目的:探索定向排列的三维多孔网状（A型）结构和蜂窝煤状垂直贯穿的三维多孔网状（B型）结构对人工真皮血管化速率的影响。方法:采用实验研究方法。本研究中的人工真皮为硅胶层和支架层双层结构，根据支架层结构不同，分为含A型结构和B型结构的人工真皮（以下分别简称A型真皮、B型真皮），其中的A型结构和B型结构分别采用梯度冷冻干燥技术和物理制孔技术制得。采用扫描电镜观测2种真皮支架的微观形貌。采用比重瓶法测定2种真皮支架的孔隙率。参照国家医药行业标准中的方法，于降解4、8、13、24 h测定2种真皮降解液及残留物中羟脯氨酸的含量，反映2种真皮降解率。取L929细胞，按照随机数字表法分为A型真皮组、B型真皮组、阴性对照组、阳性对照组，阳性对照组加入含体积分数5%二甲基亚砜的MEM培养基，阴性对照组加入高密度聚乙烯浸提液，其余2组加入相应的浸提液培养24 h，采用噻唑蓝试剂测定细胞增殖率，并对细胞毒性进行定级。取L929细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVEC），接种于预先置有2种真皮的孔板。接种后1、4、7、14 d，采用免疫荧光法检测L929细胞在2种真皮支架表面的黏附生长状况。接种后7 d，采用免疫荧光法和苏木精-伊红（HE）染色法检测前述2种细胞长入2种真皮支架的情况。在3只6个月龄雄性巴马小型猪背部两侧各制作3个5.0 cm×5.0 cm的全层皮肤缺损创面，6列创面按照随机数字表法分为A型真皮两步法组、B型真皮两步法组和B型支架一步法组。A型真皮两步法组和B型真皮两步法组的创面分别先行A型真皮或B型真皮移植后，再行自体刃厚皮片的移植，B型支架一步法组的创面行B型真皮（揭除硅胶层）+自体刃厚皮片一步法移植。大体观察Ⅱ期术后7 d A型真皮两步法组和B型真皮两步法组及Ⅰ期术后14 d B型支架一步法组的猪背创面出血、渗液和感染情况。同时，采用透明胶片网格法测定自体皮移植面积并计算其存活率。Ⅰ期术后4、7、14 d，HE染色法检测3组猪背创面中支架的炎症细胞、成纤维细胞（Fb）和毛细血管浸润情况。Ⅰ期术后7 d，免疫组织化学法进一步检测3组猪背创面中支架的血管化情况。Ⅰ期术后28 d、3个月，HE染色法检测A型真皮两步法组和B型支架一步法组猪背创面中支架的降解情况。对数据行单因素方差分析、独立样本 t检验、Bonferroni校正。 结果:A型真皮支架表面均匀分布着大量圆形和椭圆形的微孔，纵切面可观察到柱状孔壁大体呈平行定向排列；B型真皮支架表面的蜂窝煤状贯穿大孔呈矩阵有序排列，纵切面蜂窝煤状贯穿孔的孔壁由微孔相互连通成网络结构。A型真皮支架的孔隙率为（93.2±0.7）%，与B型的（95.9±1.0）%相近（ t=4.653， P>0.05）。A型真皮在4、8、13、24 h的降解率与B型真皮对应时间点的降解率相近（ t=0.232、0.856、0.258、7.716， P>0.05）。培养24 h，A型真皮组、B型真皮组、阴性对照组L929细胞的增殖率显著高于阳性对照组（ t=2 393.460、2 538.270、1 077.770， P<0.01）；阳性对照组细胞毒性评级为4级，其余3组为0级。接种后1、4、7、14 d，L929细胞和HUVEC在2种真皮支架中均呈时间依赖性增殖；且2种细胞在B型真皮上的黏附生长、增殖速率高于A型真皮。接种后7 d，L929细胞和HUVEC均已长满B型真皮支架层且至硅胶层一侧；而前述2种细胞向A型真皮内部迁移速度较慢，硅胶层一侧仅见少量细胞。Ⅱ期术后7 d A型真皮两步法组和B型真皮两步法组及Ⅰ期术后14 d B型支架一步法组创面均未出现出血、渗液、感染等情况；3组各6个创面的自体皮植皮存活率均为100%。Ⅰ期术后4、7、14 d，炎症细胞、Fb、毛细血管等逐渐向创面的支架层浸润，且细胞浸润速率从高到低依次为B型支架一步法组、B型真皮两步法组、A型真皮两步法组。Ⅰ期术后7 d 3组创面中支架的血管化速率从高到低依次为B型支架一步法组、B型真皮两步法组、A型真皮两步法组。B型支架一步法组猪背创面中的支架在术后28 d逐渐溃散，术后3个月完全降解；A型真皮两步法组猪背创面中的支架降解情况与前述相似。 结论:与A型结构相比，B型结构可加速人工真皮支架血管化进程，利于联合自体刃厚皮一步法移植修复猪全层皮肤缺损创面。一步法移植的效果与分次移植人工真皮与自体刃厚皮的两步法一致，可为创面治疗提供更优选择。

目的:探讨脾切除联合断流术后复发性门静脉高压伴上消化道出血的肝硬化患者经颈静脉肝内门体分流术(TIPS)治疗的疗效、可行性及安全性。方法:选取徐州医科大学附属医院2015年8月至2020年12月脾切除联合断流术后复发门静脉高压伴上消化道出血的肝硬化患者。共纳入39例患者，男性24例，女性15例，年龄(51.56±9.08)岁。采用Viabahn支架对患者行TIPS治疗，记录术中门静脉压力、手术成功率、止血率，术后复查血液学指标，观察术后疗效及并发症发生率。结果:39例患者中38例成功建立TIPS分流道，1例因门静脉海绵样变性失败，成功率97.44%(38/39)，无手术相关致死性并发症。38例患者共植入8 mm直径Viabahn支架39枚，其中33例(86.84%)将支架次全扩张至6 mm直径，剩余5例将支架完全扩张至8 mm标称直径。术后止血率97.37%(37/38)。TIPS术前的门静脉压力、门静脉压力梯度分别由(31.28±6.24)、(20.61±5.14)mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)降至术后的(19.58±4.69)、(9.24±3.07)mmHg，差异有统计学意义(均 P<0.001)。随访3~36个月，中位随访时间12个月。术后再出血率6.90%(2/29)、肝性脑病发生率13.79%(4/29)、分流道失功率13.79%(4/29)。 结论:TIPS是脾切除联合断流术后复发性门静脉高压伴上消化道出血患者的安全、有效、可行的治疗方法，多数患者使用6 mm直径的分流道即可获得较好的临床疗效。

肩袖肌腱-骨界面的再生在肩袖损伤修复过程中至关重要。肌腱-骨界面由四个逐渐移行的区域构成，即肌腱区、未矿化纤维软骨区、矿化纤维软骨区和骨区。肌腱-骨界面中各区域的发育和再生受到生长因子、无机离子、机械刺激以及低氧环境的调节。受影响肌腱-骨界面发育和再生因素的启发，学者们转向设计促进肌腱-骨界面区域化再生的梯度支架系统，这些支架的梯度分布包括无机离子梯度和生长因子梯度。根据支架系统的不同梯度来促进肌腱-骨界面的细胞成肌腱、成软骨及成骨分化，同步完成促进肌腱-骨止点的愈合，实现肩袖肌腱-骨界面的修复与再生。目前的研究表明梯度多相支架材料具有很高的学术研究价值，支架材料的相关研究在肌腱-骨界面修复方面起到了一定程度的指导作用，有着较好的临床应用前景。在综述影响肌腱-骨界面发育和再生因素的基础上，总结各影响因素在促进肩袖肌腱-骨界面修复过程中对各区域促进成肌腱、成软骨和成骨的作用；探讨目前已报道的用于肩袖损伤修复的梯度多相支架材料，包括无机离子梯度支架与生长因子梯度支架的特性以及对损伤后肩袖组织的修复效果；分析现阶段梯度多相支架在肩袖损伤修复研究过程中所面临的问题和未来的发展方向。

目的:制备一种用于骨软骨修复的丝素蛋白(SF)-壳聚糖(CS)-纳米羟基磷灰石(nHAp)渐进性梯度孔径支架。方法:将SF溶液、CS溶液及nHA悬液等比例混合，采用离心、真空冷冻干燥及化学交联法，3次塑形，制备成渐进性梯度孔径骨软骨(OC)支架-1(2%)、支架-2(3%)、支架-3(4%)。检测各组支架一般情况、孔隙率、热水溶失率、吸水膨胀率、压缩吸水膨胀率、溶失后吸水膨胀率、力学性能、支架内部结构观察及孔径大小。复苏培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)，制备支架浸提液，CCK-8法检测浸提液对BMSCs增殖活性的影响。将BMSCs与支架共同培养，观察支架周围细胞的分布及形态。结果:各组支架形态规则，孔隙率均大于80%；随材料浓度增高，支架吸水膨胀率逐渐减小( P<0.05)，压缩后支架-1吸水膨胀率明显降低( P<0.05)；各组支架热水溶失率无明显差异( P>0.05)，支架在体外完全溶失分别需要65.9、60.9、73.9周；三组支架弹性模量分别为(0.0955、0.1762、0.3468)MPa；扫描电子显微镜(SEM)显示各组支架内部均呈蜂窝状，孔隙形状规则、互通，从支架成软骨侧到成骨侧孔隙分布逐渐密集、孔隙直径逐渐减小( P<0.05)，nHAp含量亦逐渐增多。各组支架浸提液对BMSCs的生长、增殖均无明显毒性。BMSCs与支架共同培养第5 d时，细胞生长状态良好，未出现明显的细胞死亡或形态异常。 结论:本研究成功制备出渐进性梯度孔径OC支架，支架各项物理性能及生物相容性良好，有望成为修复OC缺损的新型仿生复合支架材料。

目的:探讨经颈静脉肝内门体分流术（TIPS）在中国用于门静脉高压症治疗中的现状，以帮助推进TIPS在国内的发展。方法:本研究由中国门静脉高压联盟（CHESS）发起，通过问卷调查的方式全面调查了国内开展门静脉高压症TIPS手术的基本情况，包括手术例数、主要适应证、Early/优先TIPS的开展、门静脉海绵状变性的TIPS手术、侧支循环栓塞、术中门静脉压力梯度测定、常用支架类型、常规抗凝及时间、术后随访、存在的阻碍、国产器械的应用等。结果:调查显示，2021年全国参与调研的545家医院共开展13 527例TIPS手术，94.1%的医院常规进行TIPS术后随访，大多数医院认为TIPS手术的最主要适应证是控制急性出血（42.6%）和预防再出血（40.7%），48.1%的医院开展了Early/优先TIPS，53.0%的医院开展了门静脉海绵状变性的TIPS手术，选择术中常规栓塞侧支循环的占81.0%，其中大多数以弹簧圈和生物胶为栓塞材料，78.5%的医院常规开展术中门体压力梯度测定，TIPS支架的选用上，57.1%的医院会选择Viattor专用支架，57.2%的医院会选择TIPS术后常规抗凝，抗凝时间集中在3~6个月（55.4%），TIPS术受限制的原因以费用问题（72.3%）与相关科室医师认识不充分（77.4%）为主，大部分医院对TIPS术中使用国产器械接受度较高（92.7%）。结论:本次调研显示TIPS治疗是我国门静脉高压症治疗的重要组成部分，但是开展TIPS的总例数与门静脉高压症的总发病人数相差较大，未来仍需推广普及TIPS技术，进一步规范化手术适应证、手术常规操作及器械应用。

由于良好的机械性能和生物相容性，组织工程支架已经成为修复和再生关节软骨缺损的重要方法。随着组织工程技术的不断发展，过去十年已经开发和测试了许多支架的制备和形成方法，但是理想再生支架的制备一直存在争议。关节软骨作为人体关节内的承重组织，其基质结构和细胞组成呈带状，并且从软骨表层至软骨下骨存在着几个平滑的自然梯度，包括细胞表型和数量、特异性的生长因子、基质的组成、纤维的排列、力学性能、营养和氧气的消耗量等均有较为明显的不同。因此，在再生支架的设计中有必要通过重现这些梯度来原位再生关节软骨。最近的文献报道已经有许多新型的梯度仿生支架用于模拟天然关节软骨的自然梯度，这些支架在结构上呈现出不同的机械、物理、化学或者生物梯度，并且取得了不错的修复效果。通过检索关于梯度支架治疗关节软骨缺损的相关文献，首先对天然关节软骨组织的结构、生物化学、生物力学、营养代谢等梯度特性进行研究和总结，然后对目前关节软骨梯度支架的最新设计和构建进行了归类，其次从材料构成（如水凝胶、纳米材料等）以及制备工艺（如静电纺丝、3D打印等）进一步加深对梯度支架的认识，最后讨论了梯度仿生支架在软骨原位组织工程技术中的前景和挑战，为梯度支架成功用于临床转化提供理论基础。

目的 研究不同孔形态结构的3D打印支架应用于骨再生时对细胞黏附的影响.方法 利用MSLattice软件设计四种具有不同孔形态的支架结构,分别是立方形(Cubic)、六边形(Hexagon)、钻石形(Diamond)和螺旋形(Gyroid).利用有限元分析(Finite element method,FEM)和计算机流体建模(Computational fluid dynamics,CFD)的原理,使用Simenns Star CCM+软件对四种支架内部流体域进行组织液流动模拟,模拟细胞黏附过程,测量支架内组织液流速和压力、组织液的渗透率和黏附层厚度.结果 当液体流经四种支架后,压力会被逐渐削弱,但由于支架相对规则,压力均呈现出梯度分布,组织液流经四种支架前的压力值模拟按顺序依次为:Gyroid>Cubic>Diamond>Hexagon.流速:Cubic>Gyroid>Diamond>Hexagon.四种支架的渗透率:Diamond>Hexagon>Cubic>Gyroid.黏附层厚度:Gyroid>Hexagon>Cubic>Diamond.结论 流体力学分析结果显示,Gyroid支架具有更低的渗透率和最高的黏附层厚度,更有利于细胞黏附.

目的 观察TIPS治疗巴塞罗那临床肝癌(BCLC)D期肝细胞癌(HCC)伴严重门静脉高压并发症的安全性.方法 纳入24例BCLC D期HCC伴严重门静脉高压并发症患者,观察TIPS及其后随访资料,分析TIPS技术成功率、门静脉压力梯度(PPG)变化、门静脉高压并发症缓解率、BCLD情况、并发症及死亡率等,评估其疗效.结果 TIPS技术成功率100％.TIPS前、后PPG分别为(32.13±6.93)mmHg及(18.75±5.05)mmHg,TIPS后PPG降低(t=12.604,P<0.001).T IPS后次日,1例因支架内癌栓及血栓致支架急性闭塞,予补充性植入1枚覆膜支架后血流恢复;T IPS后2周门静脉高压并发症缓解率100％,未见相关并发症及死亡.T IPS前及1个月后患者体力状况(PS)评分分别为3.08±0.28及1.97±1.01;肝功能Child-Pugh评分分别为7.50±1.79及5.71±2.22,差异均有统计学意义(t=6.273、5.033,P均<0.001).TIPS后1个月,HCC BCLC C期15例、B期4例、A期3例,与TIPS前差异有统计学意义(χ2=13.565,P<0.001);2例死于多器官功能衰竭.T IPS后3个月2例发生Ⅲ级肝性脑病,均经对症处理后缓解;支架分流道通畅率及门静脉高压并发症缓解率均为100％.结论 TIPS治疗BCLC D期HCC伴严重门静脉高压并发症安全、有效.

目的 构建新型梯度复合羟基磷灰石-二氧化锆(HA/ZrO2)组织工程骨支架,并评估其在猕猴颈椎椎间融合中的效果.方法 通过离子交联法制备壳聚糖水凝胶作为骨形态发生蛋白2(BMP-2)的缓释载体,扫描电镜下观察其微观形态,检测其载药量、包封率及缓释速率;然后分离、培养猕猴源性骨髓间充质干细胞(BMSCs),并进行碱性磷酸酶、冯库萨染色等对其进行鉴定;最后将前期制备好的BMP-2明胶/壳聚糖凝水胶缓释系统和第3代猕猴BMSCs加载于HA/ZrO2泡沫陶瓷,以构建新型组织工程骨,并观察其形态特征.将24只雄性猕猴按照随机数字表法分成4组,其中组织工程骨组(n=8)为植入梯度复合HA/ZrO2泡沫陶瓷负载BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统和第3代猕猴BMSCs,泡沫陶瓷组(n=8)为植入梯度复合HA/ZrO2泡沫陶瓷,自体髂骨组(n=4)为植入自体髂骨,假手术组(n=4)为只对相应部位的软组织进行切开、缝合,未破坏其椎间盘;观察术后颈椎X线(术后即刻、8周、16周)、组织形态学表现(术后8周、16周)及测试相应节段的生物力学(术后16周).结果 扫描电镜下BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶呈3D网状结构,内见均匀分布的壳聚糖微球,其负载BMP-2后的包封率和载药率随时间逐渐降低:第1天分别为87.4%±0.9%和58.2%±0.5%、第15天分别为45.2%±0.6%和30.1%±0.4%,累积释放率第1天为12.6%±0.11%、第15天为55%±0.16%.显微镜下观察见BMSCs的形态呈多样性,以梭形及短棒形等较常见;第3代猕猴BMSCs成骨诱导后的碱性磷酸酶、冯库萨染色以及表面特异性抗原的检测结果显示,符合BMSCs的生物学特性.不同时点的X线及组织形态学观察显示材料内部新生骨量组织工程骨组较泡沫陶瓷组明显增多;生物力学测试结果显示,在最大载荷、抗压强度和能量吸收方面假手术组均低于其他3组(P值均<0.05),在抗压强度上组织工程骨组与自体髂骨组差异无统计学意义(P>0.05).结论 BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合猕猴第3代BMSCs种植于HA/ZrO2泡沫陶瓷构建的新型组织工程骨支架,能有效促进猕猴颈椎椎间融合,在影像学及组织学表现和生物力学测试方面,可达到与自体骨相似的骨代替作用.

目的 制备丝素蛋白(SF)-软骨脱细胞外基质(CECM)仿生支架材料,检测其理化性能特性.方法 采用改良温度梯度热诱导相分离(TIPS)技术结合冷冻干燥法制备出CECM取向支架,然后将CECM浆料与制备好的SF溶液按照质量比1∶1混合后配制成质量分数6％的浆料,通过TIPS技术制备出SF-CECM复合取向支架.对SF-CECM复合取向支架进行扫描电子显微镜(SEM)观察和组织学染色,同时测定支架孔隙率、吸水性以及力学性能.结果 SEM观察可见,支架横断面呈多孔网状结构,纵剖面呈垂直的管状结构.组织学染色显示复合支架脱细胞彻底,有蛋白多糖、胶原成分,与天然软骨成分相似.支架孔隙率、吸水率和纵向压缩弹性模量分别为95.733％士1.010％、94.309％±1.302％和(65.40士4.09)kPa.结论 SF-CECM复合取向支架具有良好的理化特性和生物力学性能,有望成为较理想的组织工程软骨支架.