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长链非编码RNA HOX转录反义RNA对微小RNA-519c-3p/骨形成蛋白Ⅱ型受体调控骨关节炎进展作用及分子机制
编辑人员丨2023/10/21
目的 探究长链非编码 RNA(LncRNA)HOX转录反义 RNA(HOTAIR)通过 miR-519c-3p/骨形成蛋白Ⅱ型受体(BMPR2)调控骨关节炎进展的作用及分子机制.方法 利用生物信息学网站ENCORI、TargetScanHuman 8.0 工具分析预测LncRNA HOTAIR的下游miR-519c-3p以及靶基因BMPR2,并通过双荧光素酶报告及RIP实验验证分子间的相互结合.通过慢病毒转染将miR-519c-3p在细胞中过表达后,将构建好的软骨细胞分为NC组和miR-519c-3p过表达组(miR-519c-3p组).两组细胞分别应用CCK-8 检测、蛋白质印迹、实时荧光定量聚合酶链反应、酶联免疫吸附试验等检测探究LncRNA HOTAIR/miR-519c-3p/BMPR2 轴对人软骨细胞骨关节炎的进展的影响.结果 与NC组比较,miR-519c-3p组细胞生长变慢,降解酶[降基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9、MMP13、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)4 和 AD-AMTS5]和促炎因子(白细胞介素1β、白细胞介素6 和肿瘤坏死因子α)水平显著降低,而COL2A1 和SOX9 水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).此外,LncRNA HOTAIR可结合miR-519c-3p,并且BMPR2 是miR-519c-3p的下游靶基因,回补实验证实LncRNA HOTAIR可通过miR-519c-3p/BMPR2 轴调控人软骨细胞生长、降解酶以及促炎因子的分泌.结论 LncRNA HOTAIR可通过miR-519c-3p/BMPR2 轴调控骨关节炎的进展.
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编辑人员丨2023/10/21
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miR-519d-3p 靶向 TROAP 调节 Wnt/β-Catenin 信号通路对非小细胞肺癌增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的:探究微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)是否靶向肌钙蛋白相关蛋白(TROAP)调节Wnt/β-Catenin信号通路影响非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭.方法:RT-qPCR评估miR-519d-3p和TROAP mRNA表达;双荧光素酶分析miR-519d-3p与TROAP之间的靶向关系;Western blotting检测TROAP、β-Catenin、Axin2、C-myc的蛋白表达;集落形成实验、流式细胞术和Transwell法检测A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭;BABL/c裸鼠建立移植瘤模型,检测miR-519d-3p对体内肿瘤生长的影响.结果:miR-519d-3p与TROAP存在靶向关系(P<0.05);在体外,miR-519d-3p过表达可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡.此外,miR-519d-3p过表达可下调TROAP表达并降低β-Catenin、Axin2、C-myc蛋白水平(P<0.05);TROAP过表达对A549细胞的作用与之相反(P<0.05).同时,过表达TROAP可部分逆转miR-519d-3p过表达对A549细胞恶性行为的影响(P<0.05).在体内,miR-519d-3p过表达可减小肿瘤体积和肿瘤重量,且显著下调Ki67和N-cadherin表达(P<0.05).结论:miR-519d-3p靶向TROAP抑制Wnt/β-Catenin信号通路,抑制NSCLC恶性生物学行为.
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编辑人员丨2023/8/5
