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目的 构建和鉴定微小隐孢子虫CP15/60-23基因重组卡介苗. 方法 以pET-30a-CP15/60-23质粒为模板,PCR扩增CP15/60-23基因片段,然后克隆至TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将CP15/60-23基因片段用限制性内切酶切下定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV262结核杆菌热休克蛋白(HSP)启动子下游,构建重组质粒pMV262-CP15/60-23,用电穿孔将该质粒导入野生卡介苗(BCG-WT)构建微小隐孢子虫CP15/60-23基因重组卡介苗. 结果 扩增出792bp的微小隐孢子虫CP15/60-23基因片段,成功构建pMV262-CP15/60-23质粒,并通过PCR扩增和提取质粒、酶切等表明该质粒被正确导入BCG-WT中. 结论 成功构建微小隐孢子虫CP15/60-23基因重组卡介苗,为研究隐孢子虫病新的防治方法打下了基础.
作者：李瑾；黄炳成；魏庆宽；肖婷；崔勇；傅婷霞；江洪涛；胡颖新；文桂香；张佃波；韩广东；刘克义
来源：中国热带医学 2008 年 8卷 6期
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