氧化磷酸化(OXPHOS)对肿瘤细胞的能量代谢起着重要的调节作用,近年来中药对其干预作用的研究越来越多.为更好地梳理中药对肿瘤细胞氧化磷酸化的影响,本文就近年来中药对乳腺癌氧化磷酸化代谢方式的干预研究进行综述.发现有19个中药成分可影响乳腺癌细胞的OXPHOS,涉及清热解毒、疏肝理气、活血化瘀、清热化湿等中药,其作用机理与调控线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ活力,增加细胞内活性氧水平,调节AKT/mTOR、ERK/AKT、SIRT6/NF-κB等信号通路,从而影响线粒体功能有关.这些研究为未来中医药在该领域的研究提供了有益的探索,具有重要的参考价值.

目的:观察益气活血解毒中药对梗阻性肾病中细胞自噬的作用.方法:将48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、缬沙坦组和中药组,除假手术组外,其余各组结扎大鼠单侧输尿管复制梗阻性肾病的动物模型.缬沙坦组和中药组分别给予10 mg/(kg·d)缬沙坦和14g/(kg·d)益气活血解毒中药,10天后摘取梗阻侧肾脏.通过Western blot和免疫组化检测血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶(Serum and glucocorticoid induced kinase,SGK-1)、自噬相关基因5(Autophagy associated gene 5,Atg5)、自噬相关基因Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(Microtubular-associated protein 1 light chain 3,LC3)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2 (Phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,P-ERK1/2)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Phosphorylated target of rapamycin,P-mTOR)的表达.结果:与假手术组比较,模型组自噬蛋白Atg5、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、SGK-1与P-ERK1/2表达增强,P-mTOR表达减弱,差异均有统计学意义(P＜0.01).与模型组比较,缬沙坦组和中药组自噬蛋白Atg5、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、SGK-1及P-ERK 1/2表达降低,P-mTOR表达增强,差异均有统计学意义(P＜ 0.05,P＜0.01).结论:益气活血解毒中药可以通过调控SGK-1、P-ERK1/2和P-mTOR通路,抑制盐皮质激素受体(Mineralocorticoid receptor,MR)的活化,从而纠正梗阻性肾病中细胞自噬的异常.

目的 探究活血解毒中药配伍对缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞自噬损伤的保护作用及其机制.方法 采用H9 C2心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,筛选有效给药浓度,采用C C K8法检测细胞活性;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜观察自噬标志物LC3的表达;实时荧光定量PCR检测Beclin-1、LC3和Bcl-2 mRNA含量;Western blot法检测Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cleaved caspase-3、β-catenin、p-p65、Bcl-2、p62、p-AKT、p-mTOR等蛋白的表达.结果 活血解毒中药能增强心肌细胞生长活性,降低其凋亡率和自噬水平;增强PI3K/Akt/mTORC1通路的活化;减少Bec-lin-1和LC3 mRNA含量,升高Bcl-2 mRNA含量;减少Bec-lin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cleaved caspase-3、β-catenin、p-p65等蛋白的表达,增加p62、p-AKT、p-mTOR和Bcl-2等蛋白的表达量.结论 活血解毒中药可通过促进PI3K/Akt/mTORC1信号通路活化增强,抑制心肌细胞过度自噬和凋亡水平,从而对缺氧/复氧诱导的H9 C2心肌细胞损伤起到保护作用.

目的 基于网络药理学探索活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化的物质基础和作用机制,并进行实验验证.方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台检索活血解毒Ⅰ号方活性成分及其靶点,采用Uniprot蛋白质数据库标准化蛋白质靶点信息.通过在线人类孟德尔遗传、GeneCards、DrugBank数据库获取动脉粥样硬化相关靶点基因,筛选药物和疾病共同靶点,构建"成分-靶点"网络并筛选关键活性成分.通过STRING平台构建共同靶点蛋白质-蛋白质相互作用网络,筛选关键靶点基因.采用Matascape数据库进行GO和KEGG通路富集分析,构建"药物-靶点-通路"多维网络图.选用SPF级8周龄雄性ApoE-/-小鼠30只,体重18～22 g,通过高脂饲料喂养12周建立动脉粥样硬化模型,按随机数字表法将其分为模型组、他汀组、活血解毒Ⅰ号方组,每组10只,另选相同周龄及遗传背景的雄性C57BL/6J小鼠10只作为正常对照组.他汀组予阿托伐他汀3.400 mg/(kg·d),活血解毒Ⅰ号方组予药液2.171 g/(kg·d),正常对照组、模型组予等量生理盐水,四组均灌胃12周.实验结束后采用比色法检测四组血脂指标,对主动脉行HE染色及斑块比例定量分析,Western blot检测四组主动脉组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、caspase-3和核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白表达水平.结果 共筛选出活血解毒Ⅰ号方活性成分25个,潜在靶点214个,与动脉粥样硬化疾病共同靶点118个.GO分析显示2 173个结果包括通路165条.活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化的关键活性成分包括槲皮素、黄芩素、β-谷甾醇、鞣花酸、小檗浸碱、非洲防己碱、小檗碱等,可调控 TNF、AKT1、IL-6、VEGFA、TP53、IL-1B、JUN、CASP3、PTGS2、PPARG等相关靶点,并可能通过TNF、Toll样受体、NF-κB、HIF-1、PI3K-Akt、细胞凋亡、T细胞受体、MAPK、Foxo等信号通路对动脉粥样硬化的发生发展产生影响.实验结果显示,模型组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于正常对照组,高密度脂蛋白胆固醇水平低于正常对照组,活血解毒Ⅰ号方组血清TC、TG、LDL-C低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).主动脉根部HE染色结果显示,正常对照组主动脉根部无粥样斑块沉积,余各组主动脉根部管壁均可观察到不同程度的粥样斑块沉积.斑块比例定量分析显示,活血解毒Ⅰ号方组斑块面积占血管面积的比例低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).模型组TNF-α、IL-6、caspase-3、NF-κBp65蛋白水平高于正常对照组,活血解毒Ⅰ号方组低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 本研究初步揭示了活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化的"多成分-多靶点-多通路"作用网络,实验验证其作用机制与抑制相关炎症通路及细胞凋亡有关,为活血解毒Ⅰ号方治疗动脉粥样硬化临床应用提供研究依据.