为挖掘古树大理茶优势内生真菌间座壳属菌株Diaporthe tectonigena的化学成分,该研究采用硅胶、大孔吸附树脂Diaion HP20、葡聚糖凝胶LH-20 等柱层析方法,对该菌株的大米固态发酵提取物进行分离纯化,并通过HRMS、1H-NMR、13 C-NMR、HSQC、HMBC和COSY等波谱分析,对所得化合物进行结构鉴定.结果表明:(1)从该菌株大米固态发酵提取物中分离得到 4 个化合物,其中新化合物 1 鉴定为四氢-β-咔啉二酮哌嗪类生物碱,命名为tectonicgenazine A.(2)3 个已知化合物分别鉴定为trans-cyclo-(D-tryptophanyl-L-tyrosyl)(2)、1H-吲哚-3-羧酸-2,3-二羟基丙酯(3)和N-羟乙基-2-乙酰基吡咯(4),其中化合物 3 为首次从自然界中分离所得.

1先导化合物米哚妥林(midostaurin,1)是2017年美国FDA批准上市的抗肿瘤药物,由诺华公司(前为汽巴嘉基)研发,治疗FLT3激酶突变呈阳性的急性髓性白血病和肥大细胞增多症.本品是由天然抗生素星孢菌素(staurosporine,2)经结构改造而成的.星孢菌素是Omura等在1977年由链霉菌Streptomyces staurosporeus发酵液得到的抗生素(Omura S,Iwai Y,Hirano A,et al.A new alkaloid AM-2282 of Streptomyces origin.Taxonomy,fermentation,isolation and preliminary characterization.J Antibiot,1977,30:275-281),其化学结构经单晶X-衍射分析确证为吲哚并吡咯酮并咔唑-Ⅳ-糖苷的环合物,为九环并合.

目的 建立测定咔哒唑胺原料药中8种残留溶剂含量的气相色谱法.方法 采用DB-624毛细管色谱柱(75 m×0.53 mm,3.0 mm),溶液直接进样,以N-甲基吡咯烷酮为溶剂,程序升温,载气为氮气,流速为3.0 mL·min-1,氢火焰离子化检测器,进样口温度为220℃,检测器温度为300℃,分流比为10:1.结果 甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二甲基亚砜和二甲基甲酰胺的线性范围分别为1.021～51.05(r=0.9992)、1.660～83.00(r=0.9999)、2.402～120.1(r=1.000)、1.087～54.35(r=1.000)、1.137～56.85(r=0.9999)、1.557～77.85(r=0.9998)、2.224～111.2(r=1.000)、2.020～101.0μg·mL-1(r=1.000);平均回收率在93.44％ ～98.52％,RSD在0.32％ ～1.8％;定量限在1.021～2.402μg·mL-1,检测限在0.340～0.801μg·mL-1.结论 本法简便、准确、重复性好,可用于咔哒唑胺原料药中残留溶剂的同时检测.

目的 探讨三羟基咔咯(咔咯1)及其镓配合物(1-Ga)在新型抗肿瘤药物研发中的应用及对人肺癌细胞(A549)增殖的影响.方法 培养人肺癌(A549)细胞,分成对照组、咔咯1组及1-Ga组,采用噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)测定黑暗和光照条件下3组对A549细胞的毒性作用,并计算和比较咔咯1组及1-Ga组半数最大抑制浓度值(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;采用流式细胞术检测咔咯1及1-Ga作用下的A549细胞生长和凋亡情况;于荧光显微镜下对比观察咔咯1及1-Ga对A549细胞形态和线粒体膜电势的影响;另构建异种移植斑马鱼模型,并观察咔咯1、1-Ga对A549细胞生长和转移影响.结果 相较于对照组,咔咯1和1-Ga均对A549、MCF-7、HepG23种肿瘤细胞存在光毒性,光照条件下1-Ga对MCF-7、A549肿瘤细胞的IC50小于咔咯1(P<0.05).光照条件下咔咯1和1-Ga均能抑制A549细胞增殖,A549细胞的外观形态发生明显变化,且1-Ga组细胞形态学变化更显著.光照条件下使用咔咯1和1-Ga处理后的A549肿瘤细胞线粒体膜电势下降,诱导细胞发生凋亡且呈现绿色荧光;且1-Ga组的异种移植斑马鱼模型中A549细胞转移程度相比咔咯1组更低.对照组中99％以上A549细胞存活,咔咯1组、1-Ga组处理过后的A549细胞存活比例均下降,且1-Ga组细胞凋亡比例显著高于咔咯1组(P<0.05).结论 咔咯1及其1-Ga均具有强烈光核酸酶活性,均可通过阻滞细胞周期抑制A549增殖、转移过程,同时可诱导肿瘤细胞发生凋亡,且1-Ga的光核酸酶活性和细胞毒性更强,有望成为一种新型抗肿瘤药物应用于恶性肿瘤的治疗.