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天山茶藨对脂肪间充质干细胞成脂成骨分化的影响
编辑人员丨5天前
目的 探究天山茶藨(Ribes meyeri)对脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)成脂成骨分化的影响.方法 对p9和p17代次的ADSCs进行成脂成骨的定向分化,通过β-半乳糖苷酶染色、荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)测定细胞中P16INK4a、P53基因表达来检测细胞衰老情况;采用CCK-8法检测天山茶藨对ADSCs的细胞毒性,并利用细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测天山茶藨对细胞内ROS含量的影响;将天山茶藨处理的衰老细胞进行成脂定向分化,年轻细胞进行成骨定向分化,并检测细胞中成脂标志基因LPL、PPARγ和成骨标志基因OCN、RUNX2、ALP的基因表达量;利用未分化、成脂成骨分化和天山茶藨处理的成脂成骨分化细胞构建加权基因共表达网络图谱(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA);对天山茶藨处理的衰老细胞成脂分化和年轻细胞成骨分化中差异表达基因进行KEGG富集.结果 p17代次较之p9代次ADSCs细胞衰老程度加重,且衰老的ADSCs更易向成脂细胞分化,年轻的ADSCs则更易向成骨细胞分化;0.1 pg/μL天山茶藨促进ADSCs的细胞增殖,1 ng/mL和100pg/mL天山茶藨降低ADSCs中ROS水平;天山茶藨抑制衰老ADSCs的成脂分化,促进年轻ADSCs的成骨分化;衰老和年轻ADSCs具有不同的基因表达模式,天山茶藨在成脂分化过程中改变衰老ADSCs的表达模式;天山茶藨对ADSCs成脂成骨分化的影响与TGF-β、精氨酸生物合成信号通路相关.结论 天山茶藨促进年轻ADSCs的成骨分化,抑制衰老ADSCs的成脂细胞.
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编辑人员丨5天前
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UPLC-MS/MS法同时测定天山茶蔗茎14个酚类成分及其降血糖活性
编辑人员丨2023/8/5
目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定天山茶藨茎14个酚类成分的含量,并测定其体外降血糖活性.方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP 18色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.7 μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,柱温为30℃;使用三重四极杆质谱仪,采用电喷雾电离源(ESI),负离子,以多反应监测模式(MRM)扫描,进行定量分析,测定其总酚、总黄酮含量及其抗糖尿病活性(α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制活性).结果:14个酚类化合物在测定的质量范围内具有良好的线性关系(R2≥0.9917),稳定性、重复性、精密度试验的RSD≤4.9％,加样回收率范围在91.0％～102.0％(RSD≤4.6％);天山茶藨茎乙酸乙酯部位的总酚、总黄酮及咖啡酸、表没食子儿茶素、表儿茶素、原儿茶酸的含量最高,分别为(965.51±6.85)mg·g-1、(162.04±8.07) mg·g-1、10452.00 μg·g-1、14924.00 μg·g-1、3922.50 μg·g-1、3546.00 μg·g-1;并表现出最好的α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制作用,IC50分别为(134.81±3.10) mg·L-1、(457.91±11.94) mg·L-1.结论:本实验建立的UPLC-MS/MS方法精确、高效、灵敏,可用于14个酚类成分的定量分析,结合降血糖活性筛选,可以为深入研究天山茶藨的化学成分和生物活性提供科学依据.
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编辑人员丨2023/8/5
