目的 采用脂质体法转染siRNA的方法沉默多发性骨髓瘤U-1996细胞中的UbcH10基因,研究基因沉默后U-1996细胞增殖活性及凋亡等生物学特性的变化情况.方法 根据UbcH10基因信息,设计针对UbcH10基因编码序列(CDS)区的siRNA序列.通过脂质体法转染相关siRNA序列至多发性骨髓瘤U-1996细胞.在转染siRNA后48 h,采用实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹法检测U-1996细胞中UbcH10基因的mRNA和其蛋白水平.选取未转染siRNA序列的空白组和转染阴性siRNA序列组作为试验对照,采用CCK-8法检测转染siRNA序列后24、48、72 h U-1996细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测48 h后U-1996细胞的凋亡情况.结果 通过脂质体法成功转染构建siRNA序列至U-1996细胞.转染后的U-1996细胞中UbcH10基因的mRNA及蛋白表达情况较转染前均明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).和对照组相比,沉默UbcH10基因后U-1996细胞的增殖活性下降,差异有统计学意义(P＜0.05),细胞凋亡率上升,差异也有统计学意义(P＜0.05).结论 干扰UbcH10基因表达可显著抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖活性并增加细胞凋亡.
作者：奚昊；赵黎明；姜华；李璐；侯健
来源：检验医学与临床 2016 年 13卷 12期
