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大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2毒力岛研究进展
编辑人员丨2023/8/6
许多革兰氏阴性茵借助Ⅲ型分泌系统黏附在宿主细胞表面,然后跨越胞膜将特异性蛋白注入宿主细胞内,破坏宿主细胞内的多种信号通路,从而有利于细菌的感染及定殖.在肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)中,除了肠细胞脱落位点(Locus of entericyte effacement,LEE)毒力岛编码的Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS)外,在分析肠出血性大肠杆菌O157∶H7的基因组序列时发现一个新的Ⅲ型分泌系统,大肠杆菌Ⅲ型分泌系统2(Escherichia coli type Ⅲ secretion system 2,ETT2)毒力岛.研究显示,ETT2可能在大多数菌株中不具有完整的分泌系统功能,但是其对于细菌毒力的发挥具有重要作用.因此,本文简要综述了大肠杆菌ETT2的基因特征、ETT2的分布与流行、ETT2的功能与机制等方面的主要研究进展.
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编辑人员丨2023/8/6
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一株羊源A型多杀性巴氏杆菌的全基因组测序及生物学特性分析
编辑人员丨2023/8/5
[背景]多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是一种革兰氏阴性菌,可引起动物和人类的呼吸道疾病和败血症等.本实验室前期分离鉴定一株A型Pm HN02菌株.[目的]通过对HN02菌株的全基因组测序及生物信息学分析,扩充多杀性巴氏杆菌的基因组数据库信息;通过毒力基因鉴定和系统进化树分析,明确该菌株含有的毒力基因和遗传进化关系,为临床预防和诊断提供理论依据.[方法]使用单分子实时测序(Single Molecule Real Time Sequencing,SMRT)技术对Pm HN02菌株进行全基因组测序,利用Illumina测序校正后进行基因功能注释和生物信息学分析.使用PCR鉴定菌株毒力基因,并构建进化树进行分析.[结果]Pm HN02菌株全基因组大小为2333292 bp,GC含量为40.15%,预测到的编码基因有2389个,包含19个rRNA(6个23S rRNA、6个16S rRNA、7个5S rRNA)、62个tRNA基因、5个sRNA;含84个串联重复序列、66个小卫星DNA、2个微卫星DNA、9个基因岛、9个前噬菌体;分别有1648、2190和1917个基因注释在GO、KEGG和COG数据库中,而且大部分富集于Pm的代谢过程;还有85个Ⅲ型分泌系统效应蛋白、191个表型突变基因、165个毒力因子相关基因.根据分析结果绘制该菌株的全基因组圈图,并将基因组信息提交至NCBI后获得登录号cp037865.PCR鉴定发现该菌株含有fimA、toxA等14个毒力基因,缺失了tadD等毒力基因.系统进化树分析发现该菌株同北京的Pm3菌株(MH150895.1)进化关系最接近.[结论]研究完成了A型Pm HN02株的全基因组测序和生物学特性鉴定,揭示了其同国内外Pm分离株的进化关系,为预防Pm疾病流行和探索Pm致病机制提供了参考.
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编辑人员丨2023/8/5
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ygeG基因对禽致病性大肠杆菌生物学特性及致病性的影响
编辑人员丨2023/8/5
[目的]本研究构建禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)ygeG基因缺失株,并对其进行生物学特性及致病性分析,探究ygeG在APEC致病过程中的作用,为后期深入研究其所在的Ⅲ型分泌系统2(type three secretion systems 2,ETT2)毒力岛的致病机制奠定基础.[方法]利用Red同源重组技术构建ygeG缺失株APEC81-ΔyygeG及其回复株APEC81-CΔygeG,通过运动性、生物被膜形成能力、抗逆性、抗血清杀菌能力等试验分析yygeG对APEC致病性相关的生物学功能的影响,并通过细胞黏附、侵袭试验及荧光定量PCR检测细胞炎性因子转录水平探究ygeG对APEC感染宿主过程的影响.[结果]成功构建了缺失株APEC81-ΔyygeG和回复株APEC81-CΔygeG;与野生株APEC81相比,缺失株APEC81-ΔygeG生长特性无显著变化(P>0.05),生物被膜形成能力显著降低(P<0.01),运动能力极显著升高(P<0.001),对酸休克和氧化休克的耐受力极显著降低(P<0.001),对碱、渗透压和热休克的耐受力显著降低(P<0.01);血清杀菌实验表明,ygeG缺失能显著降低其抗血清杀菌作用(P<0.0l),血清浓度为100%、30%时,差异极显著(P<0.001);与野生株APEC81相比,缺失株APEC81-ΔygeG对鸡气管粘膜上皮细胞的黏附能力极显著下降(P<0.001),侵袭能力显著升高(P<0.01);同时,经APEC81-ΔygeG感染的鸡气管粘膜上皮细胞炎性因子转录水平显著升高(P<0.01).[结论]ygeG影响APEC的生物被膜形成、运动性、抗逆性、黏附侵袭能力、以及对血清的敏感性等,并可抑制细胞炎性因子表达.
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编辑人员丨2023/8/5
