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目的：研究抗菌肽LL-37通过促进阴道上皮细胞免疫因子的分泌抑制假丝酵母菌的作用。方法（1）构建LL-37原核表达载体pET-Duet/LL-37并在大肠埃希菌M15中诱导表达。对所表达的LL-37融合蛋白进行纯化及鉴定，并用K-B纸片法初步验证LL-37纯化蛋白的抗真菌活性。（2）纯化的LL-37蛋白加入到与假丝酵母菌共培养的人阴道上皮细胞[即外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）阴道上皮细胞模型]中，并分为实验组与对照组（不加LL-37纯化蛋白），采用葡萄糖消耗法观察抑菌效果[以吸光度（A）值表示]。采用ELISA方法检测不同时间点干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素10（IL-10）水平及IFN-γ/IL-10比值的变化。结果（1）诱导表达的LL-37融合蛋白的浓度为433.92μg/ml，纯度达96
作者：霍彦；王芳；孙蓓；尹利荣；张萍萍；张钰娟；张步美
来源：中华妇产科杂志 2016 年 2期
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