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目的:检测前列腺癌PC-3、LNCaP及DUl45细胞中核干因子(Nueleostemin,NS)基因的表达,研究NS基因沉默后对PC-3细胞增殖能力的影响. 方法:采用免疫细胞化学法及逆转录.聚合酶链反应(RT.PCR)分别检测NS蛋白及mRNA在3种前列腺癌细胞中的表达.用NS特异性小发夹RNA表达质粒转染PC-3细胞,分别用RT-PCR及Western印迹方法检测转染后细胞(简称NS-shRNA.PC-3)中NS mRNA及蛋白的变化.比较NS基因沉默前后PC-3细胞体外、裸鼠体内增殖能力及凋亡情况的变化. 结果:3种细胞中均显示NS基因高表达.转染后NS-shRNA-PC.3细胞中NS表达显著降低,细胞增殖速度减慢,GO/G1期细胞百分率显著升高,早期凋亡细胞增多.体内致瘤实验显示,NS基因沉默后,PC-3细胞在裸鼠体内增殖能力显著降低. 结论:NS在前列腺癌细胞系中呈高表达,RNA干扰沉默NS基因后PC-3细胞增殖能力显著降低,凋亡细胞增多.

作者:刘冉录;徐勇;张志宏;王萌;孙建涛;张玥;李胜芝

来源:中华男科学杂志 2009 年 15卷 7期

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作者:
刘冉录;徐勇;张志宏;王萌;孙建涛;张玥;李胜芝
来源:
中华男科学杂志 2009 年 15卷 7期
标签:
核干因子 前列腺癌 PC-3 RNA干扰 nucleostemin prostate cancer PC-3 RNA interference
目的:检测前列腺癌PC-3、LNCaP及DUl45细胞中核干因子(Nueleostemin,NS)基因的表达,研究NS基因沉默后对PC-3细胞增殖能力的影响. 方法:采用免疫细胞化学法及逆转录.聚合酶链反应(RT.PCR)分别检测NS蛋白及mRNA在3种前列腺癌细胞中的表达.用NS特异性小发夹RNA表达质粒转染PC-3细胞,分别用RT-PCR及Western印迹方法检测转染后细胞(简称NS-shRNA.PC-3)中NS mRNA及蛋白的变化.比较NS基因沉默前后PC-3细胞体外、裸鼠体内增殖能力及凋亡情况的变化. 结果:3种细胞中均显示NS基因高表达.转染后NS-shRNA-PC.3细胞中NS表达显著降低,细胞增殖速度减慢,GO/G1期细胞百分率显著升高,早期凋亡细胞增多.体内致瘤实验显示,NS基因沉默后,PC-3细胞在裸鼠体内增殖能力显著降低. 结论:NS在前列腺癌细胞系中呈高表达,RNA干扰沉默NS基因后PC-3细胞增殖能力显著降低,凋亡细胞增多.

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