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目的 在原核系统表达人颗粒酶B(GrB)酶原型及活性型基因,并分析表达产物的抗原性.方法 从人外周血淋巴细胞中抽提RNA,用RT-PCR方法扩增人颗粒酶B序列,将其克隆至pGEX-5x-1表达质粒,与GST进行融合表达,用SDSPAGE及Western blot对表达产物进行分析.结果 所克隆的GrB序列与已报道的从人体分离出的GrB完全一致.酶原型和活性型GrB与GST的融合蛋白以包涵体的形式表达,其大小与预期结果一致,并能与GrB特异性抗体发生结合反应.结论 已成功构建了GrB原核表达系统,酶原型及活性型GrB均具有抗原性.
作者：吴雪伶；张春涛；刘春雨；聂建辉；种辉辉；王佑春
来源：中国生物制品学杂志 2007 年 20卷 11期
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