随着耐药菌的大量出现，给临床抗感染治疗带来严峻挑战。噬菌体疗法被认为是能够应对这种困境非常有希望的方法，已在很多学科得到探索和应用，在清除皮肤黏膜感染方面的疗效也得到证实，成为目前国际研究的热点。应用多种噬菌体混合的鸡尾酒疗法、噬菌体内溶酶以及噬菌体蛋白治疗耐药的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、克雷伯菌、变形杆菌等获得良好的效果。本文综述噬菌体疗法的背景、特征、发展特点及其在皮肤和泌尿生殖道感染中的应用和前景。

本文报道1例噬菌体用于碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）复杂性尿路感染患者的治疗经过。患者因外伤截瘫30余年，长期留置导尿管并发神经源性膀胱，尿培养为CRKP，头孢他啶阿维巴坦治疗停药后复发，应用噬菌体“鸡尾酒”膀胱灌注达到快速良好的治疗效果。

噬菌体作为一种天然裂解细菌的病毒,可用于细菌疾病治疗.旨在筛选出有效治疗小鼠乳腺炎的噬菌体,为奶牛乳腺炎防治提供参考.以实验室保存的金黄色葡萄球菌AA292菌株为宿主菌,分别从污水样、粪样中分离纯化出2株噬菌体,命名为φFJ04、φAH12.对2株噬菌体的生物学特性进行了分析,结果表明,φFJ04最佳感染复数为1,裂解量为149,温度耐受范围在40～50℃,pH耐受范围在3～10,宿主谱为63/90株;φAH12最佳感染复数为1,裂解量为448,耐受温度在40℃,pH耐受范围在4～12,宿主谱为28/90株.通过全基因组测序分析,发现φFJ04全长38 540 bp,(G+C)％=33.79％,含有48 个 ORF;φAH12 全长264 664 bp,(G+C)％=24.7％,含有282个ORF.φFJ04、φAH12基因组内均不含整合元件、毒力基因和耐药基因,可用于体内治疗.对噬菌体杀菌效果进行评估,发现由φFJ04、φAH12组成的噬菌体鸡尾酒在6 h可以将104 CFU/mL的金黄色葡萄球菌全部杀灭.施用108 PFU/mL噬菌体鸡尾酒对108 CFU/mL AA292所致的小鼠乳腺炎有明显改善作用,能使治疗组乳腺组织细菌载量下降2.8 log10CFU/g,杀菌效果约为99.84％.通过观察HE染色切片发现,治疗组乳腺腺泡结构较为完整,乳腺上皮细胞脱落显著减少,为奶牛乳腺炎防治提供了参考.

碳青霉烯类抗菌药物被誉为对抗病原菌的最后一道防线,然而近年来鲍氏不动杆菌(AB)耐药性增长严重,是世界范围内最具挑战性的医院获得性病原体之一.噬菌体作为细菌的天然杀手,在应对其日益增长的多药耐药性威胁具有巨大潜力.本文综述了目前大部分噬菌体对抗AB的研究,按照单噬菌体疗法、噬菌体鸡尾酒疗法、噬菌体衍生酶来对抗病原体等方面进行分类阐述,并探讨治疗效果,为鲍氏不动杆菌噬菌体的临床应用提供更全面的认识和理论支持.

[背景]噬菌体鸡尾酒可作为一种杀灭猕猴桃溃疡病病原菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)的生物制剂,但关于噬菌体鸡尾酒在田间的防治效果和对猕猴桃植株叶际内生细菌群落结构影响的研究依然较少.[目的]探究噬菌体鸡尾酒在田间防控猕猴桃溃疡病的效果,以及噬菌体鸡尾酒对猕猴桃茎内叶际细菌微生态的影响.[方法]使用猕猴桃溃疡病病原菌感染健康植株,对比施用噬菌体鸡尾酒和传统铜制剂后溃疡病的发病情况,利用高通量测序技术分析猕猴桃叶际内生细菌群落结构的变化.[结果]与铜制剂相比,噬菌体鸡尾酒可更有效地控制猕猴桃溃疡病,改变叶际细菌群落的丰富度与多样性,增强群落结构的稳定性,改善群落物种功能基因丰度情况,一定程度使叶际细菌群落恢复至健康状态.[结论]噬菌体鸡尾酒在杀灭病原菌的同时具有良好的微生态调节功能,在猕猴桃溃疡病的生物防治中具有巨大的应用潜力.

目的 研究分枝杆菌噬菌体DNAⅢ的生物学特性及抗耐结核潜力,筛选鸡尾酒疗法配方噬菌体.方法 采用双层琼脂培养法制备噬菌体DNAⅢ,观察噬菌斑特点;透射电镜观察DNAⅢ形态;噬菌斑实验检测DNAⅢ最佳和最小感染复数(MOI);通过一步生长曲线实验确定DNAⅢ潜伏期及裂解量;检测DNAⅢ对温度、酸碱度的耐受情况;检测DNAⅢ对分枝杆菌的裂解谱;血清中和实验检测DNAⅢ的抗原性,及其与其它8种分枝杆菌噬菌体之间的亲缘关系.结果 DNAⅢ噬菌斑圆形透明,直径约1mm;DNAⅢ尾长(208±28.7) nm;最佳MOI为10-4,DNAⅢ对耻垢分枝杆菌极度易感;DNAⅢ感染宿主菌的潜伏期约为165min,裂解量为28;DNAⅢ对热、酸碱均敏感;DNAⅢ能裂解耻垢分枝杆菌、结核分支杆菌标准株、多数结核分枝杆菌临床耐药株;DNAⅢK值为770.01,抗血清对非对应噬菌体的中和活性差.结论 DNAⅢ抗原性低,裂解谱广,具有抗耐药结核作用,可作为鸡尾酒疗法的候选噬菌体.

目的 研究分枝杆菌噬菌体33D的基因组特性并探索其抗结核治疗的潜力.方法 通过鸟枪法完成33D全基因组测序;使用DNAStar、TRF、Promoter predictions、tRNAscan-SE、Glimmer、BLAST软件分别对33D基因组进行分析.结果 噬菌体33D基因组为线性双链DNA,全长50036bp;含有84个推定基因,17个已知功能的基因.其中噬菌体DNA复制相关基因:gene6、7、8、9和gene 14;裂解酶基因:gene 47和gene 48.结论 噬菌体33D为烈性噬菌体,具有抗结核潜力,未发现致病基因,可作为“鸡尾酒疗法”的候选噬菌体.

《科技日报》纽约电,据最新一期《自然·医学》报道,美英两国联合医疗团队利用3种基因改造病毒(噬菌体)组成的鸡尾酒疗法,将一名患有抗生素耐药性感染的英国少女从死亡边缘拉了回来.现年17岁的英国少女伊莎贝尔·霍萨威患有囊性纤维化遗传疾病.至2017年夏天,其肺部功能仅剩下正常人的1/3.在接受肺部移植手术后,差点死于顽固性感染.在英国大奥蒙德街医院治疗9个月依然不见好转后,医生认为其术后生存率不足1%.医生联系了美国匹兹堡大学霍华德休斯医学研究所的分子遗传学家格雷厄姆·哈特富尔教授.他们合作开发出一种使用3种噬菌体的鸡尾酒疗法,最终使伊莎贝尔奇迹般地康复,并重返学校.鸡尾酒疗法使用的这些噬菌体是专门用于攻击和杀死细菌的病毒.科学家从匹兹堡大学保存的超过15 000个库存噬菌体中选出3个特定噬菌体,并对其中两个进行了基因工程改造,使其能更好地攻击细菌.2018年6月,在经过安全性测试后,研究团队开始每天两次将噬箘体混合物注射入伊莎贝尔的血液中并涂抹在她的皮肤上.治疗取得了令人难以置信的成功,6周后,伊莎贝尔的肝脏扫描显示感染基本消失,皮肤溃烂病变也大幅消除.目前,她的治疗团队正计划添加第4个噬菌体以试图完全清除她的感染.值得注意的是,转基因病毒治疗对伊莎贝尔几乎没有产生不良反应.哈特富尔教授表示:"我们没想到能将这些噬菌体用于实际的治疗之中,这是一个很好的结果."由于伊莎贝尔的个性化治疗方案不是临床试验的一部分,因此目前还无法得知此类治疗对其他人的治疗效果如何.毕竟,要为每位患者找到合适特定的噬菌体是一项巨大的挑战.

美洲幼虫腐臭病是西方蜜蜂中最严重的细菌病之一,给养蜂业带来了严重的损失.幼虫芽胞杆菌是幼蜂感染美洲幼虫腐臭病的病原菌.由于抗生素产生的耐药性越来越严重,并且抗生素的使用会破坏宿主肠道菌群,使蜂群处于高危的环境中,因此迫切需要抗生素治疗的替代技术,而噬菌体在预防和控制细菌耐药性方面已显示出显著的优势.主要综述了噬菌体疗法、安全性及其在蜜蜂美洲幼虫腐臭病中的研究现状,介绍了噬菌体疗法在各类细菌病中的研究与应用,对今后噬菌体治疗蜜蜂细菌病研究方向进行了展望.

变异链球菌作为主要致龋病原菌之一,其在牙菌斑生物膜中的过度增殖,是龋病发生发展的重要原因.细菌病毒——噬菌体可特异性感染细菌并有效降解细菌生物膜,因此变异链球菌噬菌体可能用于防治龋病.基于噬菌体的疗法已在多个领域进行临床应用,但变异链球菌噬菌体在龋病中的应用仍处于探索阶段.本文对变异链球菌噬菌体在龋病防治方面的应用进行综述,旨在为龋病的临床预防工作提供新的思路.文献复习结果表明,活噬菌体制剂具有特异性强、亲和力高以及安全性良好的优点,但由于其结构较不稳定,可以通过冻干、喷雾干燥、添加稳定性增强剂等方式,或将噬菌体并入软膏、可生物降解聚合物基质或微粒中加工成较稳定的制剂,在一定程度上提高稳定性;噬菌体产生的裂解酶可以消化细菌细胞壁,从而释放组装好的噬菌体颗粒,其在裂解生物膜中也同样表现优异;通过噬菌体展示技术筛选出针对致龋病原体的抗原结合片段库,利用抗原结合片段的被动免疫也可达到防治龋病的目的.然而,噬菌体的宿主范围狭窄,因此在临床龋病防治工作中可以通过噬菌体联合传统治疗或其他药物使用,或使用多种噬菌体的鸡尾酒治疗.