目的 了解内蒙古阿尔山地区全沟硬蜱(Ixodes persulcatus)携带蜱媒病原体的群落组成及新塔拉塞维奇立克次体(Candidatus Rickettsia tarasevichiae,CRT)和北极内罗病毒(Beiji nairovirus,BJNV)的复合感染情况.方法 在阿尔山市白狼镇采集游离蜱,进行形态学和分子生物学鉴定,对含有未知病原体的蜱类样本提取总RNA后进行宏转录组高通量测序(metagenomic next generation sequencing,mNGS).根据测序结果选取病毒及细菌属水平丰度较高的新发致病病原体进行感染及复合感染情况调查.通过逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)方法检测蜱体内CRT和BJNV的感染情况.对序列测序结果进行同源性和系统进化关系分析.结果 本研究共采集蜱虫617只,均为全沟硬蜱.高通量测序结果显示细菌组成在属水平上,立克次氏体属(Rickettsia)丰度最高,约为77％;在种水平上,加拿大立克次体(Rickettsia canadensis)丰度最高,约为25％,CRT丰度为约1％.病毒组成在属水平上,正内罗病毒属(Orthonairovirus)丰度最高,约为60％;在种水平上BJNV丰度最高,约为45％.在样本中检测出CRT和BJNV感染,池阳性率(pool positivity rate,PPR)分别为96.15％和88.46％,且存在复合感染现象,最低复合感染率(minimum infection rate,MIR)为3.72％.结论 本研究通过宏转录组揭示了阿尔山地区游离的全沟硬蜱微生物群落中活跃物种的组成,首次证实该地全沟硬蜱中存在CRT以及BJNV复合感染现象.因此,应评估在该地区CRT和BJNV对公共卫生的潜在风险,并加强新塔拉塞维奇立克次体病和BJNV引发疾病的疫情监测.

目的 为了解吉林省延边地区蜱类新塔拉塞维奇立克次体(candidatus rickettsia tarasevichiae,CRT)和复合感染新布尼亚病毒(sever fever thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)的感染情况.方法 采集吉林省延边朝鲜族自治州(延边州)延吉、汪清、珲春、敦化、安图、和龙6个县游离蜱,进行形态学分类,通过巢式多聚核苷酸链式反应(nested polymerase chain reaction,nested PCR)和实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法检测蜱体内CRT和SFTSV.对其CRT进行目标DNA测序,分析同源性和系统进化关系.结果 此研究共采集各种蜱类1 032只,分别为全沟硬蜱(ixodes persulcatus)(35.56％)、森林革蜱(dermacentor silvarum)(20.64％)、日本血蜱(haemaphysalis japonica)(20.45％)、长角血蜱(haemaphysalis longicomis)(10.47％)、嗜群血蜱(haemaphysalis concinna)(8.33％)以及其他种类(4.55％).全沟硬蜱、长角血蜱、日本血蜱、森林革蜱检测出CRT,最低感染率(minimum infection rate per 100 ticks,MIR)为10.47％.嗜群血蜱、日本血蜱、全沟硬蜱、长角硬蜱、森林革蜱检测出SFTSV,最低感染率为2.52％.全沟硬蜱、日本血蜱、森林革蜱3种蜱存在CRT和SFTSV复合感染现象,复合感染MIR为1.26％.本研究CRT ompA和17kDa基因序列与中国河南信阳株(KX365196.1)序列同源性达100％.系统进化分析,延边地区蜱CRT ompA基因序列和该河南信阳株基因序列成为一簇,而17kDa基因则形成独立分支.结论 本研究首次从吉林省延边地区游离蜱中检测出CRT,全沟硬蜱为主要媒介宿主.因此,可以明确该地区为新塔拉塞维奇立克次体病自然疫源地.同时发现,延边地区蜱类存在CRT与SFTSV复合感染的现象.因此,在该地区必须加强新塔拉塞维奇立克次体病和发热伴血小板减少综合征(sever fever thrombocytopenia syndrome,SFTS)疫情监测.

目的 了解吉林省延边朝鲜族自治州(延边州)图们江流域边境地区游离蜱携带斑点热群立克次体(SFGR)情况及基因型分布.方法 2017年4—9月,在延边州图们江流域边境地区的珲春、图们、和龙、龙井市用布旗法采集游离蜱进行分类鉴定;采用PCR方法检测蜱体内SFGR ompA基因,通过基因测序鉴定其种类,并进行系统进化分析.计算采用SFGR的组阳性率和最低感染率(MIR),比较不同特征蜱虫间组阳性率的差异.结果 本研究共采集蜱虫3 079只,共分成536个组, SFGR核酸组阳性率为39.7%(213组),MIR为6.9%.森林革蜱、嗜群血蜱、日本血蜱、长角血蜱、全沟硬蜱SFGR核酸组阳性率分别为80.4%(41/51)、14.0%(25/179)、20.2%(18/89)、78.9%(101/128)和25.9%(21/81)(P<0.001);MIR分别为19.4%、3.0%、3.4%、10.8%和5.9%.雌性成虫、雄性成虫、若虫和幼虫SFGR核酸组阳性率分别为36.4%(95/261)、34.2%(67/196)、56.3%(40/71)和7/8(P<0.001);而MIR分别为7.9%、7.7%、4.9%和3.5%.共鉴定5种SFGR基因型,分别为立克次体Candidatus Rickettsia longicornii、拉欧蒂立克次体、黑龙江立克次体、新塔拉塞维奇立克次体和立克次体Rickettsia monacensi ,其同源性均达到了98%~100%. Candidatus Rickettsia longicornii 、拉欧蒂立克次体、黑龙江立克次体、新塔拉塞维奇立克次体与已知种进化关系较近;Rickettsia monacensis进化关系较远.结论 图们江流域边境地区蜱类SFGR感染普遍,存在常见蜱种感染SFGR基因型多样性和携带SFGR蜱虫种类多样性.

目的 调查塞罕坝自然保护区蜱媒斑点热群立克次体(SFGR)的感染情况,分析该地区蜱媒体内SFGR种类并进行同源性分析,为防控蜱媒疾病提供理论依据.方法 在塞罕坝自然保护区内采用布旗法收集游离蜱并提取DNA,采用PCR技术对SFGR外膜蛋白A基因(ompA)和柠檬酸合成酶A基因(gltA)进行扩增,对阳性样本进行序列测定,同时构建分子系统进化树进行分析.结果 在塞罕坝自然保护区内共采集游离蜱919只,其中全沟硬蜱546只、嗜群血蜱242只、森林革蜱131只.测得SFGR阳性蜱72只,总阳性率为7.8％,其中全沟硬蜱阳性率为6.2％(34/546),嗜群血蜱为9.5％(23/242),森林革蜱为11.5％(15/131);不同蜱种SFGR感染率差异无统计学意义(x2=1.261,P=0.263).分别对ompA和gltA基因进行序列比对,发现该地区存在劳氏立克次体与新塔拉塞维奇立克次体2种SFGR.分子系统进化树(ompA和gltA基因)显示,森林革蜱携带的SFGR与GenBank中劳氏立克次体(AH015610、DQ365804)聚为同一分支;全沟硬蜱和嗜群血蜱携带的SFGR与GenBank中新塔拉塞维奇立克次体(MT667416、MT66740)亲缘关系最近,处于同一分支.结论 塞罕坝自然保护区内存在劳氏立克次体和新塔拉塞维奇立克次体,因此对当地蜱以及蜱媒疾病应加强防控,以免对当地人群健康造成威胁.