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目的 克隆并表达结核分枝杆菌HtpG分子,并鉴定其免疫反应性.方法 采用聚合酶链式反应扩增结核分枝杆菌H37Ra HtpG基因,并克隆至pET22b质粒,测序筛选到重组成功的质粒.重组质粒pET22b-HtpG转化大肠埃希菌BL21(DE3),表达的HtpG重组蛋白通过镍柱纯化.Western blot鉴定表达蛋白,并使用HtpG重组蛋白经ELISA法检测肺结核患者血清特异性抗体水平.结果 成功构建了pET22b-HtpG重组质粒;在大肠埃希菌中表达出分子质量约73kDa的重组蛋白.Westem blot鉴定该重组蛋白具有良好免疫反应性,ELISA法检测肺结核患者血清中存在特异性抗HtpG抗体.结论 在大肠埃希菌内成功表达HtpG重组蛋白,为将该蛋白用于结核免疫诊断试剂的研制奠定了基础.
作者：陈竹；王维斯；韦一鸣；王雪岩；任坤雨；胡琪；余才涛；李顺；吕樵岚；陈勇
来源：热带病与寄生虫学 2019 年 17卷 4期
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