron gene knockout system)[2]以及传统的RNA干扰(RNAi)技术[3].与ZFN、TALEN及TargeTron基因敲除系统相比,基于CRISPR/Cas系统的基因编辑技术(即CRISPR/Cas9基因编辑技术)易于操作,效率高,更易得到纯合子突变体,而且可以在不同的位点同时引入多个突变;但因CRISPR系统面临脱靶危机,故其精确度较低.因此,采用CRISPR/Cas9基因编辑技术能高效控制肿瘤细胞内基因的表达水平,进一步从多方面推进肿瘤的研究和应用.肿瘤基因计划的实施和CRISPR/Cas9基因编辑技术的发展,使妇科恶性肿瘤的精准医疗成为可能.本文对近年来CRISPR/Cas9基因编辑技术在妇科恶性肿瘤研究及治疗中的应用进行综述.

随着HIV病毒学研究的不断深入,传统抗反转录病毒治疗在HIV病毒清除和疾病治愈中的局限性日益凸显,因此通过基因编辑达到HIV病毒控制甚至完全治愈的策略倍受重视.目前基因编辑的研究主要包括以下两个方面:RNA水平的编辑技术和DNA水平的编辑技术.近年来包括锌指核酶技术(zinc finger nucleases,ZFN),转录激活样效应因子技术(transcription activatorlike effector nucleases,TALEN),成簇规律间隔短回文重复序列技术(clustered regulatory interspaced short palindromic repeat, CRJSPR)和NgAgo-gDNA技术在内的DNA编辑技术进展迅猛,并在HIV治疗中取得了长足的发展.本文比较了不同DNA水平编辑方法的特点和差异,综述了新一代基因编辑技术在HIV治疗中的进展以及潜在的医学应用前景.

CRISPR-Cas系统作为细菌、真菌体内的适应性免疫系统用以抵御外来噬菌体的感染.经过改造的CRISPR-Cas9已成为继ZFN、TALEN之后的第三代基因编辑技术.在CRISPR-Cas9基础上衍生的CRISPRi、CRISPRa等系统可以实现暂时抑制、激活或改变基因表观遗传学修饰的功能.相比传统基因编辑技术,CRISPR-Cas9具有效率高、操作简便、价格低等优势,因而在基因制备动物模型,治疗感染性疾病、遗传性疾病以及癌症等方面均有广阔的应用前景.本文主要对CRISPR-Cas9技术的发展与临床应用进展进行综述.

基因编辑是指通过核酸酶对靶基因进行定点改造,实现特定DNA的定点敲除、敲入以及突变等,最终下调或上调基因的表达,以使细胞获得新表型的一种新型技术.基因编辑技术已被广泛运用于基因结构与功能的研究和多种细胞的基因工程改造,为疾病模型的建立、动植物新品种的培育及基因治疗等的研究提供新的手段.基因编辑技术主要包括锌指核酸酶技术(ZFN)、转录激活子样效应因子技术(TALEN)和成簇的规律间隔的短回文重复序列/CRISPR相关蛋白(CRISPR/C as)系统等.本文将对3种基因编辑技术的原理、运用及其最新进展进行综述,以期为相关技术及其运用的研究提供参考.