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目的 观察下调CtBP2对人前列腺癌C4-2细胞体外增殖及体内成瘤的影响并讨论其机制.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测前列腺癌组织和癌旁组织中CtBP2mRNA表达量;将靶向CtBP2基因短发卡RNA(shRNA)质粒及阴性对照(NC)质粒分别转入C4-2细胞,FQ-PCR和Western blot法分别检测CtBP2 mRNA及蛋白的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞仪分别检测下调CtBP2表达对C4-2细胞体外增殖能力和凋亡的影响;裸鼠皮下移植瘤实验观察下调CtBP2对成瘤的影响;通过Western blot法检测下调CtBP2对c-myc和HSPC 111蛋白表达的影响.结果 CtBP2 mRNA在前列腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(4.08±1.25比1.0 ±0.46)(P<0.05);与NC组细胞比较,CtBP2-shRNA组细胞CtBP2的mRNA(0.21 ±0.03比0.97 ±0.09)和蛋白(0.45±0.02比1.02±0.07)表达量均显著降低(P<0.05);CCK-8检测结果显示,在24、48、72 h CtBP2-shRNA组细胞450nm处吸光度值分别为0.45±0.05,1.37±0.09和1.64±0.07,而NC组细胞为0.78±0.08,2.35±0.18和2.99±0.28,下调CtBP2后细胞增殖水平分别降至NC组细胞的(60.1±13.3)%、(59.4±6.3)%和(56.0±6.6)%;通过流式细胞检测发现下调CtBP2可显著促进C4-2细胞的凋亡,凋亡率为(32.57±1.98)% (P <0.0

作者:朱建强;张昌文;张蒙;盛镔;张志宏;徐勇

来源:中华实验外科杂志 2015 年 32卷 6期

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作者:
朱建强;张昌文;张蒙;盛镔;张志宏;徐勇
来源:
中华实验外科杂志 2015 年 32卷 6期
标签:
前列腺癌 增殖 CtBP2 RNA干扰 Prostate cancer Proliferation C-terminal-binding protein RNA interference
目的 观察下调CtBP2对人前列腺癌C4-2细胞体外增殖及体内成瘤的影响并讨论其机制.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测前列腺癌组织和癌旁组织中CtBP2mRNA表达量;将靶向CtBP2基因短发卡RNA(shRNA)质粒及阴性对照(NC)质粒分别转入C4-2细胞,FQ-PCR和Western blot法分别检测CtBP2 mRNA及蛋白的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和流式细胞仪分别检测下调CtBP2表达对C4-2细胞体外增殖能力和凋亡的影响;裸鼠皮下移植瘤实验观察下调CtBP2对成瘤的影响;通过Western blot法检测下调CtBP2对c-myc和HSPC 111蛋白表达的影响.结果 CtBP2 mRNA在前列腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(4.08±1.25比1.0 ±0.46)(P<0.05);与NC组细胞比较,CtBP2-shRNA组细胞CtBP2的mRNA(0.21 ±0.03比0.97 ±0.09)和蛋白(0.45±0.02比1.02±0.07)表达量均显著降低(P<0.05);CCK-8检测结果显示,在24、48、72 h CtBP2-shRNA组细胞450nm处吸光度值分别为0.45±0.05,1.37±0.09和1.64±0.07,而NC组细胞为0.78±0.08,2.35±0.18和2.99±0.28,下调CtBP2后细胞增殖水平分别降至NC组细胞的(60.1±13.3)%、(59.4±6.3)%和(56.0±6.6)%;通过流式细胞检测发现下调CtBP2可显著促进C4-2细胞的凋亡,凋亡率为(32.57±1.98)% (P <0.0

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