目的 研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)对缺血性脑卒中的微小RNA(microRNA,miR-NA)表达谱的影响,探讨THSWD治疗缺血性脑卒中的分子机制.方法 建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)诱导的局灶性脑缺血大鼠模型,采用单细胞RNA测序技术检测THSWD治疗后MCAO大鼠miRNA表达谱.采用GO和KEGG富集分析方法分析miRNA作用于靶基因的功能.对表达差异显著的miRNA进行RT-qPCR实验验证.结果 THSWD干预后,MCAO大鼠脑梗死区有13个miRNA表达发生变化,其中6个miRNA表达上调,7个miRNA表达下调.利用miRanda进行预测,确定了这13个miRNA的靶基因,构建了miRNA-mRNA网络,通过RT-qPCR验证了其中6个差异表达的miRNA(rno-miR-653-5 p、rno-miR-216 b-5 p、rno-miR-3547、rno-miR-217-5p、rno-miR-758-3p和rno-miR-223-3p).结论 THSWD可以通过逆转某些miRNA的异常表达来治疗缺血性脑卒中.

目的 探讨微小RNA(miR)-223对代谢相关性脂肪性肝炎(MASH)细胞模型中胆固醇(TC)代谢的作用,并进一步探讨miR-223对MASH的影响.方法 采用棕榈酸(PA)刺激LO2细胞构建MASH细胞模型,检测细胞内TC水平;转染miR-223后,检测细胞内TC水平.采用Western Blot检测TC代谢相关基因(HMGCS1、SR-BI和ABCA1)蛋白的相对表达水平;采用HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化和脂质沉积情况;采用免疫组化检测F4/80观察巨噬细胞浸润情况.结果 200 μM及400 μM PA刺激LO2细胞36 h的TC表达水平均高于同一浓度下刺激12 h和24 h,400 μM PA刺激LO2细胞36 h的TC表达水平明显高于200 μM PA刺激36h;400 μM PA刺激LO2细胞36 h的miR-223表达水平明显高于miR-NC和200 μM PA刺激36 h(P＜0.05).Western Blot检测结果显示,400 μM PA作用LO2细胞后,SR-BI和HMGCS1基因蛋白的相对表达水平均升高,ABCA1基因蛋白的相对表达水平均降低;转染miR-223后,SR-BI和HMGCS1基因蛋白的相对表达水平均降低,ABCA1基因蛋白的相对表达水平升高(P＜0.05).免疫组化结果显示,miR-223减轻高脂饮食诱导的MASH小鼠模型中的肝脏炎症及脂肪沉积.结论 miR-223通过直接或间接调控TC生物合成、摄取及排出的关键基因HMGCS1、SR-BI和ABCA1调节MASH细胞模型中TC的平衡,并进一步减轻高脂饮食诱导的MASH.

微小RNA-223(miR-223)定位于X染色体上，在进化过程中高度保守。近年来，许多研究指出miR-223在多种消化系统肿瘤如食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、结直肠癌中表达异常，其可通过多种信号通路参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭等过程，并有望成为消化系统肿瘤诊断和预后的标志物。

本研究旨在探讨血清胆碱酯酶(CHE)、C反应蛋白(CRP)，微小RNA(miR)-223三项外周血指标对腰椎骨折内固定术后细菌感染诊断价值，现报道如下。

目的:探讨单采血小板体外储存过程中其微小RNA(miRNA)的表达水平。方法:选择2022年3月至2023年5月成都市血液中心采集的15份单采血小板为研究对象。15份单采血小板采集自15例健康状况良好，符合《血站技术操作规程》(2019版)采集要求的单采血小板献血者。血小板捐献者的中位年龄为30岁(22，40岁)；男性捐献者为8例，女性为7例。将单采血小板置于恒温震荡保存箱中，温度(22±2)℃，振荡频率60 Hz条件下储存，分别于储存第1天(采集当天)、第5天和第7天的上午10点留取血小板标本3～5 mL。应用血细胞分析仪检测血小板常规指标，实验室pH计测定血小板pH值，流式细胞术(FCM)测定血小板CD62P表达水平，实时荧光定量PCR法测定miRNA-126、-145、-150、-197、-223的相对表达水平。血小板标本存储1、5、7 d时各项指标比较采用重复测量方差分析；采用Spearman相关性分析血小板miRNA表达水平与储存时间的相关性。本研究遵循的程序符合成都市血液中心伦理委员会要求[批准文号：伦审(研)2020年第04号]，并且于血小板捐献前与所有捐献者签署《献血者知情同意书》。结果:①随着储存时间延长，本组15份单采血小板标本的血小板压积(PCT)增大[储存1、5、7 d时分别为(0.68±0.21)%、(0.89±0.13)%、(0.99±0.17)%]，大血小板比例(P-LCR)上升[储存1、5、7 d时分别为(20.5±6.0)%、(26.0±3.4)%、(30.4±2.8)%]；pH值下降[储存1、5、7 d时分别为(7.2±0.1)、(7.1±0.2)、(7.0±0.2)]，并且差异均有统计学意义( F＝5.60， P＝0.007； F＝9.12， P＝0.001； F＝5.44， P＝0.004)；其余指标分别比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。②单采血小板标本储存1、5、7 d时，其CD62P表达水平分别为(6.3±2.9)%、(22.0±7.3)%和(38.4±12.1)%。随着储存时间延长，血小板标本的CD62P表达水平升高，并且差异均有统计学意义( F＝36.16， P<0.001)。③本组血小板标本随着储存时间的延长，其miRNA-126、-150、-197相对表达水平增加，而miRNA-145和-223相对表达水平下降；并且差异均有统计学意义( F＝88.58、32.64、33.59、35.42、22.91，均 P<0.001)。④本组单采血小板标本的储存时间与其miRNA-126、-150和-197的表达水平呈正相关( r＝0.811、0.812、0.856，均 P<0.001)，而与miRNA-145和-223的表达水平呈负相关( r＝－0.720、－0.767，均 P<0.001)。 结论:单采血小板在体外储存过程中，其miRNA-126、-145、-150、-197和-223表达水平发生明显变化，尤其是miRNA197。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-223-3p靶向叉头框转录因子1(FoxO1)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响并探讨其分子机制。方法:采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常乳腺细胞HBL-100(购自中国医学科学院细胞库)和乳腺癌细胞MCF-7(购自中国科学院细胞库)细胞中miR-223-3p的表达；采用脂质体转染miR-223-3p模拟物、抑制剂和对照质粒于MCF-7细胞。采用荧光定量PCR检测转染miR-223-3p模拟物、抑制剂和对照质粒的细胞中miR-223-3p表达水平。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定细胞细胞增殖。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)法检测不同处理的细胞凋亡率。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-223-3p的靶基因。采用蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-223-3p靶基因蛋白质表达。组间数据比较采用 t检验。 结果:与正常乳腺细胞miR-223-3p表达水平(1.09±0.14)比较，乳腺癌MCF-7细胞mRNA-223-3p表达水平(2.37±0.19)显著增加，差异有统计学意义( t＝3.281， P<0.05)。转染72 h，转染miR-223-3p模拟物的细胞miR-223-3p表达水平(2.89±0.20)较转染对照质粒的细胞(0.97±0.19)显著增加，差异有统计学意义( t＝2.619， P<0.05)。转染miR-223-3p抑制剂的细胞miR-223-3p表达水平(0.33±0.12)较转染对照质粒的细胞(0.97±0.19)显著下降，差异有统计学意义( t＝3.111， P<0.05)。转染miR-223-3p抑制剂的细胞增殖能力(1.09±0.20)较转染对照质粒的细胞增殖能力(1.94±0.27)明显下降，差异有统计学意义( t＝2.891， P<0.05)。转染miR-223-3p抑制剂的细胞凋亡率[(32.69±5.81)%]较转染对照质粒的细胞凋亡率[(5.04±1.47)%]明显增加，差异有统计学意义( t＝3.001， P<0.05)。FoxO1是miR-223-3p的靶基因。转染miR-223-3p抑制剂的细胞FoxO1蛋白表达水平(2.60±0.22)较转染对照质粒的细胞(0.58±0.19)明显升高，差异有统计学意义( t＝3.185， P<0.05)。 结论:miR-223通过靶向FoxO1蛋白调控着乳腺癌细胞的增殖和凋亡。

目的:探索多囊卵巢综合征(PCOS)患者痰湿证的特征性生物标志物，为中医证候诊断的标准化提供理论依据。方法:采用队列研究的方法，收集2018年1月至2019年1月期间在山东中医药大学附属医院行体外受精（IVF）助孕治疗，年龄在20~37岁之间的不孕症患者。将患者分为对照组（A组，20例）、PCOS痰湿组（B组，20例）、PCOS非痰湿组（C组，20例）。采用qRT-PCR法检测3组患者血清、卵泡液、颗粒细胞中miR-183/200/223的表达水平，并用相关性分析评价其与痰湿证的关系。结果:血清中miR-223-3p在B组的相对表达量高于A组和C组，差异均有统计学意义（ P均<0.001），并与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈正相关（ r=0.595, P=0.04）。卵泡液中miR-223-3p在B组的相对表达量高于A组（ P<0.001）及C组（ P=0.002），差异均有统计学意义。颗粒细胞中miR-183-5p在B组的相对表达量均高于A组（ P=0.004）和C组（ P=0.012），差异均有统计学意义，并与HOMA-IR呈正相关（ r=0.732， P=0.007）；miR-200c-3p在B组的相对表达高于A组（ P=0.002）和C组（ P=0.001），差异均有统计学意义，并与HOMA-IR呈正相关（ r=0.704， P=0.016）；miR-223-3p在B组的相对表达量高于A组（ P<0.001），在C组的相对表达量也高于A组（ P=0.005），差异均有统计学意义，且在B组的相对表达量与HOMA-IR呈正相关（ r=0.547， P=0.042）； miR-223-5p在B组的相对表达量明显低于A组（ P=0.001），在C组的相对表达量也低于A组（ P<0.001），差异均有统计学意义，且B组的相对表达量与HOMA-IR呈负相关（ r=-0.671， P=0.024）。 结论:PCOS痰湿证有明显的胰岛素抵抗特征，microRNA在PCOS痰湿证患者体内表达存在显著性差异。miR-183-5p、miR-200c-3p与miR-223-5p可能成为诊断PCOS痰湿证卵巢局部的特异性生物标志物。

脊髓损伤是一种难治性疾病，给患者和社会带来沉重负担，至今尚缺乏可以精准判断脊髓损伤严重程度及预后的标志物，也没有有效的治疗手段。微小RNA(miRNA，miR)在多种疾病的诊治中显示出一定的潜力，本文拟综述其在脊髓损伤诊治上的研究进展。miRNA与脊髓损伤密切相关，可以通过多种途径调控脊髓损伤的病理生理过程，某些miRNA和脊髓损伤的严重程度有特异的相关性，某些miRNA在脊髓损伤的动物模型中显示出促进脊髓损伤恢复的能力。本文还列举了miR-124、miR-21、miR-223这3种可能对脊髓损伤诊治有帮助的miRNA。

目的:探讨通腑泄热法中药通过线粒体DNA(mtDNA)/Toll样受体9(TLR9)/微小RNA(miR)-223通路抑制肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的作用。方法:随机数字法将80只健康无特定病原体(SPF)级SD大鼠分成通路正常组(NP组)、通路激活组(AP组)、通路正常中药组(NPT组)、通路激活中药组(APT组)4组，"通路激活"指在大鼠HIRI建模麻醉后采用TLR9激活剂50 μg/只腹腔注射激活mtDNA/TLR9/miR-223通路，"通路正常"则腹腔注射对应剂量生理盐水；"中药"指手术处理前3 d以通腑泄热法中药按照5 ml/只/次剂量，每日2次给大鼠灌胃。每组20只，均建立肝脏HIRI模型，以分组要求施加不同干预后分别于再灌注后24、48 h两个时间点采集血清及肝组织标本，并进行相关生化指标、病理、蛋白质印迹法(Western blot)及聚合酶链反应(PCR)检测。采用多因素方差分析。结果:"通路激活"及"中药干预"均是术后血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)变化的影响因素。通路激活可促进术后血清中ALT、AST、LDH升高，AP组大鼠术后24 h血清ALT、AST、LDH高于NP组[ALT：(962.34±42.35) U/L比(747.33±40.04) U/L， F＝11.446， P<0.05；AST：(1 421.58±93.25) U/L比(1 041.87±48.60) U/L， F＝5.893， P<0.05；LDH：(2 312.99±95.77) U/L比(1 974.23±75.80) U/L， F＝5.019， P<0.05]；而中药干预可抑制术后血清中ALT、AST、LDH升高，NPT组大鼠术后24 h血清ALT、AST、LDH低于NP组[ALT：(561.31±40.49) U/L比(747.33±40.04) U/L， F＝688.807， P<0.05；AST：(792.38±44.03) U/L比(1 041.87±48.60) U/L， F＝838.255， P<0.05；LDH：(1 702.75±62.32) U/L比(1 974.23±75.80) U/L， F＝514.608， P<0.05]；通路激活及中药干预的交互作用呈现出抑制作用，APT组大鼠术后24 h血清ALT、AST、LDH低于NP组[ALT：(437.88±47.88) U/L比(747.33±40.04) U/L， F＝156.296， P<0.05；AST：(510.02±55.54) U/L比(1 041.87±48.60) U/L， F＝272.576， P<0.05；LDH：(1 473.69±71.94) U/L比(1 974.23±75.80) U/L， F＝134.480， P<0.05]；且术后48 h，NP组、AP组、NPT组、APT组4组大鼠血清ALT、AST、LDH均较术后24 h降低。术后24 h 4组大鼠肝细胞病理均呈现出不同程度坏死，以AP组坏死最严重，且术后48 h各组肝细胞坏死程度较术后24 h轻。术后24 h，各组大鼠肝组织中核因子-κB(NF-κB)及ICAM1的表达以NP组表达最高，APT组最低，而术后48 h各组NF-κB及ICAM1表达趋势同术后24 h，且各自较术后24 h表达有所下降。术后24 h，相对于NP组，AP组及APT组中miR-223、TLR9的表达明显升高，NPT组的表达明显降低；而NPT组、AP组及APT组中mtDNA的表达均明显降低，以APT组降低最显著，术后48 h各组三者表达量均较术后24 h降低，以APT组降低最显著。 结论:通腑泻热法中药可以通过mtDNA/TLR9/miR-223通路改善肝脏缺血再灌注损伤。

目的:探讨肠黏膜组织内微小RNA（miR）-141-3p、miR-223-3p水平和新生儿坏死性小肠结肠炎（NEC）病情的关系及其预测价值。方法:选取2021年1月至2023年12月驻马店市中心医院收治的NEC新生儿78例设为观察组，结合病情严重度划分成轻度（22例）、中度（30例）和重度（26例）3组。另外选取同时间段驻马店市中心医院体检结果健康的新生儿80例设为对照组，观察两组荧光定量聚合酶链反应（PCR）法测定肠黏膜中的miR-141-3p、miR-223-3p水平，比较观察组不同病情程度患儿的miR-141-3p、miR-223-3p水平，两组之间比较采用 t检验，3组之间比较采用方差分析，经Spearman相关分析法分析miR-141-3p、miR-223-3p水平和NEC新生儿病情严重度的关系。绘制受试者工作特征（ROC）曲线并确定曲线下面积（AUC），评估miR-141-3p、miR-223-3p水平对NEC新生儿病情的预测价值。 结果:观察组肠黏膜组织中的miR-141-3p表达为1.65±0.38，对照组肠黏膜组织中的miR-141-3p表达为0.94±0.20，观察组高于对照组（ t＝14.748），差异有统计学意义（ P<0.01）。观察组肠黏膜组织中的miR-223-3p表达为0.75±0.14，对照组肠黏膜组织中的miR-223-3p表达为1.40±0.26，观察组低于对照组（ t＝19.494），差异有统计学意义（ P<0.01）。miR-141-3p在轻度组、中度组、重度组患儿肠粘膜组织的表达分别为1.29±0.21、1.60±0.25、1.92±0.34，miR-223-3p在轻度组、中度组、重度组患儿肠粘膜组织的表达分别为0.88±0.18、0.74±0.15、0.62±0.12，伴随NEC新生儿的病情严重度升高，其肠黏膜组织中的miR-141-3p水平呈现升高趋势，miR-223-3p水平呈现降低趋势，组间差异有统计学意义（ P<0.01）。肠黏膜组织中miR-141-3p水平和NEC新生儿病情严重度之间为正相关（ r＝0.761， P<0.01），miR-223-3p水平和NEC新生儿病情严重度之间为负相关（ r＝－0.655， P<0.01）。miR-141-3p预测NEC新生儿病情是否为重度的AUC为0.947，截断值为1.650，敏感度为0.923，特异度为0.984；miR-223-3p预测NEC新生儿病情是否为重度的AUC为0.889，截断值为0.760，敏感度为0.769，特异度为0.885。 结论:肠黏膜组织中miR-141-3p水平和NEC新生儿病情严重度呈正相关，miR-223-3p水平和其病情严重度呈负相关，两项指标检测有助于预测NEC新生儿病情。