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新疆出血热病毒基因组抗原表位及其实验室检测价值的评价
编辑人员丨6天前
目的:掌握克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)片段的精细抗原表位谱分布,明确优势抗原表位在克里米亚-刚果出血热(CCHF)实验室检测中的价值。方法:2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良生物肽合成方法分段表达出由8个氨基酸组成的最小合成短肽,以CCHFV多克隆抗体或单克隆抗体14B7(IgM)或CCHFV阳性羊血清为抗体,用免疫印迹方法鉴定出NP和GP片段上具有抗原活性的最小抗原表位(BCE),并采用邻接法将获得的具有序列多态性的BCE与不同地区的CCHFV进行空间聚类,确定BCE组合方式与地理区域分布的相关性,探讨其在建立血清学诊断中的应用价值。采用原核表达质粒(pET-32a、pGEX-KG)和带有不完整谷胱甘肽(GST188)标签的原核表达质粒(pXXGST-ST-1)构建和表达NP片段上6个不同肽段长度的优势抗原表位,建立间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,以经免疫荧光法(IFA)鉴定的CCHF羊血清为对照,统计分析不同肽段长度的抗原表位重组蛋白与IFA检测结果的特异度、敏感度和总符合率。结果:CCHFV NP和GP片段共有30个具有抗原活性的BCE,其中NP片段抗原表位集中的核心中间片段NP 2(aa 170~305)有6个BCE,两端的NP 1(aa 1~200)和NP 3(aa 286~482)有9个BCE;GP片段的Gc(aa 1~558)和Gn(aa 533~708)片段有14个BCE和1个包含15个氨基酸的长抗原肽(AP),NP片段BCE氨基酸序列的同源性为97.1%,GP片段对应的同源性为89.1%。在GP片段9个具有序列多态性的BCE中,由GnEc1、GnE2、GnE4、GcE3、GcE6和GcAP-4(Ap)6个组合BCE可将15株来自全球不同地区的CCHFV聚类成亚洲Ⅰ、亚洲Ⅱ、非洲Ⅰ、非洲Ⅱ和欧洲 5个地理类群。构建表达的PET-32a-NP(全长)、PGEX-KG-NP 2(aa 170~305)、pGEX-KG-NP 2-1(aa 235~275)、PGEX-KG-NP 2-1-1(aa 237~256)、pXXGST-1-NP 2-1-2(aa 250~265)和PGEX-KG-NP 2-1-3(aa 260~276)6个重组蛋白CCHFV NP兔多克隆抗血清(pAb)免疫印迹反应阳性,以33份经IFA CCHF检测的羊血清为参照,以NP 2和NP 2-1 2个片段构建的重组蛋白为抗原建立的间接ELISA检测方法检测敏感度、特异度和总符合率最好,敏感度分别为73.4%(11/15)和66.7%(10/15),特异度分别为100%(18/18)和94.4%(17/18),总符合率分别为87.9%(29/33)和81.8%(27/33)。 结论:CCHFV NP和GP上分布着数量较多的具有抗原免疫活性的BCE,其中,优势抗原表位在CCHF实验室血清学诊断中具有较高的应用价值。
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编辑人员丨6天前
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杜贝病毒、盖勒尤卜病毒、蒂亚福拉病毒等三种内罗病毒实时荧光RT-PCR检测方法研究
编辑人员丨6天前
目的:建立可检测杜贝病毒(dugbe virus,DUGV)、盖勒尤卜病毒(qalyub virus,QALV)和蒂亚福拉病毒(thiafora virus,TFAV)等三种内罗病毒基因组的实时荧光RT-PCR检测方法。方法:收集、整理,比对、分析在公共数据库发布的三种病毒基因组S节段核苷酸序列,确定检测靶标,利用生物信息软件设计特异性引物、探针,优化检测程序,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,利用体外转录技术制备的模拟样本、其他病毒感染标本、病毒株和正常人血标本比较评价所建方法的检测限、特异性、重复性特征。结果:所建实时荧光定量RT-PCR检测方法均可有效扩增检测病毒靶标RNA,检测限分别为160 copies/μL,20 copies/μL和10 copies/μL,检测科萨努尔森林病病毒、乙型流感病毒BV和BY型、甲型流感病毒H3N2、黄热病毒、乙型脑炎病毒、克里米亚-刚果出血热病毒和塔西那病毒样本无非特异性扩增,三种内罗病毒相互间无交叉反应,重复性分析显示变异系数均在2%以内。结论:本研究建立的检测DUGV、QALV和TFAV的实时荧光RT-PCR方法,可用于相关临床样本、媒介、宿主动物标本以及进出口物品筛查检测。
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编辑人员丨6天前
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阿瓦朗病毒和休斯病毒实时荧光RT-PCR检测方法研究
编辑人员丨6天前
目的:建立可以检测阿瓦朗病毒(Avalon virus,AVAV)和休斯病毒(Hughes virus,HUGV)两种内罗病毒的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并进行初步的评价。方法:收集、整理、比对、分析在公共数据库发布的两种病毒基因组核苷酸序列,确定检测靶标,设计特异性引物、探针,优化检测程序,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法。利用体外转录技术制备的模拟样本、其他病毒感染标本、病毒株和正常人血标本比较评价所建方法的检测限、特异性、重复性特征。结果:所建实时荧光定量RT-PCR检测方法可有效扩增检测AVAV和HUGA靶标RNA,检测限分别约为20拷贝/μl和70拷贝/μl,检测科萨努尔森林病毒、乙型流感病毒BV和BY型、甲型流感病毒H3N2、黄热病毒、乙型脑炎病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、发热伴血小板减少综合征、内罗毕羊病毒和塔西那病毒样本无非特异性扩增,两种内罗病毒相互间无交叉反应,重复性比较分析显示变异系数小于2%。结论:本研究建立的检测AVAV和HUGV的实时荧光定量RT-PCR方法,可用于临床样本检测和媒介生物、宿主动物标本筛查,便于病原的快速识别和疾病诊断。
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编辑人员丨6天前
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2024年6月全球传染病疫情研判分析
编辑人员丨2周前
2024年6月,全球共监测到传染病72种,涉及236个国家和地区.除流感外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(116个)、麻疹(28个)、登革热(27个)和霍乱(18个).病死率位于前5位的传染病分别为裂谷热(62.50%)、人感染H5N1禽流感(51.70%)、拉沙热(17.9%)、炭疽(10.70%)和克里米亚-刚果出血热(7.40%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、登革热、麻疹、霍乱和猴痘.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、登革热、克里米亚-刚果出血热和猴痘;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、黄热病、鼠疫、拉沙热、猴痘、麻疹、疟疾和脊髓灰质炎;美洲主要流行新型冠状病毒感染、登革热、基孔肯雅热和猴痘;欧洲主要流行新型冠状病毒感染、猴痘和麻疹.
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编辑人员丨2周前
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2024年3月全球传染病疫情研判分析
编辑人员丨2024/6/22
2024年3月,全球共监测到传染病75种,涉及236个国家和地区.除流感外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(117个)、登革热(31个)、霍乱(19个)和麻疹(18个).病死率位于前5位的传染病分别为人感染H5N1禽流感(52.10%)、链球菌中毒性休克综合征(24.80%)、拉沙热(18.60%)、克里米亚-刚果出血热(9.20%)和猴痘(6.70%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、麻疹、霍乱、登革热和猴痘.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、登革热、猴痘、克里米亚-刚果出血热和链球菌中毒性休克综合征;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、黄热病、拉沙热、猴痘、麻疹、疟疾和登革热;美洲主要流行新型冠状病毒感染、猴痘、登革热、基孔肯雅热和寨卡病毒病;欧洲主要流行新型冠状病毒感染和猴痘.
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编辑人员丨2024/6/22
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2024年2月全球传染病疫情概要
编辑人员丨2024/5/25
2024年2月,全球共监测到传染病74种,涉及236个国家和地区.除流感外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(117个)、登革热(34个)、麻疹(18个)和霍乱(16个).病死率位于前5位的传染病分别为尼帕病毒病(100.00%)、人感染H5N1禽流感(52.10%)、猴痘(45.80%)、拉沙热(18.10%)和克里米亚-刚果出血热(9.20%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、霍乱、麻疹、登革热和脑膜炎.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、克里米亚-刚果出血热和登革热;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、黄热病、拉沙热、猴痘、麻疹、疟疾和登革热;美洲主要流行新型冠状病毒感染、猴痘、登革热、基孔肯雅热和寨卡病毒病;欧洲主要流行新型冠状病毒感染、猴痘、麻疹和白喉.
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编辑人员丨2024/5/25
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2023年11月全球传染病疫情概要
编辑人员丨2024/3/16
2023年 11月,全球共监测到传染病69种,涉及236个国家和地区.除流感外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(116个)、登革热(34个)、麻疹(25个)和霍乱(18个).病死率位于前5位的传染病分别为人感染H5N1禽流感(52.3%)、拉沙热(17.1%)、克里米亚-刚果出血热(9.3%)、西尼罗热(8.6%)和白喉(5.6%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、疟疾、登革热、麻疹和霍乱.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、克里米亚-刚果出血热和登革热;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、拉沙热、白喉、疟疾、脊髓灰质炎和麻疹;美洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘和登革热;欧洲主要流行西尼罗热和麻疹.
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编辑人员丨2024/3/16
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2023年10月全球传染病疫情概要
编辑人员丨2024/1/13
2023年10月,全球共监测到传染病72种,涉及236个国家和地区.除流行性感冒外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(115个)、登革热(38个)、麻疹(28个)和疟疾(15个).病死率位于前5位的传染病分别为人感染H5N1禽流感(52.3%)、拉沙热(17.2%)、白喉(10.8%)、克里米亚-刚果出血热(9.2%)和西尼罗热(7.6%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、登革热、麻疹、霍乱和白喉.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、克里米亚-刚果出血热和登革热;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、拉沙热、白喉、疟疾、脊髓灰质炎和麻疹;美洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘和登革热;欧洲主要流行西尼罗热.
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编辑人员丨2024/1/13
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2023年9月全球传染病疫情概要
编辑人员丨2023/12/9
2023年9月,全球共监测到传染病73种,涉及236个国家和地区.除流感外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(115个)、登革热(31个)、麻疹(26个)和霍乱(14个).病死率位于前5位的传染病分别为尼帕病毒病(33.3%)、鼠疫(20.0%)、拉沙热(17.1%)、克里米亚-刚果出血热(9.4%)和西尼罗热(7.1%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、疟疾、登革热、麻疹和霍乱.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、克里米亚-刚果出血热和登革热;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、拉沙热、白喉、脊髓灰质炎和麻疹;美洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、登革热、基孔肯雅热和寨卡病毒病;欧洲主要流行西尼罗热.
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编辑人员丨2023/12/9
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2023年8月全球传染病疫情研判分析
编辑人员丨2023/11/25
2023年8月,全球共监测到传染病72种,涉及236个国家和地区.除流感外,涉及国家和地区数量位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染(236个)、猴痘(114个)、登革热(31个)、麻疹(31个)和霍乱(16个).病死率位于前3位的传染病分别为出血热(11.8%)、脑膜炎(6.7%)和西尼罗热(6.1%).死亡病例数位于前5位的传染病分别为新型冠状病毒感染、登革热、霍乱、麻疹和白喉.亚洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、克里米亚-刚果出血热和登革热;非洲主要流行新型冠状病毒感染、霍乱、猴痘、拉沙热、脑膜炎和脊髓灰质炎;美洲主要流行新型冠状病毒感染、登革热、基孔肯雅热和猴痘;欧洲主要流行西尼罗热.
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编辑人员丨2023/11/25
