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目的：评估细胞穿透肽 CCL 融合蛋白构建的可能性。方法将 CCL6-PEP-6XHis 构建至 pABP 质粒，然后提取 pABP-CCL6-PEP 质粒进行人胚肾 HEK293细胞转染表达，以及 CCL6-PEP-6XHis 蛋白层析纯化和检测。结果成功构建并纯化细胞穿透肽 CCL 融合蛋白。将 CCL6-PEP-6XHis Tag 基因经 PCR 扩增、接入 T 载体、克隆、培养，并提取质粒进行测序鉴定，所得序列与目的基因一致。成功将 CCL6-PEP-6XHis 基因构建至哺乳动物细胞表达载体 pABP 中，经质粒提取和酶切鉴定，电泳结果显示，HindⅢ＋ XbaⅠ切出约430 bp 的条带，符合预期，酶切鉴定正确。蛋白质印迹法（Western Blot）检测结果阳性，表明纯化得到的目标蛋白带有 hisx6标签。结论细胞穿透肽 CCL 融合蛋白能够人工构建，并通过真核细胞进行表达。
作者：刘勇；安艳芳；王仲霞；杨建业；吴君
来源：中国感染控制杂志 2016 年 15卷 6期
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