目的:探讨肾透明细胞癌组织中成髓细胞瘤转录因子第1亚型(MYBL1)的变化及微小RNA(miRNA，miR)-509-5p的作用机制。方法:收集2018年1月至2019年6月在广西医科大学第一附属医院泌尿外科确诊的肾透明细胞癌及癌旁组织40例及配对的癌旁组织40例。将肾组织分为miR-509-5p mimics组(miR组)和miR-NC组(对照组)，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肾癌及癌旁组织中MYBL1及miR-509-5p的变化，转染miR-509-5p mimics构建miR-509-5p过表达的786-O细胞后，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的增殖能力、蛋白质印迹法(Western blot)检测转染后的细胞中MYBL1蛋白表达量变化。组间比较采用 t检验。 结果:与癌旁组织比较，肾癌组织中MYBL1的mRNA(－1.501±0.311， t＝4.825， P<0.01)表达上调，而miR-509-5p(4.421±0.515， t＝8.583， P<0.01)表达下调；双荧光素酶基因报告表明MYBL1为miR-509-5p的直接靶基因(0.564±0.017， t＝13.355， P<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:肾透明细胞癌的临床进展可能与miR-509-5p和MYBL1表达量相关，且过表达miR-509-5p可相应的敲低MYBL1，进而减弱肾透明细胞癌的增殖能力。因此miR-509-5p可能通过对MYBL1调控参与肾透明细胞癌增殖。

目的 比较肝细胞肝癌(HCC)及健康人血清中微小RNA-509(miR-509)表达差异其与预后的相关性.方法 前瞻性选取2011年1月至2013年12月在哈尔滨医科大学附属第一医院及哈尔滨市第二医院就诊的HCC患者(HCC组)30例,另选同期体检健康人30例(对照组),采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组受试对象的血清miR-509表达水平,分析miR-509水平与临床病理特征、患者预后的关系.采用Kaplan-Meier生存曲线分析HCC患者生存率与miR-509表达量的关系,不同因素对HCC预后的影响.结果 HCC组miR-509相对表达量低于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),miR-509表达量与甲胎蛋白(AFP)水平、分化程度、是否转移、TNM分期明显相关(P<0.01),miR-509对HCC临床诊断的ROC曲线下面积(AUC)为0.825(Z=5.586,95％CI:2.284～7.951,P<0.01),诊断界值为0.69,对应的灵敏度为96.7％,特异度为63.3％;以miR-509表达量0.69为截点分为高表达组(n=15)和低表达组(n=15),高表达组5年累积生存率为66.7％,低表达组5年累积生存率为26.7％,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析表明,年龄、肝炎病史、肝硬化、肿瘤≥5 cm、AFP≥8.1 ng/L、低分化、合并转移、Ⅲ ～ Ⅳ期为HCC患者死亡的独立危险因素,而miR-509>0.69为保护因素.结论 miR-509在HCC患者血清呈低表达,是临床预后的保护因素.

目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤miRNA的差异表达有望为该肿瘤的诊断和靶向治疗提供依据,筛选皮肤恶性黑色素瘤血清和毛发2个部位的7个特异性miRNA表达差异.方法 收集2016年3月～2017年10月在海军军医大学附属长征医院手术局部切除并经常规组织病理学和免疫组织化学检测证实为恶性皮肤黑色素瘤(CM)的12个病例作为CM组,同期收集非肿瘤疾病的17个皮肤病病例作为对照组.采用qRT-PCR技术检测两组患者的血清和毛发中miRNA表达情况.将检测结果一致的候选miRNA确定为有意义的共同差异表达生物学指标,利用组间差异倍数筛选出差异＞2.5倍差异表达的miRNA.结果 CM组患者血清中7个miRNA有2个上调,5个下调,上调的miRNA包括miR-4487和miR-4706,下调的miRNA包括miR-16、miR-211、miR-4731、miR-509-3p和miR-514a;毛发中有3个上调,4个下调,上调的miRNA包括miR-211、miR-4487和miR-4731;下调的miRNA包括miR-16、miR-4706、miR-509-3p和miR-514a.与对照组比较,CM组miR-4487在血清和毛发中共同上调,但差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,CM组血清和毛发中has-miR-16和has-miR-509-3p表达显著下调,差异均有统计学意义(P＜0.05),并且一致性较高;与对照组比较,CM组血清和毛发中miR-541a表达虽然显示共同下调,但差异无统计学意义(P＞0.05).血清和毛发差异表达2.5倍以上的miRNA为miR-16和miR-514a;单独毛发差异表达2.5倍以上的miRNA为miR-4706;单独血清标本4倍以上差异表达为miR-4731;血清标本10倍以上差异表达的miRNA为miR-211和miR-509-3p.结论 与非肿瘤疾病患者比较,血清和毛发中存在多种miRNA的差异表达,CM患者血清中miR-211和miR-509-3p存在高度显著差异表达,可以作为该肿瘤的生物学标志物;毛发标本miR-4706的差异表达有可能成为黑色素瘤早期非创伤性检测的生物学指标.miRNA检测对CM是可利用的生物学指标,也可能成为今后靶基因治疗的手段.

[背景]锰(Mn)是帕金森病(PD)的环境致病因素之一,长期接触Mn会造成神经损伤.挖掘Mn的神经毒性作用与神经退行性疾病(NDD)尤其是PD的共同机制,对于疾病早期诊断具有重要意义.[目的]通过生物信息学综合分析NDD患者脑组织额叶皮质和Mn暴露的神经细胞中共表达的信使RNA(mRNA)-微小RNA(miRNA),揭示NDD尤其是PD与Mn的神经毒性作用的潜在共同机制.[方法]运用R软件对GSE150696数据库中NDD患者额叶皮质mRNAs和Mn染毒的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)mRNAs进行差异分析;对重叠的差异表达基因(DEGs)进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析.使用miRNet数据库预测miRNAs,通过starBase和miRTarBase数据库鉴定mRNA-miRNA相互作用关系,用Cytoscape软件构建mRNA-miRNA调控网络.通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)聚类GSE77667数据库中与PD关联的核心miRNAs,并对比分析mRNA-miRNA调控网络.[结果]在NDD患者额叶皮质和Mn染毒神经细胞中共鉴定出34个重叠的DEGs,主要富集在白细胞介素-17(IL-17)信号通路、环磷酸腺苷(cAMP)信号通路、原发性免疫缺陷等通路.根据数据库预测结果,最终纳入52个miRNAs,共71对miRNA-mRNA相互作用关系构建调控网络.WGCNA 筛选出 6 个核心 miRNAs:hsa-let-7 i-5p、hsa-mir-155-5p、hsa-mir-219-2-3p、hsa-mir-221-3p、hsa-mir-485-3p 和 hsa-mir-509-3-5p;其中 hsa-let-7 i-5p 和 hsa-mir-155-5p 对应的靶基因分别为FBXW2和CCL2.KEGG分析结果提示CCL2与IL-17信号通路密切相关.[结论]NDD与Mn的神经毒性存在相似的分子调控机制,IL-17信号通路可能通过CCL2和hsa-mir-155-5p在Mn相关的NDD中发挥作用.