目的 检测血清蛋白质酪氨酸磷酸酶3(PTPN3)、血管内皮生长因子(VEGF)、易洛魁族同源盒基因5(IRX5)、长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)在肝细胞癌(HCC)中的表达水平,并分析其与患者的病理特征和预后的相关性,为临床工作提供血清学参考.方法 选取2020年6月至2022年10月南阳市中心医院收治的117例HCC患者作为观察组,另选取同期117例良性肝内结节患者作为对照组,比较两组患者的血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平,分析HCC患者血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平与病理特征的关系.随访6个月,依据患者预后情况分为预后良好组72例和预后不良组45例,比较不同预后患者的血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR单独及联合预测HCC预后的效能,采用相对危险度(RR)分析血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平与HCC预后的关系.结果 观察组患者的血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平分别为(181.42±10.19)ng/mL、(154.66±11.82)μmol/L、(82.42±8.23)ng/mL、1.20±0.28,明显高于对照组的(86.64±13.28)ng/mL、(83.64±9.50)μmol/L、(34.80±6.63)ng/mL、1.07±0.25,差异均有统计学意义(P<0.05);不同TNM分期、分化程度、肿瘤直径、伴肝硬化、区域淋巴结转移、Ki-67指数、脉管内瘤栓、包膜侵犯HCC患者血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);肿瘤多发患者的血清VEGF水平为(154.10±10.26)μmol/L,明显高于肿瘤单发患者的(191.62±9.45)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2个月,预后良好患者的血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR水平分别为(153.69±22.24)ng/mL、(113.27±25.64)μmol/L、(70.53±10.24)ng/mL、1.15±0.23,明显低于预后不良患者的(217.58±27.06)ng/mL、(215.33±38.19)μmol/L、(96.35±14.88)ng/mL、1.36±0.28,差异均有统计学意义(P<0.05);绘制血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR单独及联合预测HCC预后的ROC,结果显示各血清联合预测的AUC最大,为0.924(95%CI:0.860～0.965);HCC预后不良的危险度分析结果显示,血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR所致RR值分别为4.604(95%CI:2.602～8.145)、7.139(95%CI:3.660～13.924)、4.733(95%CI:2.749～8.149)、4.690(95%CI:2.575～8.544)(P<0.05).结论 血清PTPN3、VEGF、IRX5、HOTAIR在HCC中的表达异常升高,且与病理特征联系密切,对患者预后有一定评估作用.

目的 研究IRX1(易洛魁家族同源盒基因,Iroquois homeobox gene)在宫颈癌中的表达及其与症癌分期的相关性.方法 选取2015年1月至2017年1月期间来湖北省肿瘤医院就诊的61例宫颈癌患者作为研究对象,其中国际妇、产科联合会I期15例,Ⅱ期22例,Ⅲ期19例,Ⅳ期5例.以正常的人子宫颈上皮细胞HCerEpiC为对照,采用免疫印迹检测IRX1在宫颈癌细胞株Hela,C4-1,Siha中IRX1的蛋白表达,收集宫颈癌癌变组织为实验样本,qPCR检测不同分期宫颈癌癌变组织中IRX1 mRNA表达水平,免疫组化检测IRX1在宫颈癌组织中的表达以及其与临床分期的相关性.结果 免疫印迹检测结果表明,IRX1在各宫颈癌细胞株中的表达高于正常的宫颈上皮细胞,且qPCR检测结果也表明在基因水平上IRX1的表达随癌症分期增加而增加,免疫组化结果显示,IRX1在胞核及胞质中都有表达,癌症分期越高其阳性表达量也相应增高,Ⅰ期阳性着色率为0,Ⅱ期为64％,Ⅲ期为84％,Ⅳ期为100％.结论 IRX1的表达与宫颈癌的临床分期相关,这表明IRX1可能参与了宫颈癌的发生与发展,IRX1有望成为临床上宫颈癌诊断与治疗的新的分子靶点,为宫颈癌的治疗提供新的理论依据.

目的 探讨易洛魁族同源盒基因5(IRX5)对肝癌细胞侵袭与迁移的影响,并验证其与miR-136-5p的靶向关系.方法 取对数生长期肝癌SMMC7721细胞,过表达IRX5实验设空载质粒(pcDNA3.1)组和过表达IRX5(pcDNA3.1-IRX5)组,敲低IRX5实验设阴性对照(sh-NC)组和敲低IRX5(sh-IRX5)组.采用Western blot验证IRX5过表达和敲低效率;采用划痕实验和Transwell实验检测IRX5对肝癌细胞迁移与侵袭的影响;采用miRanda、Targetscan生物信息学软件预测IRX5结合的miRNA和位点;构建野生型和突变型IRX53′UTR双荧光素酶报告基因质粒,采用酶切、基因测序方法鉴定重组质粒是否构建成功.取对数生长期293T细胞,设野生型质粒+阴性对照(IRX5-3′UTR-Wt+NC)组和野生型质粒+miR-136-5p(IRX5-3′UTR-Wt+miR-136-5p)组,突变型质粒+阴性对照(IRX5-3′UTR-Mut+NC)组和突变型质粒+miR-136-5p(IRX5-3′UTR-Mut+miR-136-5p)组,双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性.结果 过表达IRX5组IRX5蛋白表达水平、细胞迁移及侵袭数量均高于空载质粒组,敲低IRX5组IRX5蛋白表达水平、细胞迁移及侵袭数量均低于阴性对照组(均P<0.05).成功构建IRX5基因3′UTR野生型和突变型双荧光素酶报告质粒;双荧光素酶实验结果显示,IRX5-3′UTR-Wt+miR-136-5p组双荧光素酶活性低于IRX5-3′UTR-Wt+NC组(P<0.01),IRX5-3′UTR-Mut+miR-136-5p组与IRX5-3′UTR-Mut+NC组差异无统计学意义.结论 IRX5可促进肝癌细胞的侵袭与迁移,IRX5是miR-136-5p的一个靶基因,miR-136-5p可能通过IRX5的3′UTR抑制肝癌细胞的侵袭与迁移.

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者血清中易洛魁家族同源盒基因5(IRX5)的表达及临床意义.方法 收集117例HCC患者和52例肝脏良性疾病患者的血清样本及相应临床资料,以同时段46例健康体检者的血清样本作为对照组.采用酶联免疫吸附试验检测各组血清IRX5表达,采用德国罗氏公司全自动化学发光免疫分析仪(Cobas e411)和西门子ADVIA2400全自动生化分析仪分别检测血清甲胎蛋白(AFP)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平.比较各组血清IRX5、AFP和ALT水平差异,观察不同临床特征HCC患者的血清IRX5水平,分析HCC患者血清IRX5与ALT、AFP的相关性,评价血清IRX5对HCC的诊断效能.结果 HCC组血清IRX5表达量高于肝脏良性疾病组及对照组(P均<0.05),肝脏良性疾病组及对照组之间IRX5表达水平无统计学差异(P>0.05).HCC组血清IRX5表达量与血清AFP水平呈正相关(r=0.27,P<0.05),与血清ALT水平无关(r=-0.082,P>0.05).IRX5和AFP诊断HCC的受试者工作特征曲线下面积分别为0.738(95％CI:0.667～0.808)、0.838(95％CI:0.781～0.895);二者最佳临界值分别为27.41、7.55 ng/mL,诊断HCC的敏感性分别为73％、77.4％,特异性分别为72.7％、79.5％.血清IRX5与AFP比较,诊断HCC的ROC曲线下面积、敏感性、特异性均无统计学差异(P均>0.05).结论 IRX5在HCC中表达上调,其表达与血清AFP呈正相关,有望成为诊断HCC的候选标志物之一.