目的:调查青海省内流通的砖茶品种、产地、氟含量，以及人群砖茶饮用情况，为实施饮茶型地方性氟中毒（简称地氟病）控制措施提供依据。方法:2019年4 - 11月，根据历史资料，对青海省39个县（市、区，简称县）有饮用砖茶习惯的3 066个行政村，每个村抽取10户家庭，调查每户家庭人口学资料及砖茶饮用情况，采集砖茶样本测定氟含量，计算> 16岁人口日人均茶氟摄入量。结果:共采集砖茶样本31 067份，以茯砖为主，占全部砖茶的89.97%（27 952/31 067），康砖占5.12%（1 592/31 067），青砖占2.29%（710/31 067），黑砖占1.85%（574/31 067），金尖、花砖、黑毛等其他砖茶占0.77%（239/31 067）。全省居民饮用的砖茶来自523种品牌，其中产地为湖南省的品牌有410种，产地为四川省的品牌有26种，产地为湖北省的品牌有11种，产地为河南等其他省份的品牌共有76种。砖茶氟含量均值为646.1 mg/kg，范围为40.0 ~ 2 295.0 mg/kg，氟含量≤300 mg/kg的砖茶占全部样本的7.80%（2 422/31 067）；全省> 16岁人口年人均砖茶消耗量为1.09（0.35 ~ 7.40）kg，日人均茶氟摄入量为1.93（0.39 ~ 18.64）mg；日人均茶氟摄入量超过国家标准（3.5 mg）的有15个县、486个行政村。结论:青海省流通的砖茶以茯砖为主，氟含量较高，对人群危害严重，应尽快采取有效防控措施。

目的:掌握青海省饮茶型地方性氟中毒（简称地氟病）的流行情况。方法:2019年，在青海省8个市（州）有饮用砖茶习惯的县（市、区，简称县），以村为单位开展饮茶型地氟病调查。每个村抽取10户家庭，入户调查每户家庭人口学资料及砖茶饮用情况，采集居民饮用水和砖茶测定氟含量，计算日人均茶氟摄入量；对25岁以上成人进行氟骨症检查；对所有8 ~ 12岁儿童进行氟斑牙检查。水氟、茶氟含量检测采用离子选择电极法；氟骨症诊断采用《地方性氟骨症诊断标准》（WS 192-2008）；氟斑牙诊断采用《氟斑牙诊断》（WS/T 208-2011）标准。结果:共采集生活饮用水3 602份，水氟含量均值为0.31 mg/L，范围为0.20 ~ 1.00 mg/L。采集砖茶31 067份，茶氟含量几何均值为646 mg/kg，范围为40 ~ 2 295 mg/kg，茶氟含量≤300 mg/kg的砖茶占全部样本的7.80%（2 422/31 067）；饮用茯砖茶的人群占89.97%（27 952/31 067）；日人均茶氟摄入量为1.93 mg，其中果洛、玉树、海南州日人均茶氟摄入量均超过我国日人均总摄氟量卫生标准（3.50 mg）。成人X线氟骨症检出率为0.16%（2 357/1 484 907），其中玉树州最高，为29.23%（592/2 025）；其次是果洛州，为8.21%（771/9 393）。儿童氟斑牙检出率为4.79%（8 076/168 623），其中玉树州最高，为32.61%（1 562/4 790）。结论:青海省饮茶型地氟病流行于全省，有明显的地域性，覆盖人口众多，玉树、果洛州流行相对较重。

目的 了解阿坝藏族羌族自治州(以下简称"阿坝州")饮茶型地氟病流行现状,动态评价病区人群饮茶型地氟病流行趋势,及时掌握病区居民户合格砖茶普及情况,为采取针对性干预措施提供科学依据.方法 2020-2022年在阿坝州11个饮茶型地氟病病区,按照东、西、南、北、中5个方位各随机抽取1个病区乡/镇,在抽取的乡/镇中随机抽取1个病区村为监测点,开展饮用水氟含量和家庭饮用砖茶情况调查,并对当地8～12周岁儿童氟斑牙和25周岁以上成人氟骨症进行检查,所得数据采用SPSS 27.0软件进行统计分析,率的比较采用x2检验,检验水准为α=0.05.结果 11个县未发现水氟含量超标;砖茶品种主要以茯砖(28.06％)和康砖(24.85％)为主,其次为马茶(22.31％)和其他(20.44％);共采集砖茶1497份,氟含量中位数为582.27 mg/kg(P25、P75分别为777.25 mg/kg、981.00 mg/kg),氟含量合格140份(合格率为9.35％);常住人口日均茶氟摄入量2.40 mg;8～12儿童氟斑牙检出率在4.51％～5.71％,平均检出率5.08％;2021年和2022年成人氟骨症检出率分别为19.80％和22.50％.结论 阿坝州11个饮茶型地氟病病区砖茶氟含量超标,病情呈现儿童氟斑牙检出率低,成人氟骨症检出率高的特点,饮茶型地氟病流行于阿坝州.应持续加强阿坝州饮茶型地氟病的防治工作,同时建立健全低氟砖茶生产供应机制,加大健康教育力度,有效控制饮茶型地氟病危害.

为客观准确地评价不同产地茯砖茶感官特征品质,结合感官审评、化学组分检测、化学计量学等研究茯砖茶感官品质特征及不同产地茯砖茶判别模型构建.结果表明:湖南、浙江、陕西等19个茯砖茶因原料物质基础的不同其感官品质有非常明显的差异.其中,茯砖茶滋味得分(taste score,TS)与咖啡碱(caffeine,CAF)、水浸出物(water leachate,WL)、儿茶素(catechin,CAT)和表儿茶素(epicatechin,EC)呈现出显著相关性,其相关系数(P＜0.05)分别为0.81、0.62、0.55、0.50.同时,基于化学组分的主成分(PCA)表明,前4个主成分的累计方差贡献率为79.48％,并以前4个主成分的线性回归方程和贡献率构建了茯砖茶感官品质综合评价模型与产地判别模型.正交偏最小二乘法判别分析(OPLA-DA)显示,19个不同产地的茯砖茶样品被明显地划分为3组,评价模型对不同产地茯砖茶识别度较高.采用交叉验证法对模型进行验证,模型对自变量的拟合指数(R2X)为0.879,对因变量的拟合指数(R2Y)为0.992,预测指数(Q2)为0.53.经OPLS-DA共识别出6种预测变量重要性投影(VIP)值大于1的差异指标,其中茶多酚(tea polyphenols,TPP)、可溶性糖(soluble sugar,SS)、CAF、WL为茯砖茶感官特征标志性差异品质成分.结果表明,应用感官审评、化学组分检测、化学计量学等方法可以实现茯砖茶感官特征及其不同产地茯砖茶的快速、准确判别,同时也为茯砖茶感官特征及其不同产地判别提供一种新的参考方法.

[背景]冠突散囊菌LYEC03 是从陕西泾阳茯砖茶中分离得到的主要发酵菌株.[目的]研究冠突散囊菌LYEC03 菌株的基因组信息及其发酵枇杷花产品的特性,从分子水平阐明冠突散囊菌的发酵机制.[方法]应用形态和显微形态观察、ITS序列鉴定、重测序及框架图测序对所分离的菌株LYEC03 进行鉴定和基因组信息解析,采用所分离的菌株LYEC03 发酵枇杷花,研究冠突散囊菌对枇杷花主要功效成分及抗氧化性能的影响.[结果]陕西泾阳茯砖茶中分离得到的主要发酵菌株LYEC03 确定为冠突散囊菌.菌株LYEC03 与参考基因组覆盖率高,含有丰富的纤维素酶、蛋白酶、氧化酶和脂肪酶相关基因;基因组相关整体变异较小,其中假设蛋白、碳水化合物激酶、纤维素酶家族糖基水解酶、位点 2 蛋白酶家族蛋白、多酚氧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶等与菌株生长、能量代谢调节、产纤维酶、产蛋白酶和产氧化酶相关的基因发生了变异.菌株LYEC03 基因组序列长度30 623 602 bp、GC含量 51.70%、编码 13 033 个基因、编码基因占比 55.74%,参与了碳水化合物代谢、氨基酸代谢、外源生物降解代谢、能量代谢、脂质代谢与萜类化合物和聚酮类化合物的代谢等多种物质的代谢途径转化过程.菌株LYEC03 生长、主要功效成分含量的变化与总抗氧化活性、2,2-二苯基-1-苦基肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazine,DPPH)自由基清除率和羟自由基清除率 3 个抗氧化指标变化一致,均呈现先增加后缓慢降低的趋势.[结论]冠突散囊菌的发酵特性与其基因组纤维素酶、蛋白酶和氧化酶基因的含量丰富密切相关,对冠突散囊菌的基因组信息分析及其发酵特性研究有利于其发酵产品性能的提升,并为其在食品、轻工业及医药等方面的应用提供科学依据.

目的 研究茯砖茶对载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠肝组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的影响,探讨其抑制非酒精性脂肪肝(NAFLD)形成的作用机理.方法 将 50 只ApoE-/-小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组和茯砖茶高、中、低剂量组(2.16、1.44、0.72 g/kg),每组10 只,高脂饲料连续喂养17 周并同时予以相应药物灌胃干预;另取8周龄C57BL/6J野生小鼠作为空白组,普通饲料喂养 17 周并予以生理盐水灌胃干预.给药结束后,取肝脏行HE染色观察组织病理变化,采用RT-qPCR法检测小鼠肝组织Toll样受体 4(TLR4)、髓样分化因子 88(MyD88)、核因子Kappa B(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-β)、脂肪酸合成酶(FAS)mRNA表达.结果 模型组小鼠肉眼可见肝脏体积增大,边缘变钝,呈黄色油腻感,镜下可见大小不等的脂肪空泡形成,证实模型制备成功;茯砖茶高、中剂量组小鼠脂肪变性程度轻于模型组,茯砖茶各剂量组小鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB、IL-β、FAS mRNA表达低于模型组(P<0.05).结论 茯砖茶可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路来达到预防NAFLD形成的作用.

冠突曲霉是茯砖茶发花阶段的主要微生物,其在NaCl作为渗透压调节下分别进入有性产孢和无性产孢两个不同的世代,为了考查钙信号途径在其特殊产孢过程中的作用,通过克隆冠突曲霉钙信号调控的关键基因钙调素cam基因,并对这一基因进行结构和表达分析.结果表示:冠突曲霉中的cam基因全长924 bp,开放阅读框为450 bp,含6个内含子,预测编码149个氨基酸.cam参与了冠突曲霉的产孢及盐压力响应过程,cam基因对其无性发育产生正调控.实验结果为钙信号调控丝状真菌盐压力应答下的产孢机制研究奠定基础.

茯砖茶是一种紧压黑茶,冠突曲霉是茯砖茶发花阶段的主要微生物,其有性发育产生闭囊壳又名“金花菌”,其数量和质量常用来判断茯砖茶的品质好坏.冠突曲霉可以用NaCl来控制其产有性孢子及无性孢子,为了研究这一特殊产孢机理,及钙信号和液泡在这产孢过程中的作用.通过克隆冠突曲霉钙信号途径中的液泡上钙氢交换子vcx基因,并对这一基因进行结构和表达分析.结果表示:冠突曲霉中的vcx基因编码区1 326 bp,不含内含子,预测编码441个氨基酸,不含信号肽,是一个疏水蛋白,含有11个跨膜结构,符合钙氢交换蛋白的基本结构.通过对其在冠突曲霉的有性、无性、菌丝各生长阶段的表达量进行测定,结果显示:vcx基因对其发育产生正调控,可能参与了冠突曲霉的无性产孢及盐压力响应过程.实验结果不仅为该蛋白的后续研究提供了条件,而且为钙信号调控丝状真菌在盐压力应答下的产孢机制奠定基础.

目的 研究颗粒型黑茶的降血糖降血脂作用,并与茯砖茶作比较.方法 茶经煮沸、过滤、浓缩,得浓缩液;建立四氧嘧啶糖尿病小鼠模型和高脂饲料高血脂大鼠模型,将实验动物分组灌胃,考察样品对各组小鼠血糖的影响,及测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并记录实验动物的体重变化.结果 颗粒型黑茶能显著降低小鼠的血糖含量,降低大鼠血清TC、TG、LDL-C的水平,提高HDL-C水平,同时发现,颗粒型黑茶可控制小鼠及大鼠体重增长,效果明显,其总体效果优于茯砖茶.结论 颗粒型黑茶有降血糖降血脂的功效,同时兼具减肥作用.

目的 分离鉴定泾阳茯砖茶中的金花菌,探讨其发酵产物的抗氧化酶活性.方法 采用涂布平板法分离纯化泾阳茯砖茶中的“金花菌”,通过其ITS序列分析进行分子鉴定.利用抗氧化酶试剂盒测定不同时期“金花菌”发酵液的抗氧化酶活性.结果 从茶叶中分离出1株“金花菌”J17,通过ITS序列分析初步确定其为赤散囊菌(Eurotium rubrum).在J17菌株发酵后第1、7、10、14和21天,其发酵液中过氧化物酶(POD)活性(U/mL)分别为0.22±0.11、1.22±0.13、2.46±1.64、7.35±2.77和45.19±1.54;过氧化氢酶(CAT)活性(U/mL)分别为0.06±0.00、0.45±0.00、1.52±0.20、2.35±0.20和2.75±0.37;总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性(U/mL)分别为25.55±10.12、50.90士3.72、76.77±6.75、89.07±3.33和36.34±12.32.发酵14 d左右,3种抗氧化酶活性均较高,与茶砖在发花车间的发花时间一致.茯砖茶沸水冲泡液和沸水冲洗液中POD和CAT活性差异无统计学意义,而沸水冲泡液的T-SOD活性显著高于沸水冲洗液.结论 泾阳茯砖茶的抗氧化酶活性与茶砖发花期产生的赤散囊菌有关,泾阳茯砖茶适用于热水冲泡或煮沸后饮用.