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目的 对微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白S-dsRNA基因进行克隆、表达和反应原性分析.方法 以微小隐孢子虫总RNA逆转录的cDNA为模板,克隆S-dsRNA基因,并转化至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组原核表达载体pET-28a(+)-S,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察重组蛋白的表达情况,蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白与鼠抗微小隐孢子虫阳性血清的反应原性.结果 PCR和双酶切鉴定表明,重组质粒pET-28a(+)-S构建成功.SDS-PAGE结果显示,37℃下经1 mmol/L IPTG诱导4 h,重组蛋白表达量最大.重组蛋白主要以包涵体形式表达,相对分子质量(Mr)约为37000,与预期大小一致,重组蛋白约占蛋白总量的72.6
作者：刁玉梅；宫鹏涛；李巍；苏利波；黄祥盛；李建华；张西臣
来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011 年 29卷 1期
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