本实验富集大血藤多酚组分并对其进行含量测定和化学表征,丰富该药材的物质研究基础,初步分析多酚化合物体外抗氧化活性作用,为后续研究提供理论基础.采用紫外可见分光光度计确定最大吸收波长并测定总多酚含量,采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪对其进行化学表征,利用DPPH法和ABTS法评价大血藤总多酚的体外抗氧化活性.结果显示优化Folin-Ciocalte法最大吸收波长为740 nm,大血藤总多酚含量约为32.34％;通过高分辨质谱检测到大血藤中多酚类成分有62个,包括28个酚酸和酚苷类成分、13个木脂素类成分、12个苯丙素类成分、9个黄酮类成分;提取物对DPPH和ABTS自由基都具有清除作用,IC50值分别为4.88 μg/mL、16.68 μg/mL.该研究从大血藤提取物中检测到62个多酚类成分,抗氧化活性与其密切相关,深入研究了大血藤多酚组分,为该药的进一步发展提供理论基础.

为客观准确地评价不同产地茯砖茶感官特征品质,结合感官审评、化学组分检测、化学计量学等研究茯砖茶感官品质特征及不同产地茯砖茶判别模型构建.结果表明:湖南、浙江、陕西等19个茯砖茶因原料物质基础的不同其感官品质有非常明显的差异.其中,茯砖茶滋味得分(taste score,TS)与咖啡碱(caffeine,CAF)、水浸出物(water leachate,WL)、儿茶素(catechin,CAT)和表儿茶素(epicatechin,EC)呈现出显著相关性,其相关系数(P＜0.05)分别为0.81、0.62、0.55、0.50.同时,基于化学组分的主成分(PCA)表明,前4个主成分的累计方差贡献率为79.48％,并以前4个主成分的线性回归方程和贡献率构建了茯砖茶感官品质综合评价模型与产地判别模型.正交偏最小二乘法判别分析(OPLA-DA)显示,19个不同产地的茯砖茶样品被明显地划分为3组,评价模型对不同产地茯砖茶识别度较高.采用交叉验证法对模型进行验证,模型对自变量的拟合指数(R2X)为0.879,对因变量的拟合指数(R2Y)为0.992,预测指数(Q2)为0.53.经OPLS-DA共识别出6种预测变量重要性投影(VIP)值大于1的差异指标,其中茶多酚(tea polyphenols,TPP)、可溶性糖(soluble sugar,SS)、CAF、WL为茯砖茶感官特征标志性差异品质成分.结果表明,应用感官审评、化学组分检测、化学计量学等方法可以实现茯砖茶感官特征及其不同产地茯砖茶的快速、准确判别,同时也为茯砖茶感官特征及其不同产地判别提供一种新的参考方法.

本研究采用体外模拟胃肠消化模型,分析了猴头菌子实体多酚类物质(polyphenol compounds from fruiting bodies of Hericium erinaceus,HEP)在模拟胃肠道消化(gastrointestinal digestion,GD)过程中总多酚和总黄酮的含量变化规律,并对其酚酸和黄酮类物质的释放量及其体外抗氧化活性进行了比较,采用H2O2 诱导RAW 264.7 细胞氧化损伤模型,研究了HEP及其胃与肠消化产物对细胞氧化损伤的保护作用.结果表明:经胃消化的猴头菌子实体多酚类物质产物(HEP-S)与HEP相比,其总多酚和总黄酮含量分别上升了11.66%和27.33%,DPPH、ABTS和·OH自由基清除能力分别升高了 10.33%、17.52%和 2.22%.肠消化产物(HEP-I)与HEP相比,总多酚和总黄酮分别降低了 35.82%和 46.67%,DPPH、ABTS 和·OH 自由基清除能力分别降低了 60.02%、50.13%和46.43%.液质联用(UPLC-MS/MS)的检测结果显示,HEP、HEP-S和HEP-I均由18种酚酸和2种黄酮组分组成,且在HEP-S和HEP-I中均无新物质检出.但与HEP相比,HEP-S和HEP-I中酚酸和黄酮组分的具体含量会存在明显差异.与化学抗氧化结果不同的是,与 HEP相比,HEP-S对 H2O2诱导的RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用不显著(P＜0.05),而HEP-I对RAW 264.7细胞氧化的保护作用显著升高.

以金观音茶鲜叶为研究对象,通过不同水浴条件下静态顶空固相微萃取方式提取茶青香气挥发物,并利用气相色谱质谱法对香气组分进行半定量分析,在不同水浴温度下同时测定脂氧合酶、β-葡萄糖苷酶和多酚氧化酶等酶促反应活力.结果表明:茶青香味主要由花香、果香、木香和青香组成,花香气味在茶青不同萃取温度过程中对其香味的贡献均超过其他类型气味;茶青产香酶促反应最适温度区间在40～60℃;在萃取茶青香气挥发物过程中,大部分花香型挥发物气味在60℃以上具有较高活性,且具有高温高活性度的特点,木香型和青香型挥发物气味活性度分别具有高温高活性和低温高活性的特点;从不同香型挥发性化合物对茶青香味形成贡献上看,(E)-β-紫罗兰酮、柠檬烯、L-α-蒎烯分别对茶青花香味、果香味和木香味具有重要贡献,青香味起主要作用的物质为(Z)-3-己烯醇和(E)-2-己烯醛.本研究对茶叶做青阶段不同香气型态建成上具有一定参考意义.

为了评价药用植物海南槌果藤的抗氧化活性及抑菌活性,本实验通过气相色谱与质谱联用技术(Gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析鉴定了海南槌果藤叶片甲醇提取物的化学成分,采用紫外-可见分光光度法测定了海南槌果藤甲醇提取物的总多酚、总黄酮含量、DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除作用;以及槌果藤氯仿相萃取物对三种食源性致病细菌和六种植物病原真菌的抑制作用.实验结果表明:海南槌果藤叶片甲醇提取物中含量最多的是酯类(45.03％)和杂环类(33.74％),其中丁基4-庚烷基-邻苯二甲酸酯(20.58％)为主要的单组分物质.海南槌果藤甲醇提取物中总多酚含量为1.93％,总黄酮含量为2.3％;进一步研究表明海南槌果藤甲醇提取物对DPPH自由基和ABTS自由基有一定的清除能力,其IC50分别为0.454 mg/mL和0.297 mg/mL;而对羟基自由基和超氧阴离子有较强的清除能力,IC50分别为0.937、2.261 mg/mL,分别比芦丁和TBHQ标准品低.除此之外,海南槌果藤氯仿相萃取物对三种食源性致病细菌和六种植物病原真菌均有一定的抑制作用,其中对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和铜绿假单胞菌)抑制效果较明显;同时对葡萄溃疡病菌抑制作用最强,抑制率为43.97％,其次是新暗色柱节孢,抑制率为37.5％.

目的 优选大孔树脂分离纯化马黛茶中多酚类物质组分最佳工艺条件.方法 采用高效液相色谱法建立马黛茶指纹图谱,以绿原酸和高效液相色谱指纹图谱共有峰的总有效成分洗脱率为指标,筛选最佳型号树脂、上样条件和洗脱条件.结果 以D101型大孔树脂为分离载体,样品液浓度为0.10 g?mL-1,树脂吸附量为生药1.5 g?g-1,先用4倍量水洗脱除杂质,再用4倍量70％乙醇梯度洗脱,纯化后提取物对绿原酸的洗脱率达82.83％,对总有效成分的洗脱率72.48％,高效液相色谱指纹图谱相似度大于0.98,成分均衡回收.结论 D101型大孔树脂纯化马黛茶中多酚类物质组的工艺简便可靠,可用于规模化生产.

目的 研究叶下珠的抗补体活性及活性成分.方法以活性筛选跟踪为向导,利用溶剂萃取和色谱方法对叶下珠提取物进行分离纯化,采用13C-NMR波谱法结合文献数据鉴定化合物结构,测定其抑制补体的活性及可能的机制.结果 筛选出叶下珠醇提取物的乙酸乙酯部位为抗补体活性部位,从中分离得到2个抗补体活性成分,经鉴定为柯里拉京和鞣花酸.乙酸乙酯部位和2个化合物均明显抑制补体经典途径的溶血活性,其IC50分别为53.77、176.54、102.23 mg ·L-1,但对补体旁路途径溶血的抑制作用不明显.进一步研究表明,乙酸乙酯部位和2个化合物干扰了补体经典途径成分C1、C2、C4形成C3转化酶.结论 叶下珠的多酚组分是其主要的抗补体活性成分,其机制与这些组分影响经典途径C3转化酶的形成有关.

植物多酚类物质是森林凋落物中的重要组分,其含量的多寡在一定程度上决定了凋落物的分解速率.然而,凋落物分解过程中多酚类物质的降解动态仍不十分清楚.因此,以四川盆地亚热带常绿阔叶林最具代表性的3个针叶树种马尾松(Pinus massoniana)、柳杉(Cryptomeria fortunei)、杉木(Cunninghamia lanceolata)和3个阔叶树种香樟(Cinnamomum camphora)、红椿(Toona ciliata)、麻栎(Quercus acutissima)凋落叶为对象,采用凋落物分解袋法,研究了6种凋落叶多酚类物质在第一年不同降雨期间的降解特征.结果表明:自微量降雨期起至雨季前期止,6种凋落叶多酚类物质具有一致的降解动态,降解率均表现为随着降水量的增加而增加;自雨季后期之后,多酚类物质含量均处于稳定状态.第一个分解年,6种凋落叶多酚类物质降解率大小顺序依次为:红椿(100％)＞柳杉(97.81％)＞杉木(94.45％)＞麻栎(93.67％)＞马尾松(93.06％)＞香樟(91.64％).分解初期旱季两时期(微量降雨期和春季少雨期),6种凋落叶多酚类物质均有较大的降解量,其降解率占全年降解率的42.16％-71.20％.并且,除香樟以外的5种凋落叶多酚类物质大量降解释放发生在雨季前期,占全年降解率的44.46％-55.72％.此外,凋落叶多酚类物质初始含量与其降解率呈显著的二次函数关系.可见,降雨是湿润亚热带常绿阔叶林区凋落物多酚类物质降解的关键驱动因子之一,树种组成是影响凋落物多酚类物质降解的内部因素.

该研究采用分光光度法和高效液相色谱法,分不同叶位对秃房茶(Camellia gymnogyna)的嘌呤生物碱组成特点以及茶多酚、儿茶素组分、游离氨基酸、黄酮、茶氨酸等生化品质成分进行了测定.结果表明:秃房茶的嘌呤生物碱组成及配比显著区别于茶叶植物凤凰单从(C. sinensis),同时具有可可碱、咖啡碱和苦茶碱三种组分,而且可可碱含量最多,为13.46~39.72 mg·g-1,咖啡碱含量最低,为0.51~2.02 mg·g-1,苦茶碱含量介于两者中间并随芽叶成熟度增加而升高.茶叶植物只存在咖啡碱和可可碱,含量变化分别为22.22~53.13 mg·g-1和0.47~12.82 mg·g-1.在相同叶位中,秃房茶儿茶素组分含量变化规律为EGCG>C>ECG>EGC>EC>GC>CG>GCG,且儿茶素总量、酯型儿茶素含量均低于茶叶植物,而非酯型儿茶素总量接近,保持为40~50 mg·g-1.除黄酮含量在各叶位变化趋势不大外,其他品质成分含量变化基本符合第1叶>芽>第2叶>第3叶>第4叶,一芽二叶的含量介于第1叶和第2叶之间的规律,而茶多酚、黄酮、茶氨酸等其它品质成分含量均低于茶叶植物.该研究首次明确了秃房茶主要生化品质成分变化规律,特别是嘌呤生物碱的组成及配比特点,且含有特征性成分—苦茶碱.该研究结果为生物碱代谢机理、特异茶加工、功能成分开发、低咖啡碱资源、选育种等提供了优良材料.

目的 分离葡萄不同组分并重组构建功能囊泡,考察其装载多肽类药物的性能.方法 采用乙醇为溶剂提取葡萄多酚(GP),通过单因素和正交试验优化GP的提取工艺.大孔树脂吸附法纯化GP.正交试验考察蜂毒肽(Mel)与GP的复合条件,制备纳米复合物(GPMC).蔗糖密度梯度离心法提取葡萄囊泡(GDVs),用于装载优化的GPMC,得到GPMC-GDVs.考察GPMC-GDVs在PBS、DMEM、10％ FBS中的稳定性.MTT法评价其对SMMC-7721及HepG2细胞的毒性.结果 优化的GP提取工艺:60％乙醇为提取溶剂,料液比1∶10,提取温度50℃,提取50 min,提取2次.GP纯化条件:4 mg/mLGP粗提物上样7 BV(树脂床体积),水洗5 BV,60％乙醇洗脱5 BV.GPMC-GDVs制备工艺:室温下,将0.4 mg/mL GDVs缓慢滴入等体积含Mel质量浓度为2 mg/mL的GPMC溶液中,孵育30 min.制备的GPMC-GDVs在PBS、DMEM、10％ FBS中稳定性良好.MTT结果显示,GPMC-GDVs具有明显的肿瘤抑制作用.结论 通过对GP与GDVs组分的分离重组,可制备含药囊泡,并能用于活性多肽的装载,在多肽类药物递送和抗肿瘤领域具有较好的应用前景.