《中华人民共和国疫苗管理法》和其他相关法律法规对受种者或其监护人的疫苗和预防接种工作知情提出了要求，对预防接种告知方式和内容作出了规定。本共识以该法和《预防接种工作规范》为基础，借鉴国内外经验，阐述了预防接种知情告知的发展和形式，制定了预防接种知情告知理论框架、标准流程和信息、非免疫规划疫苗知情告知原则以及各疫苗知情同意书格式，为疾病控制和预防保健人员在预防接种服务中参考。本部分共识包括流感病毒疫苗、肺炎球菌疫苗、含b型流感嗜血杆菌成分疫苗、肠道病毒71型灭活疫苗、轮状病毒疫苗、水痘减毒活疫苗、带状疱疹疫苗、人乳头瘤病毒疫苗、人用狂犬病疫苗、肾综合征出血热疫苗、钩端螺旋体疫苗、炭疽疫苗、戊型肝炎疫苗、霍乱疫苗、伤寒疫苗、森林脑炎疫苗预防接种知情告知内容。

《中华人民共和国疫苗管理法》和其他相关法律法规对受种者或其监护人的疫苗和预防接种工作知情提出了要求，对预防接种告知方式和内容作出了规定。本共识以该法和《预防接种工作规范》为基础，借鉴国内外经验，阐述了预防接种知情告知的发展和形式，制定了预防接种知情告知理论框架、标准流程和信息、非免疫规划疫苗知情告知原则以及各疫苗知情同意书格式，为疾病控制和预防保健人员在预防接种服务中参考。本部分共识包括流感病毒疫苗、肺炎球菌疫苗、含b型流感嗜血杆菌成分疫苗、肠道病毒71型灭活疫苗、轮状病毒疫苗、水痘减毒活疫苗、带状疱疹疫苗、人乳头瘤病毒疫苗、人用狂犬病疫苗、肾综合征出血热疫苗、钩端螺旋体疫苗、炭疽疫苗、戊型肝炎疫苗、霍乱疫苗、伤寒疫苗、森林脑炎疫苗预防接种知情告知内容。

目的 比较3L转瓶及14L篮式生物反应器培养病毒制备的森林脑炎灭活疫苗的产量及质量.方法 分别采用3L转瓶及14 L篮式生物反应器培养Vero细胞,3L转瓶培养细胞96 h后感染SZV株森林脑炎病毒(MOI=0.01、0.04、0.1及0.4),培养至80 ～ 96 h收获第1次,每隔48 h收获1次(500 mL/次);14 L生物反应器培养Vero细胞7d后感染SZV株森林脑炎病毒(MOI=0.01、0.04、0.1及0.4),感染后96 h开始流加病毒维持液,并收获病毒液,每24 h收获10～15 L.两种培养方式收获的森林脑炎病毒液经超滤浓缩、β-丙内酯灭活、柱层析纯化后获得疫苗原液,并进行相关检定.结果 4种MOI感染Vero细胞,采用3L转瓶方式培养可连续收获6～7次,病毒液产量为3～3.5L,收获液平均滴度为7.4 lgLD50/mL;采用14L篮式生物反应器培养可连续收获14 d,病毒产量140 ～ 160 L,收获液平均滴度高达8.4 lgLD50/mL.两种方法制备森林脑炎灭活疫苗原液各项质量指标均合格,且14 L篮式生物反应器制备原液的效力及蛋白含量优于3L转瓶.结论 应用生物反应器培养工艺制备Vero细胞森林脑炎灭活疫苗的产量及质量高于转瓶培养工艺,本实验为生物反应器制备Vero细胞森林脑炎灭活疫苗的大规模生产及工艺改进奠定了基础.

目的 评价细胞工厂工艺制备森林脑炎灭活疫苗的免疫原性及安全性.方法 利用10 L转瓶和细胞工厂两种工艺在地鼠肾细胞上培养森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV),收获病毒液,经病毒灭活、超滤浓缩、柱层析纯化、除菌过滤后,制备森林脑炎灭活疫苗.采用透射电子显微镜及SDS-PAGE对病毒进行形态观察及鉴定.将两种工艺共制备的6批疫苗免疫小白鼠,评价疫苗的免疫原性;通过家兔刺激试验及豚鼠主动过敏性试验评价疫苗的安全性.结果 两种工艺共制备的6批疫苗原液,透射电镜下观察均可见约为50 nm的圆形病毒颗粒,SDS-PAGE分析均可见相对分子质量分别为50 000和40 000～45 000的蛋白条带,病毒形态及蛋白条带大小均与TBEV相符;免疫保护指数均大于1.0× 105,符合《中国药典》三部(2015版)标准;家兔刺激试验对注射部位无刺激性,豚鼠主动过敏试验无小鼠出现过敏性反应.结论 细胞工厂工艺和10 L转瓶工艺制备的森林脑炎灭活疫苗均具有良好的免疫原性及安全性.

目的 评价生物反应器工艺制备森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)在动物体内的免疫原性及安全性.方法 采用生物反应器培养Vero细胞,感染森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV),连续收获,经Sepharose 4FF柱层析纯化后,制备森林脑炎灭活疫苗,免疫昆明小鼠,检测疫苗在动物体内的免疫原性;通过疫苗接种豚鼠主动过敏性试验、ICR小鼠急性毒性试验、新西兰兔局部刺激性试验,评价疫苗在动物体内的安全性.结果 制备的森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)对小鼠的免疫保护指数大于5.0×105,符合《中国药典》三部(2015版)标准.豚鼠主动过敏试验无豚鼠出现过敏性反应;急性毒性试验ICR小鼠未见明显毒性反应;局部刺激试验新西兰兔注射部位局部大体观察未见明显异常改变.结论 生物反应器工艺制备的森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)具有良好的免疫原性和安全性.

《中华人民共和国疫苗管理法》和其他相关法律法规对受种者或其监护人的疫苗和预防接种工作知情提出了要求,对预防接种告知方式和内容作出了规定.本共识以该法和《预防接种工作规范》为基础,借鉴国内外经验,阐述了预防接种知情告知的发展和形式,制定了预防接种知情告知理论框架、标准流程和信息、非免疫规划疫苗知情告知原则以及各疫苗知情同意书格式,为疾病控制和预防保健人员在预防接种服务中参考.本部分共识包括流感病毒疫苗、肺炎球菌疫苗、含b型流感嗜血杆菌成分疫苗、肠道病毒71型灭活疫苗、轮状病毒疫苗、水痘减毒活疫苗、带状疱疹疫苗、人乳头瘤病毒疫苗、人用狂犬病疫苗、肾综合征出血热疫苗、钩端螺旋体疫苗、炭疽疫苗、戊型肝炎疫苗、霍乱疫苗、伤寒疫苗、森林脑炎疫苗预防接种知情告知内容.

《中华人民共和国疫苗管理法》和其他相关法律法规对受种者或其监护人的疫苗和预防接种工作知情提出了要求,对预防接种告知方式和内容作出了规定.本共识以该法和《预防接种工作规范》为基础,借鉴国内外经验,阐述了预防接种知情告知的发展和形式,制定了预防接种知情告知理论框架、标准流程和信息、非免疫规划疫苗知情告知原则以及各疫苗知情同意书格式,为疾病控制和预防保健人员在预防接种服务中参考.本部分共识包括流感病毒疫苗、肺炎球菌疫苗、含b型流感嗜血杆菌成分疫苗、肠道病毒71型灭活疫苗、轮状病毒疫苗、水痘减毒活疫苗、带状疱疹疫苗、人乳头瘤病毒疫苗、人用狂犬病疫苗、肾综合征出血热疫苗、钩端螺旋体疫苗、炭疽疫苗、戊型肝炎疫苗、霍乱疫苗、伤寒疫苗、森林脑炎疫苗预防接种知情告知内容.

目的 制备森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV)单克隆抗体,并建立TBEV抗原定量双抗体夹心ELISA检测方法,初步应用于疫苗生产过程中TBEV抗原含量监测.方法 以TBEV"森张"株灭活纯化全病毒作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备小鼠单抗杂交瘤及腹水抗体,纯化后鉴定单抗的特异性及相对亲和力.经单抗叠加ELISA配对,建立双抗体夹心ELISA病毒抗原检测方法.以TBEV抗原标准品作为定量标准,建立剂量-反应曲线,验证该方法的敏感度、线性、特异性、准确性、试验内与试验间精密性,对5批TBEV灭活疫苗原液进行检测,初步验证方法的适用性.结果 制备了4株抗TBEV杂交瘤细胞株:5F5、2G12、5E1及2H9;间接ELISA法测定腹水抗体效价为1∶106～1∶107,Western blot鉴定4株单抗均与TBEV包膜E蛋白发生特异性反应;4株单抗相对亲和力:2G12＞ 5F5＞ 2H9＞ 5E1;抗体配对筛选后,将5F5作为包被抗体,工作浓度为10 μg/mL;2G12作为标记抗体,稀释倍数为1∶3200倍.该方法对TBEV抗原最低检出限为0.0098 μg/mL;线性范围为0.0781～2.5μg/mL,R2＞0.98;检测TBEV疫苗生产相关原辅料成分无交叉反应;准确性验证病毒抗原回收率在96.2％ ～ 109.2％之间;试验内和试验间精密性变异系数分别在7.37％ ～ 8.40％、8.66％ ～9.38％之间;用该方法检测5批TBEV灭活疫苗原液呈剂量依赖关系.结论 成功制备了TBEV小鼠单克隆抗体,并建立了TBEV抗原定量双抗体夹心ELISA检测方法,该方法检测TBEV抗原准确可靠,为TBEV灭活疫苗研发及生产过程中病毒抗原检测提供了一种简便有效的监测方法.

目的 应用细胞工厂代替转瓶,培养原代地鼠肾细胞制备森林脑炎灭活疫苗,建立连续培养多次收获工艺,以提高疫苗产量.方法 采用40层细胞工厂培养地鼠肾细胞,确定最佳细胞培养条件.用森林脑炎病毒森"张"株感染细胞,连续收获病毒液,经超滤浓缩、灭活、柱层析纯化后获得疫苗原液,按照《中国药典》三部(2015版)进行相关检测.结果 确定了细胞工厂制备森林脑炎灭活疫苗的工艺参数:细胞工厂最适细胞接种量为3～4对地鼠肾/层;感染病毒96 h后第1次收获,之后每48 h收获1次,可连续收获3～5次.原液中抗原含量、蛋白质含量、地鼠肾细胞蛋白质残留量、牛血清白蛋白残余量均符合《中国药典》三部(2015版)规定.结论 利用细胞工厂培养原代地鼠肾细胞制备森林脑炎灭活疫苗,获得了较高的细胞密度并收获了高毒力的病毒液,可替代转瓶培养工艺大规模制备森林脑炎灭活疫苗.

目的 制备汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)PS-6株小鼠单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),建立HT-NV抗原双抗体夹心ELISA检测方法,验证方法的检测性能并初步应用于疫苗抗原含量检测.方法 以HTNV PS-6株灭活全病毒原液作为免疫原,采用小鼠杂交瘤融合技术,筛选mAb杂交瘤细胞株,制备mAb;用间接ELISA测定mAb效价;用Western blot鉴定mAb特异性;用间接ELISA测定mAb相对亲和力;经抗体配对筛选,建立双抗体夹心ELISA病毒抗原检测方法.以Ⅰ型肾综合征出血热疫苗标准品作为定量标准,验证该方法的检测限、线性范围、特异性、准确度、精密度;对6批次Ⅰ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行检测,初步验证该方法的适用性.结果 获得4株稳定分泌抗HTNV PS-6特异性抗体的阳性杂交瘤细胞株:4B2、3H8、5D7及2A7;间接ELISA检测腹水抗体效价均在1×106～1×107;Western blot鉴定4株mAb均能特异性识别HTNV PS-6;相对亲和力为4B2＞5D7＞3H8＞2A7;抗体ELISA配对筛选后,选用5D7作为包被抗体,4B2作为标记抗体,包被抗体工作浓度为10 μg/mL,HRP标记抗体工作浓度为1 ∶ 5 000.该方法对HTNV PS-6抗原检测限为0.039 1 μg/mL;检测线性范围为0.078 1～2.500 0 μg/mL,R2＞0.97;检测与Ⅰ型肾综合征出血热疫苗生产主要原辅料成分、Ⅱ型肾综合征出血热疫苗、森林脑炎疫苗及甲肝疫苗均无交叉反应;准确度验证,病毒抗原回收率在95.8％～110.5％之间;试验内和试验间精密度,CV分别在6.72％～8.03％、8.24％～9.70％之间.用该方法检测6批次1型肾综合征出血热灭活疫苗原液,结果均呈剂量依赖性.结论 成功制备HTNV PS-6株mAb,建立病毒抗原双抗体夹心ELISA抗原检测方法,方法准确、可靠,可初步应用于Ⅰ型肾综合征出血热灭活疫苗科研、生产过程病毒抗原检测.