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基于二氧四氢喋啶合酶多聚纳米抗体的血清中可溶性PD-L1蛋白检测方法
编辑人员丨6天前
目的:基于二氧四氢喋啶合酶(LS)多聚纳米抗体,建立一种检测血清中可溶性细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)蛋白的方法。方法:采用竞争ELISA筛选识别PD-L1不同表位的纳米抗体作为配对抗体,建立双纳米抗体夹心ELISA检测方法(Nbs-ELISA)。为了进一步提高敏感性,将纳米抗体与LS进行融合,获得多聚形式的纳米抗体作为sPD-L1蛋白的捕获分子,建立基于LS的多聚纳米抗体ELISA检测方法(LSNbs-ELISA)。结果:与Nbs-ELISA方法相比,LSNbs-ELISA方法对sPD-L1的检测敏感性提高了约11倍,Nbs-ELISA对血清中sPD-L1的检出限为2.87 ng/ml,而LSNbs-ELISA对PD-L1的检出限为0.255 ng/ml。2种检测方法对sPD-L1的检测均具有很高的特异性,与掺入血液中的PD-1、CD27、CD70、CD137和CD147蛋白均不结合。结论:建立的基于LS多聚纳米抗体检测血清中PD-L1的检测方法有较高的敏感性和特异性,对肺癌患者血清中可溶性PD-L1的检测具有潜在的临床应用价值。
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编辑人员丨6天前
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