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目的克隆表达结核分枝杆菌Rv1884基因,序列测定正确后进行融合表达、纯化.方法采用聚合酶链反应(PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1884编码基因,用限制性内切酶消化后插入到pGEM-Teasy中,序列测定正确后,再亚克隆到融合表达载体pPro-EX HT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rv1884蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化.结果获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1884蛋白基因,得到融合6个组氨酸残基的Rv1884蛋白纯度大于85

作者:薛莹;高雪;姜泓;柏银兰;师长宏;张海;徐志凯;李元

来源:中国人兽共患病杂志 2005 年 21卷 1期

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作者:
薛莹;高雪;姜泓;柏银兰;师长宏;张海;徐志凯;李元
来源:
中国人兽共患病杂志 2005 年 21卷 1期
标签:
结核分枝杆菌 克隆 表达 纯化
目的克隆表达结核分枝杆菌Rv1884基因,序列测定正确后进行融合表达、纯化.方法采用聚合酶链反应(PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rv1884编码基因,用限制性内切酶消化后插入到pGEM-Teasy中,序列测定正确后,再亚克隆到融合表达载体pPro-EX HT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的Rv1884蛋白,在变性条件下对目的蛋白进行纯化.结果获得了结核分枝杆菌H37Rv株Rv1884蛋白基因,得到融合6个组氨酸残基的Rv1884蛋白纯度大于85

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