目的 分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)炎性小体在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染小鼠中的免疫保护作用.方法 选取无免疫缺陷的野生型(wide type,WT) C57BL/6小鼠、半胱天冬酶-1-/-小鼠、ASC-/-小鼠及NLRP3-/-小鼠用于体内MTB感染实验,各种系小鼠骨髓和腹腔巨噬细胞用于体外MTB感染实验.体内感染实验小鼠分为2组:第1组中4种小鼠各感染30只,用于细菌载量分析、细胞因子检测及生存期评价;第2组中4种小鼠各感染15只,用于组织病理学分析及肺组织细胞流式分析;实验第1、2、3、4周时各种系小鼠各取1只未感染小鼠作为对照.检测感染小鼠的生存率及肺组织匀浆中细菌载量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,测定未感染野生型小鼠、感染小鼠肺组织匀浆中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-12p40(IL-12p40)、IL-1β和γ-干扰素(IFN-γ)水平;应用流式细胞术分析小鼠感染后肺组织中的浸润细胞组分及细胞坏死情况,并以ELISA法分析支气管灌洗液和血清中坏死相关因子高迁移率族蛋白1(HMGB-1)和IL-1α的分泌情况;对感染肺组织进行组织病理学分析;采用蛋白质免疫印迹检测半胱天冬酶-1的成熟情况;采用ELISA法测定巨噬细胞培养上清中的IL-1β水平.结果 感染MTB 24h后,野生
作者：陈曦；姜广路；贾红彦；张宗德
来源：中国防痨杂志 2017 年 39卷 2期
