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目的观察血管内皮生长因子受体(VEGFR)结合肽-颗粒酶B(GraB)融合蛋白抗血管生成的作用. 方法抽提人外周血淋巴细胞总RNA,进行RT-PCR克隆GraB cDNA;抽提LoVo细胞总RNA,进行RT-PCR克隆VEGFR结合肽cDNA,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物. 表达产物经亲和层析纯化后,以人血管内皮细胞(ECV304) 和鸡胚尿囊膜血管测定其生物学活性. 结果表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中,具有良好的抗原性和特异性,且具有抑制血管内皮细胞增殖及破坏鸡胚尿囊膜血管形成的活性. 结论 VEGFR结合肽-GraB融合蛋白具有抑制血管生成的功能,在肿瘤生物靶向治疗中有一定潜在价值.

作者:李先茂;曾位森;张亚历;刘晓晴

来源:第四军医大学学报 2002 年 23卷 21期

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作者:
李先茂;曾位森;张亚历;刘晓晴
来源:
第四军医大学学报 2002 年 23卷 21期
标签:
血管内皮生长因子受体结合肽 颗粒酶B 基因克隆 原核表达
目的观察血管内皮生长因子受体(VEGFR)结合肽-颗粒酶B(GraB)融合蛋白抗血管生成的作用. 方法抽提人外周血淋巴细胞总RNA,进行RT-PCR克隆GraB cDNA;抽提LoVo细胞总RNA,进行RT-PCR克隆VEGFR结合肽cDNA,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物. 表达产物经亲和层析纯化后,以人血管内皮细胞(ECV304) 和鸡胚尿囊膜血管测定其生物学活性. 结果表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中,具有良好的抗原性和特异性,且具有抑制血管内皮细胞增殖及破坏鸡胚尿囊膜血管形成的活性. 结论 VEGFR结合肽-GraB融合蛋白具有抑制血管生成的功能,在肿瘤生物靶向治疗中有一定潜在价值.

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