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目的 研究BMP9 对P38 MAPK信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响.方法 体外培养小鼠MC3T3-E1 成骨细胞系,用雷帕霉素(rapamycin)诱导细胞发生自噬,Western 印迹检测BMP9、P38、p-P38 的蛋白表达.再将细胞随机分组后进行相应处理,分别为 pcDNA3.1-BMP9 组(pcD-NA3.1-BMP9)、BMP9 siRNA组(BMP9 siRNA)、P38 激活组(茴香霉素,10 μmol/L)、P38 抑制组(SB-202190,10 μmol/L)、pcDNA3.1-BMP9+P38 抑制组(pcDNA3.1-BMP9+SB-202190,10 μmol/L)、BMP9 siRNA+P38 激活组(BMP9 siRNA+茴香霉素,10 μmol/L)以及对照组.Western印迹检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1 和P62 的表达,CCK-8 和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况.结果 雷帕霉素处理后的MC3T3-E1 细胞中LC3-Ⅱ、Beclin-1、BMP9 和p-P38 蛋白升高(P<0.05),P62 蛋白降低(P<0.05).pcDNA3.1-BMP9 组、P38 激活组LC3-Ⅱ和Beclin-1 蛋白升高(P<0.05),P62 蛋白降低(P<0.05);BMP9 siRNA组、P38 抑制组LC3-Ⅱ和Beclin-1 蛋白降低(P<0.05),P62 蛋白升高(P<0.05).pcDNA3.1-BMP9+P38 抑制组和BMP9 siRNA+P38 激活组LC3-Ⅱ、Beclin-1 和P62 蛋白水平与对照组均无差异(P均>0.05).pcDNA3.1-BMP9 组细胞增殖率升高、凋亡率降低(P均<0.05);BMP9 s

作者:张阳;马菁菁;喻哲昊;刘雪妮;孙林春

来源:医学分子生物学杂志 2023 年 20卷 4期

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作者:
张阳;马菁菁;喻哲昊;刘雪妮;孙林春
来源:
医学分子生物学杂志 2023 年 20卷 4期
标签:
成骨细胞 骨形成蛋白 P38MAPK通路 自噬 凋亡
目的 研究BMP9 对P38 MAPK信号通路的调控作用以及对成骨细胞自噬和凋亡的影响.方法 体外培养小鼠MC3T3-E1 成骨细胞系,用雷帕霉素(rapamycin)诱导细胞发生自噬,Western 印迹检测BMP9、P38、p-P38 的蛋白表达.再将细胞随机分组后进行相应处理,分别为 pcDNA3.1-BMP9 组(pcD-NA3.1-BMP9)、BMP9 siRNA组(BMP9 siRNA)、P38 激活组(茴香霉素,10 μmol/L)、P38 抑制组(SB-202190,10 μmol/L)、pcDNA3.1-BMP9+P38 抑制组(pcDNA3.1-BMP9+SB-202190,10 μmol/L)、BMP9 siRNA+P38 激活组(BMP9 siRNA+茴香霉素,10 μmol/L)以及对照组.Western印迹检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1 和P62 的表达,CCK-8 和流式细胞技术检测细胞的增殖和凋亡情况.结果 雷帕霉素处理后的MC3T3-E1 细胞中LC3-Ⅱ、Beclin-1、BMP9 和p-P38 蛋白升高(P<0.05),P62 蛋白降低(P<0.05).pcDNA3.1-BMP9 组、P38 激活组LC3-Ⅱ和Beclin-1 蛋白升高(P<0.05),P62 蛋白降低(P<0.05);BMP9 siRNA组、P38 抑制组LC3-Ⅱ和Beclin-1 蛋白降低(P<0.05),P62 蛋白升高(P<0.05).pcDNA3.1-BMP9+P38 抑制组和BMP9 siRNA+P38 激活组LC3-Ⅱ、Beclin-1 和P62 蛋白水平与对照组均无差异(P均>0.05).pcDNA3.1-BMP9 组细胞增殖率升高、凋亡率降低(P均<0.05);BMP9 s

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