目的 研究聚二恶烷酮(polydioxanone,PDO)纤维编织的生物可降解气管支架在健康实验兔中的应用可行性和生物降解性.方法 应用自制的PDO气管支架,测定其力学性能,并与健康离体的兔颈段气管做比较.通过外科手术将PDO气管支架植入20只健康的实验兔颈段气管;6只实验兔进行除植入支架外的外科手术,作为对照组.植入术后4、8、12周处死实验兔,通过气管镜检查、组织学染色、电镜扫描等观察组织反应及PDO气管支架的生物降解性.结果 离体兔颈段气管的径向支撑力157.8 cN,弹性回缩率93.42％;直径6mm的PDO气管支架径向支撑力192.43 cN,弹性回缩率96.8％.20只植入支架的实验兔术后短期内多有食欲下降,1只颈部有皮下气肿,4只出现脓血性鼻分泌物,5只出现间歇性喘鸣音;术后1、2周,各有1只实验兔死于分泌物气道阻塞,尸检发现合并有肺部感染,但支架均完全性膨胀;术后4周,实验兔食欲和活动均正常.术后1个月,气管支架完整,未移位,管腔处于开放状态,有不同程度的分泌物覆盖于气管支架;支气管黏膜上覆盖有气道分泌物和炎症细胞,PDO纤维外表面出现开裂.术后2个月,气管支架轮廓尚可见,有新生组织包裹;支气管黏膜气道分泌物和炎症细胞明显减少,PDO纤维出现溶解和断裂.术后3个月,气管支架形态消失,管腔内有增生的组织;PDO纤维出现完全性吸收,支气管黏膜上可见残留的PDO分解的碎片.未植入支架的对照组实验兔术后无异常表现.结论 PDO气管支架在体外与颈段气管有类似的机械性能,在健康兔气管内具有良好生物可降解性和能够起到扩张支撑的作用.

目的 建立化妆品中二恶烷的吹扫捕集-GC-MS/MS测定方法.方法 利用吹扫捕集-GC-MS/MS联用仪,采用多级反应监测(MRM)扫描模式,选择m/z 88为母离子、定性子离子m/z 58和定量子离子m/z 57测定化妆品中二恶烷的含量.结果 通过优化吹扫条件,减少解吸时间为0.25 min,得到的1,4-二恶烷的峰形最完美;减少吹扫时间为6 min,1,4-二恶烷吹扫效率最高.在所建立的实验条件下,二恶烷的线性范围为0μg/ml々 100 μg/ml,回归方程为y =2 327x-7 016,相关系数为0.999 5,方法的检出限为0.015 μg/g.样品的加标回收率为92.4％～98.9％,相对标准差(RSD)为1.52％ ～ 3.06％.结论 本方法采用的MRM扫描模式有效消除了复杂基质的干扰,所建立的分析方法操作简便、准确、灵敏、快速,可用于化妆品中痕量二恶烷的测定.

背景:构建既具有仿生结构又具备合适可降解性和良好生物相容性的组织工程纤维环支架仍是难点.目的:以聚己内酯和聚二恶烷酮为原材料制备仿生可降解支架并评估其作为组织工程纤维环支架的可行性.方法:通过熔融纺丝技术制备5组不同比例支架(聚己内酯组、聚己内酯/聚二恶烷酮分别为70/30、50/50、30/70组、聚二恶烷酮组).扫描电子显微镜观察其结构、纤维直径、孔径;测量支架的力学性能和接触角;通过体外模拟和皮下埋植观察支架体外、体内降解情况;检测降解组织周围炎症因子白细胞介素1β 和肿瘤坏死因子 α 的表达情况.接种人脐带间充质干细胞培养7 d,通过CCK-8和死活细胞检测细胞增殖和存活情况.实验于2016-03-02经天津市天津医院医学伦理委员会批准.结果与结论:①扫描电子显微镜观察显示各组支架纤维粗细均匀,纤维成60°角;②力学性能分析显示单纯聚二恶烷酮支架的拉伸和压缩模量最低,不符合纤维环力学要求;聚己内酯组的力学性能最佳,聚己内酯/聚二恶烷酮为70/30和50/50的支架力学性能适中;③亲水性检测结果表明聚二恶烷酮含量越多,支架亲水性越好;④支架降解情况分析显示,对于组织工程纤维环再生修复来说,单纯聚二恶烷酮和聚己内酯/聚二恶烷酮为30/70支架降解过快,聚己内酯组的降解过慢,聚己内酯/聚二恶烷酮为70/30和50/50的支架降解速率较合适;⑤降解组织周围炎症反应分析显示支架中聚己内酯比例越高炎症反应越严重;⑥CCK-8和死活细胞结果显示人脐带间充质干细胞在聚己内酯/聚二恶烷酮三组混合支架具有良好的增殖活性并且存活率高;⑦结果表明,采用熔融纺丝技术制备的聚己内酯/聚二恶烷酮为70/30和50/50两组支架能够模拟天然纤维环结构,同时具备合适可降解性、优越的力学性能和良好生物相容性,适合用于组织工程纤维环支架的构建.

放置胆道支架是治疗胆道良性狭窄(benign biliary stricture,BBS)主要手段之一.目前常用的胆道支架是塑料支架和自膨式金属支架,但塑料支架易堵塞、移位,需要频繁更换;而金属支架价格昂贵、取出困难.生物可降解胆道支架(biodegradable biliary stent,BDBS)安全有效且无需移除,是极具应用前景的新型支架,但迄今为止临床使用经验有限.当前生物可降解支架最常用的材料是聚二恶烷酮,有限的人体试验显示其生物相容性良好.近期经内镜和经皮经肝放置自膨式聚二恶烷酮胆道支架治疗胆道良性狭窄的研究令人瞩目,初步的结果也令人鼓舞,但较高的术后胆管炎发生率也让人担忧.逐步增多的临床研究显示BDBS的安全性和有效性,初步展现出其广阔的应用前景,未来需要对长期临床效果进行进一步的大样本临床对照研究.

目的 构建幽门螺杆菌原核表达载体,表达、纯化并筛选幽门螺旋杆菌HtrA蛋白的结晶条件,测定HtrA蛋白酶活性.方法 通过PCR技术构建幽门螺杆菌HtrA蛋白基因重组表达质粒pET-28a-HtrA,在大肠埃希菌BL21(DE3)进行重组蛋白HtrA的原核表达;经Ni离子亲和层析、凝胶过滤层析纯化蛋白;通过Hampton Research结晶试剂盒筛选HtrA蛋白结晶条件.经SDS-PAGE和质谱鉴定后通过免疫荧光法测定HtrA蛋白酶活性.结果 成功构建重组质粒pET-28a-HtrA,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)菌株进行HtrA蛋白可溶性表达,表达蛋白分子质量约为53 ku,与预期相符;使用AKTA pure纯化目标蛋白,SDS-PAGE分析蛋白纯度达95％,产量约11 mg/L;使用结晶机器人筛选HtrA蛋白的初始结晶条件为:0.1 mol/L甘氨酸,pH 9.0,0.2％二恶烷,10％聚乙二醇.重组HtrA具有蛋白酶活性,即能切割E-cadherin.结论 利用蛋白表达、纯化和蛋白结晶技术筛选出幽门螺旋杆菌HtrA蛋白结晶条件,为其三维结构解析与功能研究奠定了基础.