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目的 构建结核分枝杆菌PPE68基因的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR法扩增PPE68基因,将其克隆至pET-32a(+)载体中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-PPE68,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定后,进行纯化.结果 重组表达质粒pET-32a(+)-PPE68经PCR及双酶切鉴定构建正确,测序结果与GenBank中登录的PPE68基因序列一致.表达的TrxPPE68融合蛋白相对分子质量约为57 000,表达量约占菌体总蛋白的41
作者：佘茜；徐蕾；何永林；靳志栋；张丹；杨春
来源：中国生物制品学杂志 2010 年 23卷 12期
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