目的 探究五味沙棘散对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的过敏性哮喘大鼠的保护作用及机制.方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松(0.5 mg/kg)组和五味沙棘散(0.5、2.0 g/kg)组,建立OVA诱导的大鼠早期支气管哮喘模型,苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察支气管病理情况及纤维化程度;免疫组化检测支气管间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)的表达和分布;ELISA检测血清中免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)和白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)水平;亚甲基蓝法和WSP-1 荧光探针法测定血清中硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)水平.建立CdCl2 诱导的支气管上皮BEAS-2B细胞损伤模型,MTT法检测细胞活性;Hoechest 33342 染色法观察细胞核形态变化;MitoSOX染色检测细胞线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species,mtROS)水平;Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、核因子红细胞系 2 相关因子(nuclear factor erythroid 2-related factor,Nrf2)和Kelch样ECH关联蛋白 1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)蛋白表达.结果 五味沙棘散能够减少支气管黏膜上皮细胞脱落和黏液分泌(P＜0.001),降低胶原纤维的沉积和Cx43 的表达及分布(P＜0.05、0.01、0.001),降低血清中IgE、IL-13水平(P＜0.05),升高血清中H2S水平(P＜0.05、0.01).五味沙棘散含药血清呈剂量相关性地抑制CdCl2 诱导的BEAS-2B细胞凋亡及mtROS水平(P＜0.01、0.001),上调Caspase-3和Nrf2 蛋白表达(P＜0.05、0.01),下调Keap1 蛋白表达(P＜0.01).结论 五味沙棘散对OVA诱导的哮喘大鼠和CdCl2 诱导的支气管上皮细胞凋亡均具有保护作用,其机制可能与调控Nrf2/Keap1 信号通路有关.

目的 观察五味沙棘散联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎痰热闭肺证的临床疗效及对肺功能、血清嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)的影响.方法 将100 例小儿支原体肺炎痰热闭肺证患者按照随机数字表法分为2 组,对照组50 例予阿奇霉素治疗,治疗组50 例在对照组治疗基础上予五味沙棘散治疗.2 组均治疗10 天.比较2 组治疗前后中医证候评分、肺功能指标[第 1s 用力呼气容积(FEV1)、FEV1 占预计值的百分比(FEV1%pred)、FEV1 占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、呼气峰值流速(PEF)]及血清嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)水平,并统计2 组发热、气喘、咳嗽、痰鸣消失时间及疗效.结果 治疗组总有效率 96.00%(48/50),对照组总有效率84.00%(42/50),治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05).治疗组发热、气喘、咳嗽、痰鸣消失时间均短于对照组(P<0.05).2 组治疗后中医证候各项评分及总分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组治疗后均低于对照组(P<0.05).2 组治疗后FEV1、FEV1%pred、FEV1/FVC、PEF均较本组治疗前升高(P<0.05),且治疗组治疗后均高于对照组(P<0.05).2 组治疗后血清ECP、MDC水平均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组治疗后均低于对照组(P<0.05).2 组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用五味沙棘散联合阿奇霉素治疗支原体肺炎痰热闭肺证患儿临床疗效显著,中医证候评分和血清ECP、MDC水平均明显降低,肺功能明显改善,未增加不良反应发生情况,较阿奇霉素单独治疗优势更加明显.

目的:建立超高效液相色谱(UPLC)法同时测定五味沙棘散中7个成分含量的方法.方法:色谱柱为AQUITY UPLCBEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 ml·min-1,检测波长为250 nm、370 nm,柱温为30℃,进样量为1μl.采用统计分析软件对含量测定结果进行聚类分析与主成分分析.结果:栀子苷、甘草苷、槲皮素、异鼠李素、甘草酸、木香烃内酯和去氢木香内酯检测质量浓度线性范围分别为49.53～ 445.80 μg·ml-1、5.86～52.74μg·ml-1、8.35～75.12 μg·ml-1、11.80～106.20 μg·ml-1、16.74～150.70μg·ml-1、41.73～375.60μg·ml-1、60.23～542.20 μg·ml-1(r≥0.999 2);平均加样回收率分别为98.6％,98.9％,98.8％,99.0％,99.0％,98.9％,99.3％,RSD分别为0.3％,0.2％,0.1％,0.4％,0.3％,0.3％,0.2％(n=9).同一厂家产品质量具有较高的稳定性,不同厂家样品存在一定差异.结论:本法简便、准确、重复性好,可用于五味沙棘散的质量控制,提示厂家在生产过程中要加强对沙棘膏和木香质量的控制,为五味沙棘散质量提高提供参考.

目的 筛选藏药五味沙棘散(WSP)治疗新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19),的潜在活性成分.方法 采用中药系统药理学技术平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)筛选藏药五味沙棘散(沙棘、余甘子、木香、甘草、葡萄)潜在活性成分,采用Swiss Target Prediction预测活性成分的潜在靶点,通过String数据库绘制蛋白质相互作用网络,通过DAVID数据库对WSP作用靶点进行Gene Ontology (GO)功能注释和KEGG通路富集分析,借助Cytoscape 3.7.2构建“药物-成分-靶点”网络.通过Maestro version 11.5软件,将活性成分作为配体与受体血管紧张素转换酶Ⅱ(ACE2)、细胞丝氨酸蛋白酶(TMPRSS2)和COVID-19 3CL水解酶(Mpro)进行分子对接验证.结果 “药物-成分-靶点”网络包含5味药物、29个化合物和32个核心靶点,得到GO功能富集条目225条(p＜0.05),KEGG通路富集筛选得到15条信号通路(p＜0.05).分子对接结果显示甘草苷、甘草异黄烷酮、槲皮素、山柰酚等核心化合物与COVID-19靶点结合力最强.结论 本研究体现出藏药五味沙棘散“多成分-多靶点-多途径”的作用特点,其活性成分通过与ACE2,TMPRSS2和COVID-19 3CL水解酶结合作用于AKT1、VEGFA、EGFR等靶点,调节MAPK signaling pathway、Toll-like receptor signaling pathway、T cell receptor signaling pathway等多条信号通路,实现对COVID-19肺炎潜在的治疗作用.