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目的:用结核分枝杆菌HSP70(Heat shock protein70,HSP70)启动子改建分枝杆菌穿梭质粒pJEM11为分枝杆菌穿梭表达质粒.方法:利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增H37Rv基因组419607~419835位的HSP70启动子及调控序列,末端引入一个多克隆位点(Multiple clone sites,MCS),再定向克隆入pJEM11的ApaI位点与XbaI位点之间,构建pJCH02载体,并对载体进行酶切鉴定及序列测定.将lhp-esat6融合基因克隆入pJCH02载体,评价其在BCG中的表达情况.结果:HSP70启动子、调控序列及引入的多克隆位点完全正确,lhp-esat6基因在BCG中成功表达.结论:成功改建穿梭质粒pJEM11为穿梭表达质粒pJCH02.本研究为构建BCG多价疫苗奠定了基础.

作者:陈全;朱道银;骆旭东;蒋英;江山

来源:重庆医科大学学报 2003 年 28卷 6期

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作者:
陈全;朱道银;骆旭东;蒋英;江山
来源:
重庆医科大学学报 2003 年 28卷 6期
标签:
结核分枝杆菌 热休克蛋白 启动子 基因表达
目的:用结核分枝杆菌HSP70(Heat shock protein70,HSP70)启动子改建分枝杆菌穿梭质粒pJEM11为分枝杆菌穿梭表达质粒.方法:利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增H37Rv基因组419607~419835位的HSP70启动子及调控序列,末端引入一个多克隆位点(Multiple clone sites,MCS),再定向克隆入pJEM11的ApaI位点与XbaI位点之间,构建pJCH02载体,并对载体进行酶切鉴定及序列测定.将lhp-esat6融合基因克隆入pJCH02载体,评价其在BCG中的表达情况.结果:HSP70启动子、调控序列及引入的多克隆位点完全正确,lhp-esat6基因在BCG中成功表达.结论:成功改建穿梭质粒pJEM11为穿梭表达质粒pJCH02.本研究为构建BCG多价疫苗奠定了基础.

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