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蝙蝠葛苏林碱对HEK293细胞中L-型钙通道CaV1.2的作用
编辑人员丨2023/8/6
目的:探讨蝙蝠葛苏林碱(DS)对人胚肾细胞(HEK293)上表达的L-型钙通道Cav1.2的作用.方法:采用脂质体转染法,将L-型钙通道Cav1.2蛋白基因转染到HEK293细胞上,全细胞膜片钳技术记录L-型钙电流ICav1.2,观察DS对L-型钙通道电生理特性的影响.结果:DS在1,3,10 μmol·L-1浓度范围内呈浓度依赖性抑制ICav1.2电流,其抑制率分别为(14.68 ± 4.02)%、(32.37 ± 6.63)% 和(59.63 ± 5.23)%;3 μmol·L-1的DS对ICav1.2的抑制率与相同浓度的伊拉地平比较,其抑制强度约为伊拉地平的40%.结论:DS可浓度依赖性抑制HEK293细胞上表达的Cav1.2,其作用强度比特异性L-型钙通道阻断药伊拉地平要弱.
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编辑人员丨2023/8/6
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伊拉地平对Fe2+诱导MES23.5细胞毒性的作用
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨L型Ca2+通道阻断剂伊拉地平对硫酸亚铁诱导的MES23.5细胞毒性的作用.方法 以MES23.5多巴胺能细胞系为观察对象,利用流式细胞仪筛选Fe2+最适浓度,伊拉地平则选用实验室前期筛选浓度5μmol/L.应用免疫印迹法(Western blot)检测与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,初步评估伊拉地平对Fe2+诱导的细胞毒性的保护作用.结果 与对照组相比,40μmol/L Fe2+组线粒体膜电位(ΔΨm)明显下降,差异具有统计学意义(F=68.190,q=8.898,P<0.001).与对照组相比,单独加Fe2+组细胞Bcl-2/Bax蛋白表达比值明显降低(F=6.856,q=6.055,P<0.01),而伊拉地平预处理可改善由Fe2+造成的Bcl-2/Bax蛋白表达比值降低的现象,差异具有统计学意义(q=4.103,P<0.05).结论 伊拉地平预处理可以抑制Bcl-2/Bax蛋白表达比值降低,对Fe2+诱导的细胞损伤可能具有保护作用.
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编辑人员丨2023/8/5
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伊拉地平对血压和肾功能的影响
编辑人员丨2023/8/5
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编辑人员丨2023/8/5
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L型Ca2+通道阻断剂通过抑制NLRP3炎症小体激活对MPP+诱导的小胶质细胞炎症模型发挥神经保护作用
编辑人员丨2023/8/5
目的 在MPP+诱导的帕金森(PD)细胞炎症模型中,使用L型Ca2+通道阻断剂伊拉地平对BV2小胶质细胞进行干预,观察其炎症反应的影响探讨L型Ca2+通道阻断剂伊拉地平是否可以调控NLRP3炎症小体通路.方法 使用PD造模药物MPP+在BV2小胶质细胞上制备PD炎症细胞模型,CCK8法分别检测不同浓度MPP+和伊拉地平处理后对BV2的小胶质细胞具体活性影响,选择合适的药物实验浓度.将BV2的小胶质细胞变为4组,分别为空白对照组、MPP+造模组、伊拉地平预处理组和MCC950预处理组(即阳性对照组),采用实时的荧光定量PCR检测BV2小胶质细胞中IL-1 β、NLRP3、CASPASE-1、GSDMD、NOX2基因mRNA表达水平;细胞免疫荧光检测BV2小胶质细胞中IL-1β、NLRP3、CASPASE-1、GSDMD、NOX2 蛋 白表达水平;Western blot 检测小胶质细胞 IL-1 β、NLRP3、CASPASE 1、GSDMD、NOX2蛋白表达水平.结果 与空白对照组相比,MPP+(100μmol·L-1)能明显降低BV2细胞活性,显著升高IL-1β,NLRP3、CASPASE-1、GSDMDmRNA表达水平(P＜0.05).与空白组比较,伊拉地平(5μmol·L-1)干预后,减缓了 MPP+导致的细胞活性降低(P＜0.05),5μmol·L-1伊拉地平可显著降低IL-1β、NLRP3、CASPASE1、GSDMDmRNA表达水平(P＜0.05),显著降低MPP+诱导的IL-1β、NLRP3、CASPASE 1、GSDMD蛋白表达水平.结论 在PD炎症细胞模型中,L 型 Ca2+通道阻断剂伊拉地平可能通过NLRP3通路减轻了小胶质细胞炎症因子的表达.
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编辑人员丨2023/8/5
