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目的 优化重组HIV-1 DNA疫苗工程菌的中试发酵工艺.方法 优化质粒转化条件,制备工程菌Jm109/pVAX1-MEGp24种子液,连续传30代,检测其遗传稳定性;优化培养基成分、补料基质、补料方式和培养时间,确定最佳发酵参数;并应用最佳发酵参数,于50 L发酵罐进行3批中试规模的发酵,考察在发酵培养过程中质粒的稳定性和超螺旋质粒的比例.结果 工程菌在连续传代30次后,质粒拷贝数基本保持稳定;最佳发酵参数为:采用以甘油为碳源的培养基,以梯度恒速流加方式补料,培养时间13 h;通过3批稳定发酵.最终可获得湿菌67.0～68.6 g/L,质粒含量可达1.62～1.73 mg/g菌,超螺旋质粒的比例达93
作者：宋英今；金宁一；李霄；田明摇；张立树；李昌
来源：中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 5期
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