目的:探寻乳脂球-表皮生长因子8(MFG-E8)在脑缺血后小胶质细胞极化的调控作用和作用机制。方法:选取C57BL/6小鼠40只，采用随机数字表法将其为假手术组、缺血组、重组小鼠乳脂球-表皮生长因子8(rmMFG-E8)组和rmMFG-E8+科利维林(Colivelin TFA)组，每组10只小鼠。缺血组、重组小鼠乳脂球-表皮生长因子8(rmMFG-E8)组和rmMFG-E8+科利维林(Colivelin TFA)组制作大脑中动脉梗阻再灌注模型(tMCAO)，其中rmMFG-E8组和rmMFG-E8+Colivelin TFA组小鼠在造模成功后立即进行脑梗侧侧脑室立体定位注射，分别给予总量2 μl，浓度0.4 μg/μl的rmMFG-E8和总量2 μl，浓度0.4 μg/μl的rmMFG-E8+总量2 μl，浓度5 pmol/μl的Colivelin TFA干预。造模成功1、3、5、7 d后采用行为学实验检测神经功能恢复情况，造模成功7 d后采用组织染色观察脑梗死灶体积比例，通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测小胶质细胞M1极化标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2极化标记物精氨酸酶1(Arg1)和小鼠类几丁质酶3样分子(Ym1)、MFG-E8的基因表达水平，通过免疫印迹实验检测MFG-E8、磷酸化信号转导与转录因子3(p-STAT3)和细胞因子信号传导抑制因子-3(SOCS3)蛋白表达水平。结果:行为学检测发现，缺血组、rmMFG-E8组和rmMFG-E8+Colivelin TFA组在造模成功1、3、5、7 d后的转棒时间和mNSS评分与假手术组同时间点比较，差异均有统计学意义( P<0.05)。造模成功7 d后，与假手术组比较，缺血组MFG-E8基因和蛋白表达均显著降低( P<0.05)，M1极化标记物iNOS基因的表达显著增高( P<0.05)，M2极化标记物Arg1和Ym1基因的表达显著下降( P<0.05)，p-STAT3/STAT3蛋白的表达显著上调( P<0.05)，SOCS3/GAPDH蛋白的表达显著下调( P<0.05)。造模成功7 d后，与缺血组比较，rmMFG-E8组的梗死灶体积显著缩小( P<0.05)。造模成功7 d后，rmMFG-E8+Colivelin TFA组iNOS基因的表达较rmMFG-E8组明显增加( P<0.05)，Arg1和Ym1基因的表达明显降低( P<0.05)，p-STAT3/STAT3的表达显著上调( P<0.05)，SOCS3/GAPDH的表达显著下降( P<0.05)。 结论:MFG-E8可通过STAT3信号通路促进脑缺血后小胶质细胞向M2型极化，促进脑缺血小鼠神经功能的恢复。

目的 探讨核转录因子E2相关因子2(Nrf2)在脑缺血再灌注大鼠脑组织中的表达及其对缺血再灌注所引起的炎症反应及神经胶质细胞活化标志物表达的影响.方法 30只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为正常组、假手术组、卒中梗阻侧组、卒中梗阻对侧组、N rf 2激动剂组及空白溶剂组,每组5只.正常组大鼠不给予任何干预措施,假手术组大鼠行皮肤切开缝合术,卒中梗阻侧组、卒中梗阻对侧组、N rf 2激动剂组、空白溶剂组大鼠行大脑中动脉栓塞术制备缺血性脑卒中模型.造模手术后Nrf 2激动剂组、空白溶剂组大鼠分别经尾静脉注射0.1 mL特丁基对苯二酚和0.1 mL生理盐水.手术后3 d取大鼠脑组织,采用Western blot法检测正常组、假手术组、卒中梗阻侧组、卒中梗阻对侧组大鼠脑组织中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和干扰素(IFN)蛋白的表达,检测假手术组、卒中梗阻侧组和N rf 2激动剂组大鼠脑组织中N rf 2蛋白表达,检测正常组、假手术组、卒中梗阻侧组、N rf 2激动剂组、空白溶剂组大鼠脑组织中IL-6、IFN、小胶质细胞活化标志物离子钙结合衔接分子1(Iba-1)、星形胶质细胞活化标志物胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 假手术组、卒中梗阻对侧组及正常组大鼠脑组织中IFN、IL-6蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),卒中梗阻侧组大鼠脑组织中IFN、IL-6蛋白表达高于正常组、假手术组和卒中梗阻对侧组(P<0.05).卒中梗阻侧组大鼠脑组织中Nrf 2蛋白表达高于假手术组(P<0.05),Nrf 2激动剂组大鼠脑组织中Nrf 2蛋白表达高于假手术组、卒中梗阻侧组(P<0.05).正常组、假手术组及Nrf 2激动剂组大鼠脑组织中IFN、IL-6、Iba-1、GFAP蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05),卒中梗阻侧组与空白溶剂组大鼠脑组织中IFN、IL-6、Iba-1、GFAP蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05),正常组、假手术组及Nrf 2激动剂组大鼠脑组织中IFN、IL-6、Iba-1、GFAP蛋白表达低于卒中梗阻侧组、空白溶剂组(P<0.05).结论 脑缺血再灌注可诱导中枢神经系统发生炎症反应,Nrf 2在脑缺血再灌注大鼠脑组织中表达上调,Nrf 2过表达可通过激活Nrf 2/ARE通路而抑制神经胶质细胞活化标志物的表达,降低炎症反应水平,改善脑组织缺血再灌注损伤.

目的 研究山茱萸环烯醚萜苷(cornel iridoid glycoside,CIG)对大脑中动脉梗阻(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠大脑皮质线粒体损伤的作用,探讨CIG对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法 采用线栓法制备大鼠MCAO模型,缺血2 h后复灌,采用数字表法将大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,CIG低、高剂量(60、120 mg/kg)给药组,阳性对照药银杏叶片组,于复灌6 h后开始灌胃给药,每日1次,连续给药7 d.采用神经功能缺损症状评分(Modified Neurological Severity Scores,mNSS)评价各组大鼠神经功能情况,透射电镜观察损伤侧皮质部位线粒体超微结构,Western blotting法检测线粒体功能相关的蛋白NIX、Beclin1、DRP1、OPA1和PGC-1α的表达.结果 脑缺血再灌注损伤7 d后,模型组大鼠mNSS评分较假手术组大鼠显著增高,而与模型组相比,各给药组大鼠的mNSS评分明显降低.透射电镜结果显示模型组大鼠皮质线粒体损伤严重,CIG给药能明显改善线粒体结构变化.Western blotting检测结果显示,缺血再灌注损伤可显著抑制大鼠皮质组织中NIX、Beclin1、DRP1、OPA1和PGC-1α蛋白的表达,而CIG给药后均能显著改善这些蛋白的异常表达.结论 CIG通过激活线粒体自噬,促进线粒体分裂融合,增加线粒体生物合成等过程,减轻线粒体损伤,进而保护神经元,发挥较好的抗脑缺血再灌注损伤的脑保护作用.

观察马赛替尼对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用并探讨其机制.雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、马赛替尼低、中、高剂量治疗组,每组12只.线栓法制备大鼠大脑中动脉梗阻2 h后复灌模型,即刻给药,每天给药两次,连续7 d.再灌注7 d后行神经功能症状缺损评分,检测脑梗死体积及脑含水量,Western blot和PCR检测损伤周围脑组织自噬和凋亡相关蛋白和基因的表达.术后7 d,与模型组相比,各给药组大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积和脑积水均明显降低.模型组大鼠脑组织中明显上升,p62的表达明显下降.马赛替尼各组均能不同程度地下调LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、Bax等凋亡蛋白和NF-κB的表达,上调p62的表达.马赛替尼发挥神经保护作用的机制之一可能与抑制自噬和细胞凋亡通路有关.