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目的:克隆、表达与纯化出AP-2β蛋白质,并用所表达的蛋白质制备出抗AP-2β的抗体.方法:将AP-2β基因插入到表达载体pGEX-4T-1谷胱苷肽-S-转移酶基因下游,所得克隆经测序,以确定其阅读框码的正确性,然后用正确的克隆质粒转化E.coli BL21,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,而后用谷胱苷肽琼脂糖-4B纯化所表达的融合蛋白质.通过凝胶迁移率变动分析实验(EMSA)测得蛋白质的生物学活性,所得蛋白质用于制备抗体.结果:得到一条大约78 KD的蛋白质,并且成功的制备了抗体,所得蛋白质和抗体均具有很好的生物学活性.结论:我们成功的表达出转录激活因子AP-2β并制备出抗AP-2β的抗体,为一下步对AP-2β的功能进行研究打下了良好的基础.
作者：肖顺勇；周建林；钟英丽；胡翔；江铁山；张健
来源：中国现代医学杂志 2003 年 13卷 18期
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