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目的:检测含有变形链球菌葡糖基转移酶抗原基因(gtfB)的重组质粒pcDNA3-gtfB能否在哺乳动物细胞COS-1中正确地转录和表达.方法:采用脂质体介导法,将pcDNA3-gtfB转染哺乳动物细胞COS-1,采用RT-PCR法、免疫组化LSAB法、Western免疫印迹法检测重组质粒的转录水平和表达产物.结果:pcDNA3-gtfB在转染COS-1细胞后具有转录和翻译活性,蛋白质表达产物分子量为116~212 kD,且可与兔抗葡糖基转移酶抗体发生特异性结合.结论:重组质粒pcDNA3-gtfB在哺乳动物细胞中能正确地转录和表达,为其作为基因疫苗进行动物实验提供了依据.

作者:杨锦波;刘天佳;谭红

来源:华西口腔医学杂志 2002 年 20卷 5期

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作者:
杨锦波;刘天佳;谭红
来源:
华西口腔医学杂志 2002 年 20卷 5期
标签:
龋病 变形链球菌 葡糖基转移酶 基因疫苗
目的:检测含有变形链球菌葡糖基转移酶抗原基因(gtfB)的重组质粒pcDNA3-gtfB能否在哺乳动物细胞COS-1中正确地转录和表达.方法:采用脂质体介导法,将pcDNA3-gtfB转染哺乳动物细胞COS-1,采用RT-PCR法、免疫组化LSAB法、Western免疫印迹法检测重组质粒的转录水平和表达产物.结果:pcDNA3-gtfB在转染COS-1细胞后具有转录和翻译活性,蛋白质表达产物分子量为116~212 kD,且可与兔抗葡糖基转移酶抗体发生特异性结合.结论:重组质粒pcDNA3-gtfB在哺乳动物细胞中能正确地转录和表达,为其作为基因疫苗进行动物实验提供了依据.

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