核酸药物主要指具有遗传特性和药理活性的含核苷酸或脱氧核苷酸结构的化合物,是一类重要的药物,可用于肿瘤、组织再生、创面愈合、肺纤维化、炎性疾病、微生物感染等治疗.核酸从体外进入体内并进入细胞内的过程,存在较多障碍,如降解、沉淀、蛋白结合等.纳米载体可携带核酸药物进入细胞内,也可在细胞外释放药物后再被细胞摄取,因此核酸纳米制剂的研究意义重大.本综述全面论述了核酸药物分类、理化性质和入胞过程,以及主要纳米制剂类型、新型递送技术、体内过程及研发前景,旨在为核酸药物新制剂研发提供参考.

目的 研究透明质酸(HA)修饰的聚合物纳米粒共递送佐剂和抗原对小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)的成熟与活化效应.方法 以HA修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)及阳离子脂质DOTAP为纳米载体(DOTAP-PLGA)共递送佐剂CpG与模型抗原卵清蛋白(OVA),其中CpG共价结合到纳米粒表面的HA上,OVA物理共混于DOTAP-PLGA纳米载体中.采用透射电子显微镜和动态光散射表征纳米粒;考察纳米粒中CpG和OVA的体外释放情况;利用流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜研究纳米粒在小鼠BMDCs中的摄取和分布;利用流式细胞术和酶联免疫吸附实验分别评价小鼠BMDCs的成熟和细胞因子的表达.结果 制备了共负载CpG和OVA的纳米粒CpG-HA-OVA-PLGA,平均粒径为(305.1±2.2)nm,多分散系数为0.203,透射电子显微镜可观察到经HA修饰的纳米粒有明显的核-壳结构.细胞实验结果表明,CpG-HA-OVA-PLGA纳米粒可被小鼠BMDCs有效摄取并促进CpG的溶酶体释放和抗原OVA的胞质递送;与游离OVA组和游离OVA+CpG组相比,CpG-HA-OVA-PLGA纳米粒组可显著提高BMDCs的共刺激分子CD86和CD40(均P<0.01)、主要组织相容性复合物I以及细胞因子肿瘤坏死因子-α(均P<0.001)的表达.结论 HA修饰的CpG和OVA的纳米粒共递送载体能有效促进树突状细胞的成熟与活化,为研制新型疫苗载体共递送抗原和佐剂提供了依据.

小干扰RNA (Small interfering RNA,siRNA)已被用于各种皮肤病的治疗.然而,由于siRNA具有电负性、极性强、易被核酸酶降解以及难以突破皮肤表皮屏障等缺陷,使其应用受限.因此,安全高效的siRNA递送载体是siRNA有效治疗皮肤病的前提.近年来,随着对siRNA研究的不断深入,基于脂质、聚合物、肽和纳米颗粒的递送系统的开发取得了很大进展,一些新的siRNA透皮递送载体应运而生,如类脂质体、树枝状聚合物、细胞穿透肽、球形核酸纳米颗粒等等.文中将重点介绍近年来siRNA透皮递送载体的最新研究进展.

背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少.目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能的影响.方法:配制甲基丙烯酰酯明胶溶液,然后加入脱细胞半月板细胞外基质溶液与LAP溶液,制备预凝胶溶液,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60 s,检测3种水凝胶的压缩弹性模量、溶胀倍率与降解性能.将半月板纤维软骨细胞加入预凝胶溶液中,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60 s,检测培养对应时间的细胞活性、形态与聚集.结果 与结论:①交联60 s水凝胶的压缩模明显高于交联10,30 s的水凝胶(P＜0.05);②交联10s水凝胶的溶胀倍率明显高于交联30,60 s的水凝胶(P＜0.05),交联30,60s的水凝胶的溶胀倍率比较差异无显著性意义(P＞0.05);③随着交联时间的延长,水凝胶的降解时间延长,交联60 s的水凝胶需要80 min完全降解,交联10s的水凝胶50 min就可以完全降解;④培养24h后,3组水凝胶中的细胞活性均在95％以上,各组之间无差异(P＞0.05);⑤培养1d时,3组水凝胶中的细胞均呈球形且均匀分布;4 d时,3组细胞均开始伸展,交联10s水凝胶中有较小的细胞团;7 d时,3组细胞树突状伸展更为明显,其中交联10s水凝胶中形成了较为明显的细胞团;⑥培养1,7,14d时,交联10s水凝胶中的细胞活性均在85％以上.培养1d时,交联10s水凝胶中的细胞呈球形分布,且分布均匀;培养28 d时,细胞呈树突状伸展,并聚集形成网状结构;⑦结果表明,甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能可通过调整交联密度进行优化.

牙本质粘接依靠粘接剂渗透到脱矿的胶原纤维网状结构和牙本质小管内并原位聚合,形成混合层和树脂突获得主要粘接固位力[11.牙本质因有机物含量高和粘接剂中聚合物降解等因素难以形成高质量的混合层[1～4].粘接界面是牙本质粘接的薄弱环节,其混合层质量及抗老化性能是影响粘接耐久性的关键.