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目的：观察沉默Smo基因后对大鼠原代软骨细胞增殖与凋亡的影响。方法用机械-酶消化法获取原代大鼠软骨细胞，经免疫细胞化学Ⅱ型胶原（ ColⅡ）鉴定后，将实验分为对照组、control siRNA组和Smo siRNA 1～3组，以慢病毒为载体将siRNA转入软骨细胞，72 h后，MTT法检测细胞活力；反转录PCR （ RT-PCR）及蛋白印迹（ Western blot）检测Smo的表达量；流式细胞术检测细胞凋亡率。结果各组序列经慢病毒载体成功转染到原代软骨细胞中， Smo siRNA1～3均不同程度的抑制Smo的表达，以Smo siRNA2组最为明显，其mRNA及蛋白的表达分别为0.19±0.03和0.39±0.07；同时，Smo siRNA2组细胞活力最低（77.38％±7.19％）而凋亡率最高（21.43％±2.97％）。结论沉默Smo可抑制原代软骨细胞增殖，并诱导软骨细胞凋亡，Smo具有保护软骨细胞免遭凋亡的作用。
作者：朱志坚；于燕妮；陶欣；邓超男
来源：基础医学与临床 2015 年 9期
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