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MicroRNA-519d-3p对肝星状细胞活化及凋亡的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨微小RNA-519d-3p(microRNA-519d-3p)对LX-2(人肝星状细胞株)活化及凋亡的影响.方法 将miR-519d-3p分子模拟剂(miR-519d-3p mimics组)、抑制剂(miR-519d-3p inhibitor组)及其阴性对照物(mimics NC、inhibitor NC)转染LX-2细胞,利用实时定量PCR检测miRNA-519d-3p在转染后LX-2细胞中的相对表达量,利用实时定量PCR和West ern blot检测转染后LX-2中活化标志物α平滑肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)的mRNA和蛋白的表达水平,分析miR-519d-3p对LX-2细胞活化的影响;用流式细胞术检测转染后LX-2的凋亡率,分析miR-519d-3p对LX-2细胞凋亡的影响.结果 miR-519d-3p mimics组与其阴性对照组相比,α-SMA和Collagen I mRNA与蛋白表达水平均降低(P均<0.01);miR-519d-3p inhibitor组与其阴性对照组相比,α-SMA和Collagen I mRNA及蛋白表达水平均增高(P均<0.01);流式细胞术结果表明,miR-519d-3p mimics组可以促进细胞凋亡(P<0.01);miR-519d-3p inhibitor组可以抑制细胞凋亡,与阴性对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.01).结论 miR-519d-3p具有抑制肝星状细胞活化,促进肝星状细胞凋亡,抑制肝纤维的作用.
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编辑人员丨2023/8/5
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基于ceRNA网络筛选卵巢癌铂类药物的耐药基因及临床验证
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨竞争性内源RNA(ceRNA)网络筛选卵巢癌铂类药物的耐药基因并进行临床验证.方法 通过PubMed数据库检索卵巢癌长链非编码RNA(lncRNA),构建卵巢癌铂类耐药内源竞争RNA(ceR-NA)调控网络.收集2018年4月至2020年4月在西北妇女儿童医院治疗的64例铂类药物耐药卵巢癌患者为耐药组,另纳入同期64例铂类药物敏感卵巢癌患者为对照组.采用荧光定量PCR法检测患者癌组织中ln-cRNA表达水平,分析lncRNA对卵巢癌铂类药物耐药和患者预后的判断价值.结果 亚细胞定位分析显示共有6个lncRNA位于细胞质,其中HOX转录反义RNA(HOTAIR)和Y框蛋白2(SOX2)为关键ceRNA.lncRNA HOTAIR 与 miRNA(miR-519d、miR-148b-3p)及 mRNA(XIAP、OCT4)构成 ceRNA 调控网络,ln-cRNA SOX2 与 miRNA(miR-302、miR-429、miR-140-3p)及 mRNA(EGFR、ABHD2)构成 ceRNA.耐药组癌组织lncRNA HOTAIR和lncRNA SOX2水平分别为2.72±0.58和1.45±0.37,显著高于对照组的1.92±0.49和1.26±0.40,差异均有统计学意义(P＜0.05).ROC曲线分析显示lncRNA HOTAIR和lncRNA SOX2对判断卵巢癌铂类药物耐药具有较高的价值(AUC=0.813、0.775,P＜0.05).lncRNA HOTAIR和lncRNA SOX2高表达患者1年无进展生存(PFS)率分别为65.2％和65.0％,显著低于低表达者的83.1％和80.9％,差异有统计学意义(Log-rank x2=5.501、4.054,P＜0.05).结论 基于ceRNA网络有助于筛选卵巢癌铂类药物耐药的相关基因,其中lncRNA HOTAIR、lncRNA SOX2与铂类药物耐药及卵巢癌预后相关.
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编辑人员丨2023/8/5
